一种针对蜡质油污泥的快速无害化生物降解方法

摘要

本发明提供了一种针对蜡质油污泥的快速无害化生物降解方法，通过制备种子液、加热分散蜡质油污泥、制备降解体系和生物降解来实现，专门针对采油炼油过程产生的蜡质油污泥，能够有效地降解蜡质油污泥中的物质，本发明的方法能够有效地降解油污泥中的石油烃类物质，将部分石油烃转化为糖蛋白类物质，最终达到油污泥无害化处理的要求。利用生物处理工艺，不产生二次污染，对环境不产生影响；处理工艺简单，运行成本低；处理时间短，效率高。油污泥转化产物对油污泥的降解具有促进作用，这是在本发明试验过程中的一个意料之外的效果。

说明书

技术领域

本发明属于固体废弃物处理领域，涉及蜡质油污泥的处理，具体涉及 一种针对蜡质油污泥的快速无害化生物降解方法。

背景技术

固体废弃物污染是危害人类居住环境，影响人类健康的重要因素之 一，固体废弃物处理成为当今一项难以治理的难题。含油污泥作为固体废 弃物的一类，大量占用土地、污染土壤、污染水体、污染大气，对周围的 环境质量产生着不良的影响，是目前固体废物处理中一个比较大的难题。

含油污泥处理是石油工业环境保护的重要工作内容之一，其无害化和 资源化处理技术成为近年来的研究重点。近年来,含油污泥的处理倍受关 注,国内外普遍采用填埋、分散施耕、集中干燥焚烧、化学固化处理、化 学氧化降解、化学溶剂清洗、混凝法固液分离等方法,存在着成本高,易造 成二次污染的问题。当前研究者对含油污泥进行多方面的探索,其中污泥 生物处理是一种发展趋势。

生物处理技术主要是利用微生物降解、同化含油污泥中的油类物质或 水中的油脂类有机物，使其转化为CO₂、H₂O及其它无毒害物质的一种油污 泥处理技术。生物处理技术对环境影响小，生物处理是自然降解过程的强 化，具有处理效果好、节约能源、投资少、运行费用低等优点,目前受到 国内外环保产业界人士普遍关注和重视。目前，已有生物处理技术主要集中 用于采油、炼油或者运输过程中被污染的土壤和水体的处理方法。

蜡质油污泥指清罐油污泥经过高压水蒸气、酸洗、碱洗处理后剩余部 分污泥。蜡质油污泥成分复杂，含有大量老化原油、蜡质、沥青质、胶 体、固体悬浮物、细菌、盐类、酸性气体、腐蚀产物等，还包括生产过程 中投加的大量絮凝剂，缓蚀剂，阻垢剂，杀菌剂等水处理剂。因此，对蜡 质油污泥的处理是目前石油工业迫待解决的一个难题。

现有技术中，针对蜡质油污泥通常的处理方法主要有溶剂萃取、热水洗、 热分解、超声脱油技术以及生物处理技术等。但这些方法均存在不足。如溶 剂萃取技术萃取剂用量大、成本高，且溶剂回收过程需要消耗大量能源；热 水洗技术会产生二次污染；热分解技术能耗高，操作复杂；目前的生物处理 技术耗时长，不能将有用的资源回收再利用。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于，专门针对采油炼油过 程产生的蜡质油污泥，提供一种快速无害化生物降解方法，能够有效地降解 蜡质油污泥中的石油烃类物质，而不污染环境，最终达到蜡质油污泥无害 化处理的要求，克服现有生物处理技术中存在的降解慢、资源不能回收利用 等问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案予以实现：

一种针对蜡质油污泥的快速无害化生物降解方法，该方法以铜绿假单胞 菌NY3和施氏假单胞菌N2为菌源对蜡质油污泥进行处理。

所述的蜡质油污泥中添加有木屑。

所述的木屑的粒径为0.3mm～1mm，优选0.3mm。

所述的蜡质油污泥中还加入有促进剂，所述的促进剂为甘油、镁离子或 甘油和镁离子的混合物。

如上具体的生物降解方法，该方法包括以下步骤：

步骤一，制备种子液：

从铜绿假单胞菌NY3菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛肉膏蛋白胨液 体培养基中培养，得到铜绿假单胞菌NY3种子液；

