重组载体、菌株、水稻纹枯病菌效应蛋白的表达纯化方法

摘要

本发明公开了一种重组载体、菌株、水稻纹枯病菌效应蛋白的表达纯化方法，属于生物技术领域。该重组载体用于表达水稻纹枯病菌效应蛋白；所述的重组载体是通过将水稻纹枯病菌效应蛋白的编码基因插入到pET‑32a载体的EcoRI与XhoI酶切位点之间得到的；所述水稻纹枯病菌效应蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示；所述水稻纹枯病菌效应蛋白的编码基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明通过将带有重组载体的菌株进行活化培养后，再添加异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导目的蛋白表达，然后通过使用蛋白溶解缓冲液溶解目的蛋白后，再通过不同的缓冲液进行多次洗脱以及透析处理后，便可获得浓度较高的水稻纹枯病菌效应蛋白溶液。