Southern印记杂交用恒压转膜夹

摘要

本发明涉及一种Southern印记杂交用恒压转膜夹，包括底部固定设置有压力计2的变压存液槽1，压力计2表面固定设置载物台3，载物台3上方设置有一个可上下运动的两端带孔的夹板4，带孔夹板4与变压存液槽1之间通过带有可拆卸旋转螺母5的加长螺杆6滑动连接，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧，所述带孔夹板4下部中间位置固定连接带有螺栓7的液压伸缩杆8，所述液压伸缩杆8下端固定连接压板9，刻度尺10平行于螺杆6固定连接在存液槽1的后面。本发明通过设置在存液槽底部的压力计，能实现数字化准确确定作用在凝胶上的压力，使转膜过程压力保持稳定。另外，本发明还实现了恒压条件下快速方便地更换吸水纸，达到了转膜的最佳状态。

说明书

技术领域

本发明涉及转膜装置技术领域，更具体的说，本发明涉及一种Southern 印记杂交用恒压转膜夹。

背景技术

Southern印迹杂交（Southern blot）是1975年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern 印记杂交是分子生物学的经典实验方法，其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号，通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度，该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。由于该技术的操作比较烦琐、费时，所以现在有一些其他的方法可以代替Southern 杂交，但该技术也有它的独特之处，是目前其他方法所不能替代的，如限制性酶切片段的多态性(RFLP)的检测等。

在Southern印迹杂交实验中，有一个环节需要将凝胶中的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上去，一般采用传统的毛细法转膜，该法是在适当的吸水纸上面加上重物，利用重物的压力挤压凝胶使凝胶上变性的DNA转移到硝酸纤维素膜上。其原理是：容器中的转移缓冲液含有高浓度的NaCl和柠檬酸钠，上层吸水纸的虹吸作用使缓冲液通过滤纸桥、滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤膜向上运动，同时带动凝胶中的DNA片段垂直向上运动，凝胶中的DNA片段移出凝胶而滞留在膜上。在实验时，通常将滤纸、凝胶、硝酸纤维素滤膜、滤纸、多层吸水纸依次叠放在电泳槽内的载物平台上，然后在吸水纸上压上玻璃板，在玻璃板上放上砝码来完成这一过程。虽然该方法实验器具简单，但装置由于缺少支撑物，稳定性差，砝码容易倾倒，造成转膜失败。另外，Southern印迹转膜的时间通常在24小时左右，如若缺少人员在旁边守护，吸水纸更换不及时，导致受力不均，或者更换吸水纸时候操作不当也会造成转膜失败，而且，利用毛细法转膜转移效率不高，尤其对分子量较大的DNA片段更是如此 。公开号为CN101519633A的专利公开了一种核酸印迹转膜装置，包括一个用于盛放溶液的转膜槽，转膜槽上部设置有一个载物平台，载物平台上方设置有一个可上下运动的带有配重的压板，压板与转膜槽之间通过滑杆连接。虽然该装置提高了转膜过程的稳定性，但该装置只能根据凝胶的厚薄笼统估算所需重物的压力，不能数字化准确调节作用在凝胶上的压力，且该装置也不能实现在恒压条件下快速更换吸水纸， 达不到最佳转膜效果。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种简单实用、操作方便、转膜效率高的Southern 印记杂交用恒压转膜夹。

本发明所述的Southern 印记杂交用恒压转膜夹，包括底部固定设置有压力计2的变压存液槽1，压力计2表面固定设置载物台3，载物台3上方设置有一个可上下运动的两端带孔的夹板4，带孔夹板4与变压存液槽1之间通过带有可拆卸旋转螺母5的加长螺杆6连接，所述螺母5用于固定夹板4，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧，所述带孔夹板4下部中间位置固定连接带有螺栓7的液压伸缩杆8，螺栓7用于调节液压伸缩杆8的伸缩长度，所述液压伸缩杆8下端固定连接压板9，刻度尺10平行于螺杆6固定连接在存液槽1的后面。

优选地，所述变压存液槽1为长方体容器，所述压力计2镶嵌在变压存液槽1的底部。

优选地，所述载物台3为长方体塑料载物台，所述压力计2与所述载物台3之间采用专用胶固定粘结。

优选地，带螺母加长螺杆6以焊接的方式与所述存液槽1固定连接。

进一步优选地，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧中心线位置。

优选地，所述带螺母加长螺杆6的直径为10mm，带孔夹板4两端圆孔直径为12mm。

优选地，液压伸缩杆8下端通过焊接的方式固定连接压板9，压板9是整个装置的施压部分，使用时将压板9向上提起，然后旋紧螺栓7，待压力稳定以及转膜材料准备好以后打开螺栓即可。