从施氏假单胞菌N2菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛肉膏蛋白胨液体 培养基中培养，得到施氏假单胞菌N2种子液；

步骤二，加热分散蜡质油污泥：

将待降解的蜡质油污泥加热至熔融状态，向蜡质油污泥中加木屑，搅拌 分散均匀，停止加热，使得蜡质油污泥的降温，得到分散体系；

步骤三，制备降解体系：

在摇床上，向步骤二中的分散体系中加入无机盐培养基，得到降解体系；

步骤四，生物降解：

向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得的种子液，所述的种子液 为铜绿假单胞菌NY3种子液和施氏假单胞菌N2种子液的混合物，在摇床 上，在恒温好氧培养5d～8d。

优选的生物降解方法，该方法包括以下步骤：

步骤一，制备种子液：

从铜绿假单胞菌NY3菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛肉膏蛋白胨液 体培养基中培养，得到OD_600nm为1.82±0.08的铜绿假单胞菌NY3种子液；

从施氏假单胞菌N2菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛肉膏蛋白胨液体 培养基中培养，得到OD_600nm为1.82±0.08的施氏假单胞菌N2种子液；

步骤二，加热分散蜡质油污泥：

将待降解的蜡质油污泥加热至熔融状态，向蜡质油污泥中加木屑，搅拌 分散均匀，停止加热，使得蜡质油污泥的温度降至28～35℃，得到分散体 系；

蜡质油污泥与木屑的质量比为(5～7)：1；

步骤三，制备降解体系：

在摇床上，向步骤二中的分散体系中加入无机盐培养基，得到降解体系；

其中：分散体系中每2g蜡质油污泥对应加入5ml～10ml无机盐培养基；

步骤四，生物降解：

向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得的种子液，所述的种子液 为铜绿假单胞菌NY3种子液和施氏假单胞菌N2种子液的混合物，在摇床 上，在28～35℃下恒温好氧培养5d～8d；

其中：降解体系中每2g蜡质油污泥对应加入5ml～10ml种子液；

所述的种子液中，铜绿假单胞菌NY3种子液和施氏假单胞菌N2种子 液的体积比为7:3～9:1。

进一步地，步骤三种所述的降解体系中还加入有促进剂，所述的促进剂 为甘油、镁离子或甘油和镁离子的混合物。

步骤三所述的无机盐培养基包括(g/L)：5.0g NH₄NO₃，1mL微量元素 (2.5g FeSO₄·7H₂O，0.1g ZnSO₄·7H₂O，0.2g MnCl₂·4H₂O，0.024g  CoCl₂·6H₂O，0.024g NiCl₂·6H₂O，0.017g CuCl₂·2H₂O，0.109g  Na₂MoO₄·2H₂O，0.062g H₃BO₃，5mL 12.1M HCl，溶于1000mL蒸馏水)， 0.1mL 1M MgSO₄·7H₂O溶液，0.05mL 1M CaCl₂·2H₂O溶液，100mL磷酸 盐缓冲液，调pH为7.5，加蒸馏水于1000mL容量瓶中定容，121℃高压水 蒸气灭菌30min。

进一步地，所述的蜡质油污泥的含油率为24％～30％。

本发明与现有技术相比，具有如下技术效果：

本发明的方法专门针对采油炼油过程产生的蜡质油污泥，能够有效地降 解蜡质油污泥中的物质，本发明的方法能够有效地降解油污泥中的石油烃 类物质，将部分石油烃转化为糖蛋白类物质，最终达到油污泥无害化处理 的要求。利用生物处理工艺，不产生二次污染，对环境不产生影响；处理工 艺简单，运行成本低；处理时间短，效率高。

