一种普通念珠藻提取物及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种普通念珠藻提取物及其制备方法和应用，普通念珠藻提取物制备方法：将普通念珠藻研成粉末与无水乙醇混合，恒温水浴浸提，旋转蒸发浓缩后得到活性提取物。得到的普通念珠藻提取物按一定比例添加到相应护肤基础配方中配制成美容护肤用品，经功效测试、感官评价以及皮肤刺激性实验方面都符合国家化妆品产业标准，安全无毒，对皮肤无刺激性反应，不仅具有保护、滋润皮肤的基本功效，更重要的是具有抗衰老、保湿、防晒及美白多重效力。是一种天然、安全、无毒的护肤制品，其成本与市售的同类产品成本相近，具有较好的开发前景。

说明书

技术领域

本发明涉及蓝藻门植物，具体是普通念珠藻提取物的制备方法，以及用该提取物作为活 性成分配制的具有抗氧化、保湿、防晒及美白性能的护肤产品的应用。

背景技术

普通念珠藻生存范围很广，在我国资源丰富，其生命力极强，即使休眠几十年，一遇水 又马上恢复生机，营养价值较高，蛋白质的含量一般占干重的14.6％-21.81％，有些种类的 蛋白质含量甚至占到干重的22.8％-28.7％，比香茹、黑木耳、银耳的都高，同时还含有18 种氨基酸，其总氨基酸含量也高于木耳、猴头菇，与发菜、香菇相近；粗脂肪含量为0.2％ -4.28％；总糖含量是0.53％-23.8％；另外，还含有海藻糖、鼠李糖、果胶多糖类、葡萄糖 苷、胡萝卜素、蓝藻素以及胞外多糖等多种营养成分，具有很高的营养价值和开发利用前景。 但目前有关普通念珠藻功能成分的研究报道较少，对于其在化妆品中抗衰老、保湿、防晒及 美白性能上的研究更是鲜见。本发明所述的护肤制品配方能够使普通念珠藻活性成分得到充 分的保持及释放，针对不同肤质具有抗氧化、保湿、防晒及美白功效，主要开发了普通念珠 藻护肤霜、化妆水及润肤露这三种配方：

发明内容

本发明的目的在于提供一种普通念珠藻提取物的制备方法以及用该提取物作为活性成分 制备具有抗氧化、保湿、防晒及美白性能的护肤产品。

本发明提供的一种普通念珠藻提取物由如下方法制得：将普通念珠藻清洗干净，并放置 在干燥阴凉处晾干，粉碎，过筛，将过筛后制得的普通念珠藻粉末按固液比1:15-30(优选 1:20)的比例与无水乙醇混合，在40-50℃下水浴浸提8-12h，过滤，再将滤渣继续用无水乙 醇于同样的温度条件下浸提10-20min，过滤后将滤液合并，并在50-60℃下旋转蒸发浓缩， 得到普通念珠藻提取物。通过功效性能测试证实，提取得到的活性成分具有对清除人体内过 多的羟基(·OH)自由基和过氧化氢(H₂O₂)有显著效力，证明其具有抗氧化及抗衰老效力， 并利用体外法，将稀释后的产品在200-400nm波长范围内进行全波长扫描，同时测定了其对 酪氨酸酶的抑制率，由此证明了该产品还具有一定的保湿、防晒及美白效力。

本发明提供的一种护肤品，含有上述普通念珠藻提取物。

本发明提供的一种护肤霜(主要针对干性肤质)，原料组分按重量份数计分别为：普通念 珠藻提取物4.0-8.0，硬脂酸4.5-6.5，十六醇5.0-7.5，白油3.1-4.1，羊毛脂1.2-1.8， 三乙醇胺0.5-0.8，甘油6.5-10.0，尼泊金丙酯0.1-0.15，香精1.0-1.4，去离子水70-80。

本发明提供的一种化妆水(适用于各种肤质)，原料组分按重量份数计为：普通念珠藻提 取物5.0-9.0，十六醇8.5-12.0，羊毛脂0.12-0.23，三乙醇胺0.5-0.8，甘油13.3-15.0， 乙醇2.1-2.5，尼泊金丙酯0.1-0.15，香精1.0-1.4，去离子水100-110。

本发明提供的一种润肤露(主要针对于油性肤质)，按重量份数计的原料组分包括：普通 念珠藻提取物4.0-8.0，硬脂酸1.7-3.5，十六醇6.5-9.0，白油0.4-1.0，羊毛脂0.5-1.0， 三乙醇胺0.5-0.8，甘油8.9-12.0，尼泊金丙酯0.1-0.15，香精1.0-1.4，去离子水90-100。

