一种用于病原微生物检测的测序文库构建方法和试剂盒

摘要

本发明公开一种用于病原微生物检测的测序文库构建方法和试剂盒，所述方法包括(1)将提取的样本放入样本保存液，进行DNA/RNA共提取，并对宿主rRNA进行去除；(2)加入逆转录酶使其中的RNA逆转录形成RNA/cDNA复合双链；(3)逆转录产物cDNA/RNA复合双链和DNA双链的混合物中直接加入突变型Tn5转座酶及打断缓冲液进行片段化，片段化结束后用终止反应液5×TS‑plus进行终止反应；(3)加入扩增缓冲液、链置换和扩增酶混合物，进行PCR扩增；(4)磁珠纯化即得到原始DNA/RNA的可测序文库。所述方法大大减少了建库步骤，缩短建库时间，降低对样本起始量的要求，提高文库产出和下机数据质量。