油污泥转化产物对油污泥的降解具有促进作用，降解2天时，相比未添 加油污泥转化产物的降解体系，油污泥中各直连烷烃的降解率提高14-20％ 之间，菲和芘的降解率分别提高23％和20％，这是在本申请试验过程中的一 个意料之外的效果。

附图说明

图1是油污泥生物降解转化产物的红外光谱图。

图2是使用不同分散载体对菌体降解蜡质油污泥效率的影响，其中，图 2(a)是未降解蜡质油污泥色谱图；图2(b)是分散载体粒径为0.3mm的 玉米芯，降解6d后的剩余烃类物质的色谱图；图2(c)是分散载体粒径为 1mm的木屑，降解6d后剩余烃类物质的色谱图。

图3是不同木屑粒径对蜡质油污泥中直链正构烷烃降解率的影响。

图4是降解8d后剩余烃类物质的色谱图，图中，图4(a)是未降解蜡 质油污泥色谱图；图4(b)是降解8d后蜡质油污泥剩余烃类物质色谱图。

以下结合附图对本发明的具体内容作进一步详细解释说明。

具体实施方式

以下给出本发明的具体实施例，需要说明的是本发明并不局限于以下 具体实施例，凡在本申请技术方案基础上做的等同变换均落入本发明的保 护范围。

实施例1：

本实施例给出一种针对蜡质油污泥的快速无害化生物降解方法，该方法 包括以下步骤：

步骤一，制备种子液：

本申请的铜绿假单胞菌NY3为已有的菌种，参见文献：Maiqian Nie, Xihou Yin,Chunyan Ren,Yang Wang,Feng Xu,Qirong Shen.Novel  rhamnolipid biosurfactants produced by a polycyclic aromatic  hydrocarbon-degrading bacterium Pseudomonas aeruginosa strain NY3. Biotechnology Advances.,2010,28:635–643。

本申请的施氏假单胞菌N2为已有的菌种，参见文献：樊瑜,聂麦茜,葛 碧洲,万一,訾静,赵静,沈小娟,陈兴都.耐高浓度苯酚菌株的筛选及其降 解特性研究.环境与安全学报.2012,12(4):113-117。

菌种的活化：将NY3菌种子液，N2菌种子液分别在无菌操作台转接至 牛肉膏固体斜面培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养2d，再放入冰箱冷 藏室中保存，每个月至少转接一次。

牛肉膏固体培养基(g/L)为：1000ml牛肉膏液体培养基中加入18g～ 20g琼脂加热搅拌至沸腾用作斜面和平板。

无菌条件下，从铜绿假单胞菌NY3菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛 肉膏蛋白胨液体培养基中培养，30℃,160rpm恒温振荡，好氧培养24h，得 到OD_600nm为1.82±0.08的铜绿假单胞菌NY3种子液。

无菌条件下，从施氏假单胞菌N2菌株保存斜面上挑取一环菌接入牛肉 膏蛋白胨液体培养基中培养，30℃,160rpm恒温振荡，好氧培养24h，得到 OD_600nm为1.82±0.08的施氏假单胞菌N2种子液。

牛肉膏液体培养基(g/L)为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠(NaCl) 5g，溶于1000ml蒸馏水中，加热至牛肉膏完全溶解后至室温时调pH于 7.0～7.5之间，121℃高压蒸汽灭菌30min备用。

步骤二，加热分散蜡质油污泥：

将2g含油率为29.4％的蜡质油污泥加热至熔融状态，含油率即蜡质油 占总蜡质油污泥的重量百分比，向蜡质油污泥中加0.29g粒径为0.3mm的木 屑，蜡质油污泥与木屑的质量比为7：1，搅拌分散均匀，停止加热，使得 蜡质油污泥的温度降至28～35℃，得到分散体系。

