一种高通量筛选真核生物细胞响应环境极端pH的靶点基因的方法

摘要

本发明涉及一种高通量筛选真核生物细胞响应环境极端pH的靶点基因的方法，首先构建真核生物CRISPR/Cas全基因组编辑载体文库，然后将该载体库稳定整合到真核生物细胞，构建真核生物全基因组编辑细胞文库。然后取该细胞文库，均匀的分成5部分，在不同的pH条件下培养，收集并且抽提基因组DNA，分别用高通量测序法检测各组细胞的sgRNA丰度，筛选真核生物细胞响应环境极端pH的靶点基因。本发明在全基因组范围内筛选真核生物响应环境极端pH的靶点基因，能够最大限度的筛选真核生物响应环境极端pH的靶点基因，成本低，效率高，范围广。对筛选真核生物响应环境极端pH的靶点基因和研究真核生物与环境互作具有极大地意义。