优选地，刻度尺10用螺丝平行于螺杆固定连接存液槽1的后面，刻度尺10的作用主要是为了调节带孔夹板4的水平，使夹板保持平衡稳定，凝胶受力均一、压力计的度数更准确。

与现有技术相比，本发明涉及的一种Southern 印记杂交用恒压转膜夹具有如下优点和进步：（1）本发明的夹板两端通过带螺母的螺杆与存液槽固定连接，大大提高了转膜过程的稳定性；（2）本发明设置的刻度尺，便于调节带孔夹板的水平，使夹板保持平衡稳定，凝胶受力均一、压力计的度数更准确，保证了转膜过程在水平状态下平稳进行；（3）本发明通过设置在存液槽底部的压力计，能实现数字化准确确定作用在凝胶上的压力，使转膜过程中作用在凝胶上的压力保持稳定，达到最佳转膜效果；（4）本发明是通过旋转螺母调整夹板的高低来改变压力的，在夹板高度不变的情况下，当需要更换吸水纸时只需要把与夹板连接的带有液压伸缩杆的压板向上抬起，更换完吸水纸后放开压板，液压伸缩杆会推动压板压紧吸水纸，实现了恒压条件下快速方便地更换吸水纸，达到转膜的最佳状态。（5）本发明的转膜夹简单实用、操作方便、转膜效率高。

附图说明

图1是本发明的Southern 印记杂交用恒压转膜夹的结构示意图；

图2是本发明的Southern 印记杂交用恒压转膜夹的剖视图。

具体实施方式

如图1所示，本发明的Southern 印记杂交用恒压转膜夹，包括底部固定设置有压力计2的变压存液槽1，压力计2表面固定设置载物台3，载物台3上方设置有一个可上下运动的两端带孔的夹板4，带孔夹板4与变压存液槽1之间通过带有可拆卸旋转螺母5的加长螺杆6滑动连接，所述螺母5用于固定夹板4，所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧，所述带孔夹板4下部中间位置固定连接带有螺栓7的液压伸缩杆8，螺栓7用于调节液压伸缩杆8的伸缩长度，所述液压伸缩杆8下端固定连接压板9，刻度尺10平行于螺杆6固定连接在存液槽1的后面。

所述变压存液槽1为长方体容器，所述压力计2镶嵌在变压存液槽1的底部。

所述载物台3为长方体塑料载物台，所述压力计2与所述载物台3采用专用胶固定粘结。

带螺母加长螺杆6以焊接的方式与所述存液槽1固定连接。

所述带螺母加长螺杆6固定设置在存液槽1的两侧中心线位置。

所述带螺母加长螺杆6的直径为10mm，带孔夹板4两端圆孔直径为12mm。

液压伸缩杆8下端通过焊接的方式固定连接压板9，压板9是整个装置的施压部分，使用时将压板9向上提起，然后旋紧螺栓7，待压力稳定以及转膜材料准备好以后打开螺栓即可。

刻度尺10用螺丝平行于螺杆固定连接存液槽1的后面，刻度尺10的作用主要是为了调节带孔夹板4的水平，使夹板保持平衡稳定，凝胶受力均一、压力计的度数更准确。

使用时，以本发明的操作方法做进一步的说明：

实验前，先将转膜夹上的旋转螺母5旋下，取下夹板4，将压板9向上提压使液压伸缩杆8缩回到最短位置，然后旋紧螺栓7将其固定，并检查压力计2是否正常。

如图2所示，把滤纸桥11a铺在存液槽1中的载物台3上，并在存液槽1内加入适量的转膜溶液，滤纸桥11a两头悬挂入存液槽1内的溶液中，同时用该溶液湿润整张滤纸桥11a。

将含有DNA片段的凝胶12、硝酸纤维素滤膜滤膜13、滤纸11b、吸水纸14依次平铺叠放到载物台面上的滤纸桥11a上。

装上夹板4，使夹板4与刻度尺10的刻度线保持平行，同时旋紧夹板4两端的螺母5使其达到合适的压力，这时压力计显示的压力即为凝胶所承受的压力。最后打开螺栓7，使与液压伸缩杆8固定连接的压板9紧贴吸水纸14。这时压力计2显示的压力即为凝胶所承受的压力。

当需要更换吸水纸时，将与夹板4连接的带有液压伸缩杆的压板9向上抬起，更换完吸水纸后放开压板9，液压伸缩杆8会自动推动压板压紧吸水纸，由于此过程未调节夹板4的高度，因此凝胶所承受的压力恒定，实现了恒压条件下快速方便地更换吸水纸，达到转膜的最佳状态。

特别说明，本发明由于制作简单，而且每个实验室所需要转膜的大小不同要根据实际情况量身定做，故而在设计的同时没有将制作的尺寸详细说明，并附整个发明的示意图仅供参考。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围。