具有控制植物病害能力的酿酒酵母菌株

摘要

本发明涉及具有控制植物病害能力的酿酒酵母菌株。本发明涉及一种酿酒酵母菌株，其特征在于其选自于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心(CNCM)保藏的保藏号I-3936的菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3937的菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3938、和于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3939的菌株。本发明还涉及一种控制植物病害的组合物、以及利用所述菌株治疗或保护植物抗由病原体所引起病害的方法。

说明书

本申请是申请日为2010年1月26日、中国国家申请号为201080005774.3、发明名称为“具有控制植物病害能力的酿酒酵母菌株”申请的分案申请。

技术领域

本发明

涉及用作保护植物抗多种病原体(特别是真菌)的拮抗微生物的酿酒酵母。本发明适合于治疗多个植物品种。

背景技术

在植物的病原体中，导致真菌病害或隐花植物病害的真菌是具有最大经济影响的病原体。每个植物种对一种或数种主要的病害敏感，这些病害可以强烈地降低其强壮性、其生长并最终降低收获物的数量或/和品质。

多种参数影响病害的发展，例如：土壤条件和施肥、品种敏感性、栽培方法(轮作、耕种、每公顷的植株或幼苗数量、修剪系统等)、或者特别是气候条件。但是，一般来说作用于这些因数中的一些因数，不足以充分限制由病害所造成的损害。此外，作为针对此病害的防护措施，希望优化并确保其产量的从业者将在正确的时间用控制植物病害的，常常是预防性的产品处理其栽培物。在最常见的情况下，所使用的产品是化学产品，其中的大部分是高效的，但是会给操作人员带来健康危害，并且在被处理产品，土壤和水中产生残留物。此外，作用于相同代谢部位的某些杀真菌活性物质的重复使用选择出对这些杀真菌剂耐药的菌株。

为了试图发现此问题的补救方法，需要限制使用每年的同类化学品的用量、变换成具有不同作用模式的化学产品类别，并且采用对病原体不利的其它方法。因此，在此文的上下文中，存在着对针对植物病害的替代方案的真实和明显的需求。

理想地，这些方案应以不同于现有化学杀真菌剂的方式起作用，不应在收获物和环境中产生任何化学残留物，并且对操作人员来说更安全和更健康。这种处理应单独使用或者与本发明的化学处理或任何其它处理组合使用，用于预防这些病原体及其耐药菌株在植物上的出现或者限制这些病原体及其耐药菌株在植物上的生长，并且限制对人和环境的危害。

在本文的上下文中，已知如何将病原体的拮抗微生物施用于植物。例如，到目前为止被称为拮抗微生物的微生物包括细菌：枯草杆菌，真菌：哈茨木霉、绿色木霉、小盾壳霉、灰绿链霉菌，酵母菌：出芽短梗霉、梅奇酵母（Metschnikowia fructicola）、嗜油假丝酵母（Candidaoleophila）)。El Ghaouth等人的文章《对果实和蔬菜的收获后病害的生物控制》(Applied Mycology and Biotechnology，第2卷，Agriculture andfood production，Elsevier Science B.V，第219-238页)提出了一篇关于对果实上的病原体的生物控制的综述，并且给出了对拮抗微生物作用模式的数种可能的解释。

本发明还涉及酿酒酵母作为拮抗微生物的用途。然而，一般来说已估计到这些酵母菌的效力低于其它微生物的效力，或者甚至在某些情况下效力为零。作为例子，可参考A.B.Filonow写的文章《酵母中的糖在苹果灰霉病菌生物控制中的竞争作用》(Biocontrol Science andTechnology，8：243-256，1998)，其中教导了不同于罗伦隐球酵母（Cryptococcus laurentii）和掷孢酵母（Sporobolomyces roseus），酿酒酵母在降低灰霉病菌对苹果的感染方面是没有效力的。

现在，通常认为是最有效的拮抗微生物常常是从自然环境中分离的，并不为人所熟知，因而在其开发和使用期间会显示出不合需要的特性。然后，人们会面临工业化的难题、或者甚至面临针对人或环境的弊端。

因此，需要开发出从工业的观点来看更稳定、从健康和环境的观点来看更安全，并且有效控制由植物中病原体所引起病害的拮抗微生物的新菌株。

发明内容

首先本发明涉及一种酿酒酵母菌株，其特征在于它是选自于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心(“Collection Nationale deCultures de Microorganismes”，巴斯德研究所，25rue du Docteur Roux，75724Paris Cedex15，法国)保藏的保藏号I-3936菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3927菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3938菌株、和于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3939菌株。

本发明还涉及一种控制植物病害的组合物，其包含选自于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3936菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3937菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3938菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3939菌株的酿酒酵母、以及其混合物。