分散载体木屑均匀分散在熔融的蜡质油污泥中，为油类物质提供附着载 体，冷却过程中，蜡质油可均匀附着于木屑表面，为铜绿假单胞菌NY3和 施氏假单胞菌N2细胞提供接触蜡质油及其他有机污染物的巨大的表面积， 在搅拌条件下，附着了油类物质的木屑相互碰撞过程中，油类逐渐解析，并 与游离的菌体细胞充分接触，快速被细胞代谢降解和转化，且因充足的烃类 碳源使细胞保持快速生长。

步骤三，制备降解体系：

将步骤二得到的分散体系加入50ml锥形瓶中，在摇床上，向步骤二中 的分散体系中加入10ml无机盐培养基，再加入占整个降解体系体积的12‰ 的质量浓度为60％的促进剂甘油溶液，得到降解体系。

促进剂中镁有利于NY3菌细胞的生长，促进细菌的新陈代谢与繁殖， 同时有利于细胞分泌更多的吩嗪类化合物，该类化合物为电子穿梭体，能加 快细胞进行的氧化还原反应，尤其是在细胞数量上升到一定数量时，体系中 氧气量不足时，能作为电子受体，维持细胞进行正常的氧化还原反应。从而 促进油泥的降解。甘油是NY3菌细胞产鼠李糖脂表面活性剂的碳源之一， 外加少量的甘油，所产的鼠李糖脂能提高NY3菌和N2菌对石油烃的降解 效率。

无机盐培养基包括(g/L)：5.0g NH₄NO₃，1mL微量元素(2.5g  FeSO₄·7H₂O，0.1g ZnSO₄·7H₂O，0.2g MnCl₂·4H₂O，0.024g CoCl₂·6H₂O， 0.024g NiCl₂·6H₂O，0.017g CuCl₂·2H₂O，0.109g Na₂MoO₄·2H₂O，0.062g  H₃BO₃，5mL 12.1M HCl，溶于1000mL蒸馏水)，0.1mL 1M MgSO₄·7H₂O 溶液，0.05mL 1M CaCl₂·2H₂O溶液，100mL磷酸盐缓冲液，调pH为7.5， 加蒸馏水于1000mL容量瓶中定容，121℃高压水蒸气灭菌30min。

步骤四，生物降解：

向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌NY3种子 液9ml，施氏假单胞菌N2种子液1ml，在摇床上，在30℃下恒温好氧培养 6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中C14～C18去除率均达到85％以上，C19～C30去除率在 76％～86％之间，C31～C38去除率达到60％～76％之间，菲和芘的去除率 可分别达到34.9％和34.1％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.25g转化产 物，并对其进行表征。结果显示，蜡质油污泥转化产物为生物大分子，其中 分子粒径分布为0.37～20.7μm的重量百分比占16.4％；22.7～121.8μm的重 量百分比占72.8％；133.7～234.1μm的重量百分比占10.8％。

转化的生物大分子的红外谱图如图1所示，从图1中可以看出，3446cm^-1吸收宽带是缔合—NH/—OH伸缩振动吸收峰，其中羟基主要来自于糖环， 氨基主要来自于蛋白质。2920cm^-1和2848cm^-1的两处弱吸收峰为糖的甲基 或亚甲基的C-H伸缩振动。1652、1541、1398cm^-1谱峰来自蛋白质中酰胺 基的Ⅰ谱带(C＝O伸缩振动)、酰胺Ⅱ谱带(N—H弯曲与C—N伸缩振动叠 加)和酰胺Ⅲ谱带(C-N伸缩振动)。1230cm^-1处的吸收峰可能是S＝O对 称伸缩振动，意味着该粘性转化物中含有硫酸根基团，说明糖链中可能是硫 酸化多糖。在图1中1080cm^-1吸收峰比较强，可能是吡喃环、吡喃型糖苷 键或糖蛋白链接处C-O-C和C-N-C结构类型价键的不对称伸缩特征吸收峰。 973cm^-1处应该是脱氧糖的次甲基的摇摆振动的吸收峰。

