一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法

摘要

本发明一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法，包括如下步骤：(1)设计单链DNA，单链DNA的中间部分与目标寡聚核苷酸碱基互补；(2)根据目标寡聚核苷酸选择上游辅助RNA和下游辅助RNA，且上游辅助RNA的3’端含有羟基，下游辅助RNA的5’端含有单磷酸基团；单链DNA的两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA碱基互补；(3)利用T4DNA连接酶将目标寡聚核苷酸两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA连接起来；(4)将单链DNA消化掉，得到中间部分为目标寡聚核苷酸的待逆转录单链RNA；(5)在待逆转录单链RNA的3’端设计引物，将待逆转录单链RNA逆转录成cDNA。不仅能够检测10nt以上的核苷酸，特别是能够检测6‑10nt长的小片段核苷酸。