根据一实施方式，控制植物病害的组合物还包含一种以上的制剂和/或至少一种附加的活性佐剂。

根据一实施方式，控制植物病害的组合物是浓缩的控制植物病害组合物，为固体或液体的干制剂。

根据一实施方式，控制植物病害的组合物是控制植物病害的即用型的组合物，为干的或液体制剂，优选为液体制剂。

根据一实施方式，控制植物病害的组合物包含在10⁴至10¹¹cfu/毫升之间、优选在10⁵至10¹⁰cfu/毫升之间、更优选在5×10⁵至5×10⁹cfu/毫升之间量的酿酒酵母。

本发明还涉及一种用于治疗或保护植物不受由病原体所引起病害的方法，包括使植物与选自于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3936菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3937菌株、于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3938菌株、和于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心保藏的保藏号I-3939菌株的酿酒酵母、及其混合物接触。

根据一实施方式，病原体选自真菌、病毒、细菌、支原体、螺原体、类病毒及其组合，优选真菌。

根据一实施方式，病原体是选自下列微生物：链格孢属（Alternariaspp.），特别是茄链格孢（Alternaria solani）和互隔交链格孢（Alternariaalternata）)、壳二孢属（Ascochyta spp.），特别是蚕豆壳二孢（Ascochytafabae）或Ascochyta pinodella、曲霉属，特别是黑曲霉和烟曲霉、葡萄孢属，特别是灰葡萄孢、盘梗霉属（Bremia spp.），特别是莴苣盘梗霉（Bremia lactucae）、尾孢菌属（Cercospora spp），特别是甜菜尾孢菌（Cercospora beticola）、枝孢属（Cladosporium spp.），特别是洋葱枝孢菌（Cladosporium allii-cepae）、炭疽菌属（Colletotrichum spp.），特别是禾生炭疽菌（Colletotrichum graminicola）、拟隐孢壳属（Cryptosporiopsis spp.），特别是腐皮拟隐孢壳（Cryptosporiopsismalicorticis）、白粉菌属（Erysiphe spp.），特别是小麦白粉菌（Erysiphegraminis）或葡萄白粉病菌（Erysiphe necator）、镰刀菌属（Fusariumspp.），特别是尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）和粉红镰刀菌（Fusarium roseum）、盘长孢属（Gloeosporium spp.），特别是果生盘长孢（Gloeosporium fructigenum）、球座菌属（Guignardia spp.），特别是葡萄球座菌（Guignardia bidwellii）、长蠕孢属（Helminthosporiumspp.），特别是Helminthosporium tritici-repentis、盘二孢属（Marssoninaspp.），特别是蔷薇盘二孢（Marssonina rosae）、丛梗孢属（Monilia spp.），特别是果仁丛梗孢（Monilia fructigena）、球腔菌属（Mycosphaerellaspp.），特别是芸苔生球腔菌（Mycosphaerella brassicicola）、青霉菌属（Penicillium spp.），特别是扩展青霉（Penicillium expansum）或指状青霉（Penicillium digitatum）、霜霉属（Peronospora spp.），特别是寄生霜霉（Peronospora parasitica）、Pezicula spp.，特别是Peziculamalicorticis、多胞锈菌属（Phragmidium spp.），特别是Phragmidiumrubi-idaei、疫霉菌属（Phytophtora spp.），特别是致病疫霉（Phytophtorainfestans）)、单轴霉属（Plasmopara spp.），特别是葡萄单轴霉（Plasmoparaviticola）、叉丝单囊壳属（Podosphaera spp.），特别是白叉丝单囊壳（Podosphaera leucotricha）、假尾孢属（Pseudocercosporella spp.），包括芥假小尾孢菌（Pseudocercosporella brassicae）、假霜霉菌属（Pseudoperonospora spp.），特别是古巴假霜霉（Pseudoperonosporacubensis）、假盘菌属（Pseudopeziza spp.），特别是苜蓿假盘菌（Pseudopeziza medicaginis）、柄锈菌属（Puccinia spp.），特别是禾杆锈菌（Puccinia graminis）、腐霉菌属（Pythium spp.）、柱隔孢属（Ramularia spp.），特别是甜菜柱隔孢（Ramularia betae）、丝核菌属（Rhizoctonia spp.），特别是立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、根霉属（Rhizopus spp.），特别是黑根霉（Rhizopus nigricans）和葡枝根霉（Rhizopus stolonifer）、喙孢属（Rynchosporium spp.），特别是Rynchosporium secalis、核盘菌属（Sclerotinia spp.），特别是油菜核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）、壳针孢属（Septoria spp.），特别是颖枯壳针孢（Septoria nodorum）或小麦壳针孢（Septoria tritici）、单囊丝壳属（Sphaerotheca spp.），特别是斑点单壳孢（Sphaerothecamacularis）、黑星孢属（Spilocaea spp），特别是环黑星孢（Spilocaeapomi）、外囊菌属（Taphrina spp.），特别是李外囊菌（Taphrina pruni）、单端孢属（Trichothecium spp.），特别是粉红单端胞（Trichotheciumroseum）、钩丝壳属（Uncinula spp.），特别是葡萄钩丝壳（Uncinulanecator）、黑粉菌属（Ustilago spp.），特别是小麦散黑粉菌（Ustilagotritici）、黑星菌属（Venturia spp.），特别是苹果黑星菌（Venturiainaequalis）、及其组合；优选地所述病原体选自指状青霉、扩展青霉、灰葡萄孢以及其组合。