从图1中经过上述分析可以得出，转化产物产物中含有糖蛋白，通过糖 和蛋白质含量检测可知，1mg转化产物中蛋白含量为400.62μg，总糖含量为 76.00μg。

对比例1：不加入分散载体木屑

本对比例与实施例1的区别仅仅在于将不加分散载体木屑，其它过程与 实施例1相同，在摇床上，在30℃下恒温好氧培养6d，完成对蜡质油污泥 的降解。最后得到的降解结果为：油泥中各直连烷烃的降解率为12％～34％， 菲和芘的降解率分别为29.44％和23.67％。远远低于实施例1的降解率。

对比例2：更换分散载体

本对比例与实施例1的区别仅仅在于将木屑更换为玉米芯，其它过程与 实施例1相同，在摇床上，在30℃下恒温好氧培养6d，完成对蜡质油污泥 的降解。降解结果如图2所示，从图2中可以看出，采用玉米芯为分散体系 时，6d后，石油烃仅有很少部分被降解。

因此，采用玉米芯分散在蜡质油污泥中，6d后其降解效率明显低于木屑 分散的降解率。

对比例3：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤四中，向降解体 系中加入10ml铜绿假单胞菌NY3种子液；

结果测试表征：

蜡质油污泥中直链正构烷烃C14～C34的降解率均在73％以上，菲和芘 的降解率分别为19.3％和20.5％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.15g转化产 物，结果见图4，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产 物产物中含有糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化 产物中蛋白含量为400.28μg，总糖含量为66.53μg。

对比例4：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤四中，向降解体 系中加入10ml施氏假单胞菌N2种子液；

结果测试表征：

蜡质油污泥中直链正构烷烃C14～C34的降解率均在69％以上，菲和芘 的降解率分别为12.3％和16.72％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.14g转化产 物，结果见图4，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产 物产物中含有糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化 产物中蛋白含量为421.36μg，总糖含量为70.19μg。

实施例2：更换木屑粒径

本对比例与实施例1的区别仅仅在于将木屑的粒径有原来的0.3mm，分 别更换为0.56mm和1mm，其它过程与实施例1相同，在摇床上，在30℃ 下恒温好氧培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

降解结果为：直链正构烷烃降解结果见图3，石油烃中各直链正构烷烃 的降解率较实施例1中木屑粒径为0.3mm时明显降低，菲和芘的降解率也 降低。

实施例3：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅仅在于步骤四的生物降解 过程中，向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌NY3 种子液7ml，施氏假单胞菌N2种子液3ml，在摇床上，在30℃下恒温好氧 培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中C14～C18去除率均达到80％以上，C19～C30去除率在 70％～83％之间，C31～C38去除率达到53％～66％之间，菲和芘的去除率 可分别达到30.9％和28.1％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.23g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为386.77μg，总糖含量为80.05μg。

实施例4：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤二中，向蜡质油 污泥中加0.40g粒径为0.3mm的木屑，蜡质油污泥与木屑的质量比为5：1。

步骤四中，向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌 NY3种子液8ml，施氏假单胞菌N2种子液2ml，在摇床上，在30℃下恒温 好氧培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中C14～C31正构烷烃的去除率在80％～92.5％之间，C32～ C38大分子量的正构烷烃去除率在66～71％之间，菲和芘的去除率可分别达 到32.5％和32.1％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.25g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为395.62μg，总糖含量为77.56μg。

实施例5：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤二中，向蜡质油 污泥中加0.33g粒径为0.3mm的木屑，蜡质油污泥与木屑的质量比为6：1。

步骤三中，制备降解体系时，将步骤二得到的分散体系加入50ml锥形 瓶中，在摇床上，向步骤二中的分散体系中加入5ml无机盐培养基。

步骤四中，向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌 NY3种子液4ml，施氏假单胞菌N2种子液1ml，在摇床上，在30℃下恒温 好氧培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中C14～C31正构烷烃的去除率在80％～92.5％之间，C32～ C38大分子量的正构烷烃去除率在66％～71％之间，菲和芘的去除率可分别 达到32.5％和32.1％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.26g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为394.51μg，总糖含量为70.77μg。