与现有技术相比，本发明的优点和效果：

(1)普通念珠藻生存范围很广，在我国资源丰富，从江南水乡、华北平原，到西北山区、 青藏高原、内蒙古高原以及长白山区都可觅其踪迹，其生命力极强，即使休眠几十年，一遇 水又马上恢复生机，原料易于获得且成本较低，有利于后期的大量生产。

(2)本发明主要添加普通念珠藻提取物作为活性添加剂，辅料均为化妆品配制中常见的 基础成分，并在实验中进行了相关的感官评价及性能测试，安全无毒，对皮肤无刺激性反应， 不仅具有保护、滋润皮肤的基本功效，更重要的是具有抗衰老、保湿、防晒及美白多重效力。

(3)普通念珠藻活性成分提取工艺简便，可作为天然活性剂在护肤制品中进行广泛应用， 并对皮肤具有多种防护功效，且成本与市售的同类产品相近，具有较好的开发前景。

附图说明

图1普通念珠藻提取物对羟自由基(·OH)的清除效果

图2普通念珠藻提取物对过氧化氢(H₂O₂)的清除效果

图3普通念珠藻提取物的保湿效果

图4普通念珠藻在不同波长范围内的平均紫外线吸收率

图5普通念珠藻对酪氨酸酶的抑制率

具体实施方式

实施例1

分别将采自山西神池、朔州、陵川和甘肃天水的普通念珠藻样品在40-50℃温水中泡发 后清洗干净，并于干燥阴凉处晾干而后利用SL--500A型高速多功能粉碎仪研碎，过筛(100 目)，精称普通念珠藻粉末2.00g后加入30mL无水乙醇混合。在40-50℃下水浴浸提8h，过 滤，再将滤渣继续用50mL的无水乙醇于同样的温度条件下浸提10min，过滤后将滤液合并， 并在50-60℃下以1000r/min旋转蒸发浓缩至5mL左右，干燥制得普通念珠藻提取物干粉， 密封至-20℃冰箱中保存备用。

功效性能测试数据：

将实施例1选取的4个不同品系的普通念珠藻样品进行实验，结果如下：

A、抗氧化性能：

图1是普通念珠藻提取物对羟自由基(·OH)的清除效果。实验中利用Fenton反应法建 立·OH产生体系模型进行检测，由图1可以看出，4种品系的普通念珠藻提取液对羟自由基 (·OH)均具有较强的清除作用，但不同品系间差异不显著(P＞0.005)。当提取液加入量低 于1mL时，随着加入体积的增大，平均清除率明显升高，说明其清除效力显著增强，当加入 的体积高于1mL时，清除率趋于稳定，最大清除率为83.44％。

图2是普通念珠藻提取物对过氧化氢(H₂O₂)的清除效果。通过提取物与H₂O₂的实验结果 可以看出，4种品系的普通念珠藻提取物对过氧化氢(H₂O₂)均具有较强的清除作用，但不同 品系间差异不显著(P＞0.005)。随着提取液加入量的增加，清除率升高，说明其清除效力增 强，最大清除率可达86.82％。

B、保湿性能：

图3是普通念珠藻提取物的保湿性实验结果。采用体外法对普通念珠藻提取物的保湿性 能与甘油(质量分数w＝1％)、去离子水进行比较。在一定的放置时间内，失水率越小，保湿 性能越好，由此证明此种普通念珠藻提取物具有良好的保湿效果。在一定的放置时间内，失 水率越小，保湿性能越好。可以看出，4种不同品系普通念珠藻提取物的平均失水率无显著 性差异(P＞0.005)，均低于对照去离子水，略低或于甘油水溶液(w＝1％)。

C、防晒性能：

图4是普通念珠藻在不同波长范围内的平均紫外线吸收率。采用紫外分光光度法中的稀 释透过率法，通过对不同普通念珠藻产品在各个波长范围内透过率的测定来对其防晒性能进 行试验。将产品稀释后分别计算各样品在UV-C区的200nm、210nm、220nm、230nm、240nm、 250nm、260nm、270nm和280nm，UV-B区的280nm、290nm、300nm、310nm和320nm，UV-A区 的320nm、330nm、340nm、350nm、360nm、370nm、380nm、390nm和400nm的平均透光率，并 换算成平均紫外线吸收率。由图4可知，4种不同品系普通念珠藻提取物在280-400nm内的 平均紫外吸收率基本都在80％以上，大部分的UVA和UVB均可被吸收，说明普通念珠藻提取 物具有广谱防晒作用。4种不同品系提取物的防晒效果无显著性差异(P＞0.005)。