根据一实施方式，植物选自禾本科植物、双子叶植物、一年生植物、一年二次的植物和多年生植物、蔬菜的幼苗或收获的蔬菜、带果实的植物或树或者收获的果实、带花的植物或树或者收获的花、谷类、含油植物、产蛋白（proteaginous）植物、木本植物、观赏植物，特别是选自来源于马铃薯、甜菜根、甘蔗、烟草、藤蔓植物、小麦、油菜籽、大麦、稻、玉米、高粱、粟（millet）、大豆、豆类、番茄、黄瓜、莴苣、草莓植物、苹果树、梨树、柑橘、香蕉、菠萝、桃树、杏树、樱桃树、胡桃树和榛子树的幼小植物或产物。

根据一实施方式，上述方法包括：

将上述即用型的控制植物病害组合物施用于所述植物的全身或部分；或者

将上述浓缩的控制植物病害组合物与制剂混合，从而形成最终的控制植物病害组合物，接着将该最终的控制植物病害组合物施用于所述植物的全身或部分。

根据一实施方式，将控制植物病害组合物施用于所述植物的全身或部分，由优选地通过喷洒将该组合物施用于叶、茎、花、果实、树干和/或根或者其一部分，优选地通过地面喷洒、机械掺和、与肥料、强化剂混合或者以预混剂形式施用于根部构成。

本发明能够克服现有技术的弊端。尤其是，本发明提供从工业的观点来看更稳定、从健康和环境的观点来看更安全，并且有效控制由植物中病原体所引起病害的拮抗微生物的新菌株。

本发明是基于本发明人对具有非常好的控制植物病害能力的酿酒酵母新菌株的开发。因为酿酒酵母是已知的酵母种并且人们已将其应用于制造面包和酒类，包括以工业规模达数世纪，所以将其用作拮抗微生物是特别有利的。

因此，能够有效控制植物病原体以及由病原体所引起的病害，这是利用对人类和环境无害或者不是非常有害并且易于工业规模生产的产品所完成的。

根据本发明的具体实施方式，本发明还具有以下有利特征中的一个，或者优选地数个：

本发明提供长期的植物保护(例如1周、2周或1个月以上)以及针对多种病原体的多价作用；

本发明尤其适用于生物农业领域；

本发明能够通过降低感染水平和/或降低接种物缓解来提高植物保护的总体效力；

本发明能够限制在对培养物或植物进行处理期间农用化学品在消费产品上(或消费产品中)以及土壤和水中的残留量。

具体实施方式的描述

现在，在下面的描述中将以非限制性的方式更详细地说明本发明。

处理的类型(治疗性的或预防性的)

所前所述，本发明涉及预防性或治疗性地控制植物中的病原体的方法和产品。

相关的植物可以是任何类型的植物，特别是禾本科植物和双子叶植物、一年生植物，一年二次的植物和多年生植物、蔬菜、谷类，包括小麦、大麦和稻、玉米、高粱、粟、含油植物、产蛋白（proteaginous）植物、马铃薯、甜菜根、甘蔗、烟草、木本植物、果树或非果实树、藤蔓植物、观赏植物等。

根据一具体实施方式，所述植物是果树，例如种子类型的果树，特别是选自苹果树、梨树和柑橘树。

根据另一实施方式，所述植物选自藤蔓植物、谷类(特别是小麦)、油菜籽、甜菜根、马铃薯、豆类、番茄、黄瓜、莴苣或草莓植物。

在本发明范围内所用的术语“植物”涵盖植物(例如果树等)及这些植物的分离部分，例如收获的果实或花，而且也涵盖谷粒或种子(植物繁殖材料)。

根据一具体实施例，所述植物是果实，例如苹果、或梨、或柑橘。

在下文中，当使植物与所述组合物接触时，应该理解的是可在植物的整个表面或者仅在部分表面上实施此接触。例如，当所述植物是完整植物时，接触可在植物的全部或者在植物的一个以上部分(例如叶、茎、花、果实、树干和/或根)或者仅在这些叶、茎、花、果实、树干和/或根的表面的一部分上实施。

