SV40基因重组构建巨核细胞模型及其细胞库

摘要

本发明涉及用于医学研究领域的SV40LT基因介导巨核细胞模型及其细胞库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入体外培养的巨核细胞，使重组子与细胞的DNA整合，以G418筛选的含阳性重组子的细胞，作传代、扩大培养，筛选细胞形态、细胞生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞生物学特性者作为巨核细胞模型冻存于液氮中，以此构建SV40LT基因介导巨核细胞模型及其细胞库，以建立在体外长期传代培养巨核细胞的方法并用于体外研究巨核细胞发育、功能和病理机制。