通过突变degU基因提高枯草芽孢杆菌表面活性素产量的方法

摘要

本发明涉及通过突变degU基因提高枯草杆菌表面活性素(Surfactin)产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌Bs916(CGMCC No.0808)为出发菌株，以大肠杆菌T/A克隆载体pMD19‑T Simple为骨架构建一个突变载体pT‑degU‑cm，利用同源重组原理，通过双交换过程突变枯草芽孢杆菌Bs916基因组中degU基因的策略构建了一株高产表面活性素的菌株B9ΔdegU。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产表面活性素的能力显著提高。随后，以菌株B9ΔdegU为出发菌株，利用Surfactin具有排油活性的能力作为指示标准，筛选影响B9ΔdegU发酵产生Surfactin的培养基成分；通过Plackett‑Burman实验设计、中心组合实验设计(CCD)和响应曲面法(RSM)，优化了B9ΔdegU高产Surfactin的发酵培养基成分。