D、美白性能：

图5为普通念珠藻对酪氨酸酶的抑制率。由于酪氨酸酶是一种含铜的多酚氧化酶，是生 物体合成黑色素等色素的关键酶，而当酪氨酸酶与美白活性成分同时存在溶液中时，酪氨酸 酶的催化活性会受到一定程度的抑制。实验测定了产品稀释后对酪氨酸酶的抑制率，并与市 售的某牌美白产品进行比较后证明了此种普通念珠藻产品对酪氨酸酶的抑制率较高，当质量 分数为1％时就可以有效的抑制酪氨酸酶的活力，最高可达88.61％，4种不同品系普通念珠藻 提取物的结果无显著性差异(P＞0.005)。

通过实验结果说明：普通念珠藻提取物具有良好的抗氧化、保湿、紫外线防护及美白效 果，且天然植物提取物具有皮肤刺激性小、光化学稳定、安全可靠等优点，因此在美容护肤 领域有着广阔的市场前景。不同品系地木耳的提取物在各个性能测试的具体效果上无显著性 差异。

实施例2

分别将采自山西神池、朔州、陵川和甘肃天水的普通念珠藻样品在40-50℃温水中泡发 后清洗干净，并于干燥阴凉处晾干而后利用SL--500A型高速多功能粉碎仪研碎，过筛(100 目)，精称普通念珠藻粉末2.00g后加入50mL无水乙醇混合。在40-50℃下恒温水浴浸提8h， 过滤，再将滤渣继续用50mL的无水乙醇于同样的温度条件下浸提10min，过滤后将滤液合并， 并在50-60℃下以1000r/min旋转蒸发浓缩至5mL左右，干燥制得普通念珠藻提取物干粉， 密封至-20℃冰箱中保存备用。

实施例3

分别将采自山西神池、朔州、陵川和甘肃天水的普通念珠藻样品在40-50℃温水中泡发后 清洗干净，并于干燥阴凉处晾干而后利用SL--500A型高速多功能粉碎仪研碎，过筛(100目)， 精称普通念珠藻粉末2.00g后加入60mL无水乙醇混合。在40-50℃下浸提8h，过滤，再将滤 渣继续用50mL的无水乙醇于同样的温度条件下浸提10min，过滤后将滤液合并，并在50-60℃ 下以1000r/min旋转蒸发浓缩至5mL左右，干燥制得普通念珠藻提取物干粉，密封至-20℃冰 箱中保存备用。

以下实施例中的普通念珠藻提取物均选自实施例1制得的普通念珠藻粉末

实施例4普通念珠藻膏霜类产品(主要针对于干性肤质)

配方A：

按每100g膏霜制剂各组分的含量计：普通念珠藻提取物4.0g，硬脂酸4.5g，十六醇5.0g， 白油3.1g，羊毛脂1.2g，三乙醇胺0.5g，甘油6.5g，尼泊金丙酯0.1g，香精1.0g，去离子 水加至100g。

配方B：

按每100g膏霜制剂各组分的含量计：普通念珠藻提取物6.0g，硬脂酸5.5g，十六醇6.5g， 白油3.5g，羊毛脂1.5g，三乙醇胺0.65g，甘油8.0g，尼泊金丙酯0.13g，香精1.2g，去离 子水加至100g。

配方C：

按每100g膏霜制剂各组分的含量计：普通念珠藻提取物8.0g，硬脂酸6.5g，十六醇7.5g， 白油4.1g，羊毛脂1.8g，三乙醇胺0.8g，甘油10.0g，尼泊金丙酯0.15g，香精1.4g，去离 子水加至100g。

制备方法：

将配方中的油性成分(硬脂酸、十六醇、白油、羊毛脂、三乙醇胺)置于电热恒温水浴 锅中搅拌加热至80-90℃完全熔化成均相，然后在此温度条件下，按比例加入甘油和去离子 水并于45℃左右保温20min，灭菌后过滤。缓慢降温至60-70℃时加入普通念珠藻提取物， 搅拌降温至45℃左右时加入适量香精和防腐剂尼泊金丙酯，继续搅拌，待温度降至35℃左右 时，停止搅拌，静置，冷却，得到膏霜状产品。

实施例5普通念珠藻化妆水类产品(适用于各种肤质)

配方A：

按每100mL化妆水各组分的含量计：普通念珠藻提取物5.0g，十六醇8.5g，羊毛脂0.12g， 三乙醇胺0.5g，甘油13.3g，乙醇2.1g，尼泊金丙酯0.1g，香精1.0g，去离子水加至100mL。