实施例6：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤四中，向步骤三 中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌NY3种子液4ml，施氏 假单胞菌N2种子液1ml，在摇床上，在30℃下恒温好氧培养6d，完成对蜡 质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中正构烷烃C14～C34的降解率均在58％以上，菲和芘的降 解率分别为24.9％和26.4％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.21g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为400.56μg，总糖含量为78.89μg。

实施例7：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤三中制备降解体 系过程中，往降解体系中加入300μl体积浓度为5g/l的促进剂硫酸镁溶液， 再加入占整个降解体系体积的12‰的质量浓度为60％的促进剂甘油溶液；

步骤四中，向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌 NY3种子液4ml，施氏假单胞菌N2种子液1ml，在摇床上，在30℃下恒温 好氧培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中正构烷烃C14～C34的降解率均在88％以上，菲和芘的降 解率分别为32.9％和39.4％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.27g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为420.31μg，总糖含量为78.62μg。

实施例8：

本实施例与实施例7的其它过程相同，区别仅在于步骤三中制备降解体 系过程中，往降解体系中仅加入300μl体积浓度为5g/l的促进剂硫酸镁溶液；

结果测试表征：

正构烷烃C14～C34的降解率均在75％以上，菲和芘的降解率分别为 28.9％和36.2％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.28g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为397.58μg，总糖含量为74.63μg。

实施例9：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤二中蜡质油污泥 的含油率为24.7％。

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于步骤三中制备降解体 系过程中，往降解体系中加入300μl体积浓度为5g/l的促进剂硫酸镁溶液, 再加入占整个降解体系体积的12‰的质量浓度为60％的促进剂甘油溶液；

步骤四中，向步骤三中得到的降解体系中加入步骤一制得铜绿假单胞菌 NY3种子液4ml，施氏假单胞菌N2种子液1ml，在摇床上，在30℃下恒温 好氧培养6d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中直链正构烷烃C14～C34的降解率均在83％以上，菲和芘 的降解率分别为27.5％和32.6％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.17g转化产 物，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产物产物中含有 糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化产物中蛋白含 量为435.68μg，总糖含量为78.82μg。

实施例10：

本实施例与实施例9的其它过程相同，区别仅在于步骤四中，在摇床上， 在35℃下恒温好氧培养8d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中直链正构烷烃C14～C34的降解率均在89％以上，菲和芘 的降解率分别为30.5％和38.9％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.24g转化产 物，结果见图4，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产 物产物中含有糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化 产物中蛋白含量为362.58μg，总糖含量为66.35μg。

实施例11：

本实施例与实施例9的其它过程相同，区别仅在于步骤四中，在摇床上， 在28℃下恒温好氧培养5d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

蜡质油污泥中直链正构烷烃C14～C34的降解率均在78％以上，菲和芘 的降解率分别为25.5％和27.8％。

蜡质油污泥中转化产物产量为每克蜡质油污泥对应产生0.08g转化产 物，结果见图4，并对其进行表征，表征结果与实施例1相同，证明转化产 物产物中含有糖蛋白，通过糖和蛋白质含量检测可知，1mg蜡质油污泥转化 产物中蛋白含量为396.28μg，总糖含量为76.34μg。

实施例12：

本实施例与实施例1的其它过程相同，区别仅在于：步骤三中，将降解 体系分为两种，分别加入0mg和50mg油污泥转化产物；步骤四中，在摇床 上，在28℃下恒温好氧培养2d，完成对蜡质油污泥的降解。

结果测试表征：

降解2天后，加入0mg油污泥转化产物的降解体系中直链正构烷烃 C14～C34的降解率均在50％-57％，菲和芘的降解率分别为59％和61％；加 入50mg油污泥转化产物的降解体系，油污泥中各直连烷烃的降解率相比未 添加油污泥转化产物的降解体系提高14％-20％之间，菲和芘的降解率分别 提高23％和20％。