用于高效筛选无外源DNA的基因编辑作物的病毒载体及其构建方法和应用

摘要

本发明提供了一种用于高效筛选无外源DNA的基因编辑作物的病毒载体及其构建方法和应用，涉及植物基因编辑技术领域；将特异靶向PDS基因的一段sgRNA插入到TRV2载体中。不含有Cas9外源基因的T1代植株中，由于没有Cas9的切割，叶片仍保持正常的绿色；由此，依据叶片颜色的变化，就可以直观高效地分离出在T1代具有遗传突变的不含Cas9的番茄植株。本发明所述方法可以在T1代中高效筛选已完成目标基因编辑的无转基因植物(效率达80％以上)，省时省力，这将对基础研究和作物改良的基因组编辑技术产生积极影响。