测定生物样本中特异位点DNA甲基化水平的方法及其应用

摘要

本发明公开一种测定生物样本中特异位点DNA甲基化水平的方法及其应用。该方法包括步骤：获取生物样本，并提取生物样本中的待测DNA片段；修饰待测DNA片段，将待测DNA片段中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶；以修饰后的DNA片段为模板DNA片段，以第一引物和第二引物分别从模板DNA片段两侧对模板DNA片段进行PCR扩增；处理经过PCR扩增后的PCR产物，去除多余的第一引物、第二引物和dNTPs，并纯化回收；检测待测DNA片段CpG位点的甲基化和去甲基化荧光偏振值；根据待测DNA片段CpG位点的甲基化和去甲基化荧光偏振值计算待测DNA片段的甲基化水平。实施本发明，具有简便、快捷、高通量、低成本、无需分离纯化等优点，适合大量检测临床珍贵的低浓度DNA样本的甲基化。