配方B：

按每100mL化妆水各组分的含量计：普通念珠藻提取物7.5g，十六醇10.0g，羊毛脂0.18g， 三乙醇胺0.65g，甘油14.0g，乙醇2.3g，尼泊金丙酯0.13g，香精1.2g，去离子水加至100mL。

配方C：

按每100mL化妆水各组分的含量计：普通念珠藻提取物9.0g，十六醇12.0g，羊毛脂0.23g， 三乙醇胺0.8g，甘油15.0g，乙醇2.5g，尼泊金丙酯0.15g，香精1.4g，去离子水加至100mL。

制备方法：

在80-90℃条件下将配方中适量的十六醇、羊毛脂、三乙醇胺搅拌加热至完全熔化成均 相，然后在此温度条件下，按比例加入甘油和去离子水并于45℃左右保温20min，灭菌后过 滤。缓慢降温至60-70℃时加入普通念珠藻提取物，搅拌降温至45℃左右时加入适量香精和 防腐剂尼泊金丙酯，继续搅拌，待温度降至35℃左右时，停止搅拌，静置，冷却，得到液体 产品。

实施例6普通念珠藻润肤露(主要针对于油性肤质)

配方A：

按每100mL润肤露各组分的含量计：普通念珠藻提取物4.0g，硬脂酸1.7g，十六醇6.5g， 白油0.4g，羊毛脂0.5g，三乙醇胺0.5g，甘油8.9g，尼泊金丙酯0.1g，香精1.0g，余量为 去离子水加至100mL。

配方B：

按每100mL润肤露各组分的含量计：普通念珠藻提取物6.0g，硬脂酸2.5g，十六醇8.0g， 白油0.6g，羊毛脂0.75g，三乙醇胺0.65g，甘油11.0g，尼泊金丙酯0.13g，香精1.2g，余 量为去离子水加至100mL。

配方C：

按每100mL润肤露各组分的含量计：普通念珠藻提取物8.0g，硬脂酸3.5g，十六醇9.0g， 白油1.0g，羊毛脂1.0g，三乙醇胺0.8g，甘油12.0g，尼泊金丙酯0.15g，香精1.4g，余量 为去离子水加至100mL。

制备方法：

在电热恒温水浴锅中将，甘油和少量去离子水搅拌加热至80-90℃，再按比例加入相应 的油性成分(硬脂酸、十六醇、白油、羊毛脂、三乙醇胺)，不断搅拌加热的条件下使其完全 熔化呈均相状态，灭菌后过滤。缓慢降温至60-70℃时加入普通念珠藻提取物，搅拌降温至 45℃左右时加入适量香精和防腐剂尼泊金丙酯，继续搅拌，待温度降至35℃左右时，停止搅 拌，静置，冷却，得到油状产品。

产品性能测试

按照国家2007年颁布的《化妆品卫生规范》对以上三种产品的各项功效进行检验，在功 效测试中，对产品的抗氧化、保湿、防晒及美白性能均进行了实验，结果说明其具有较好的 效果，实验结果如下：

(1)产品配方所使用的组分原料中无国家标准中要求的禁用成分。

(2)稳定性实验：

A、耐寒实验：在-20℃冰箱中放置24h恢复室温后无油水分离现象

B、耐热实验：在40℃下24h膏体无油水分离现象

C、冷热交替循环实验：按如上耐寒及耐热实验中的条件交替进行，各个产品均无油水分 离现象出现

D、离心实验：4000r/min离心旋转30min无乳析现象

(3)对配制好的产品放置一个月后进行微生物检验：

A、产品菌落总数小于1000CFU/g。

B、每克或每毫升产品没有检出粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。

C、产品中霉菌和酵母菌总数小于100CFU/g。

(4)人体安全性和功效评价检验方法：皮肤开放型斑贴试验

A、选择6名左右18-60岁、非高度敏感体质的志愿者作为受试对象参加试验的人员。

B、以前臂屈侧作为受试部位，面积5×5cm，受试部位保持干燥，且避免接触其它外用 制剂。

C、将试验物0.3g-0.5g(mL)每天2次均匀地涂于受试部位，连续7天，同时观察皮 肤反应。

D、皮肤反应按开放型斑贴试验皮肤反应评判标准，参见下表。

开放型斑贴试验皮肤反应评判标准表

测试结果：

受试的志愿者中没有出现1级皮肤不良反应的人数，故此判定受试物对人体皮肤没有刺 激性反应。

(5)感官评价：