本发明的产品能够在相当长的时段，可超过一个月、或者甚至数月内有效保护在寒冷条件下的植物果实抗病原体。当然，可涵盖采用由使用者所确定间隔的重复施用。

本发明可用于控制任何类型的病原体，特别是真菌、病毒、细菌、支原体、螺原体或类病毒。本发明对控制真菌特别有效。

作为病原体的具体实例，特别地列举出下列属的真菌：链格孢属，例如茄链格孢和互隔交链格孢、壳二孢属，例如蚕豆壳二孢菌或Ascochyta pinodella、曲霉属，特别是黑曲霉和烟曲霉、葡萄孢属，例如灰葡萄孢、盘梗霉属，例如莴苣盘梗霉、尾孢菌属，例如甜菜尾孢病菌、枝孢属，例如洋葱枝孢菌、炭疽菌属，例如禾生炭疽菌、拟隐孢壳属，特别是腐皮拟隐孢壳、白粉菌属，例如小麦白粉菌或葡萄白粉病菌、镰刀菌属，例如尖孢镰刀菌和粉红镰刀菌、盘长孢属，例如果生盘长孢、球座菌属，例如葡萄球座菌、长蠕孢属例如Helminthosporium tritici-repentis、盘二孢属，例如蔷薇盘二孢、丛梗孢属，例如果仁丛梗孢、球腔菌属，例如芸苔生球腔菌、青霉菌属，例如扩展青霉或指状青霉、霜霉属，例如寄生霜霉、Pezicula spp.，特别是Pezicula malicorticis、多胞锈菌属，例如Phragmidium rubi-idaei、疫霉菌属，包括致病疫霉、单轴霉属，包括葡萄单轴霉、叉丝单囊壳属，例如白叉丝单囊壳、假尾孢属，包括芥假小尾孢菌、假霜霉菌属，例如古巴假霜霉、假盘菌属，例如苜蓿假盘菌、柄锈菌属，包括禾杆锈菌、腐霉菌属、柱隔孢属，包括甜菜柱隔孢、丝核菌属，例如立枯丝核菌、根霉属，例如黑根霉和葡枝根霉、喙孢属，如Rynchosporiumsecalis、核盘菌属，如核盘菌、壳针孢属，例如颖枯壳针孢或小麦壳针孢、单囊丝壳属，如斑点单壳孢、黑星孢属，特别是环黑星孢、外囊菌属，例如李外囊菌、单端孢属，特别是粉红单端胞霉、钩丝壳属，例如葡萄钩丝壳、黑粉菌属，例如小麦散黑粉菌、黑星菌属，例如苹果黑星病菌。由本发明也可控制以上病原体的组合。

指状青霉、扩展青霉、灰葡萄孢是本发明特别有效的种。

影响栽培作物的细菌的实例特别地包括：棒状杆菌属、棒形杆菌属、短小杆菌属、链霉菌属、假单胞菌属、黄单孢菌属、欧文氏菌属，特别是梨火疫欧文氏菌（Erwinia amylovora）、软腐欧文氏菌（Erwiniacarotovora）、菊欧文氏菌（Erwinia chrysanthemi）。

影响栽培作物的病毒的实例是例如烟草花叶病毒或者马铃薯Y病毒。

本发明提供一种用于治疗和/或保护植物抗由上述病原体，例如灰霉所引起病害的方法。该方法涵盖旨在延迟或预防这些病害的发生、根除病害、或者限制或降低这些病害的规模、程度或效果的任何治疗性或预防性方法。

作为拮抗微生物的酿酒酵母菌株

“拮抗微生物”表示在本发明范围内是病原体的拮抗剂的微生物，特别是有可能导致植物病害的病原体(特别是以上所列病原体中的一种病原体)。

本发明提供了四种可用作拮抗微生物的酿酒酵母的菌株，即：

于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3936菌株；

于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3937菌株；

于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3938菌株；以及

于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3939菌株。

本发明的酿酒酵母菌株的用途

本发明提供了用于保护或治疗植物抗由病原体所引起病害的前述酿酒酵母菌株的用途。

特别是，为了达到此目的，本发明提供了一种包含前述酿酒酵母菌株(或者这些菌株中的数种菌株的混合物)中的一种菌株的控制植物病害组合物。

“控制植物病害组合物”表示在本发明范围内能够保护植物抗一种或者数种病原体和/或治疗被一种以上病原体感染的植物的组合物。

根据本发明的控制植物病害组合物可以采用浓缩的形式或者即用型的形式。所述控制植物病害组合物可采用干燥的形式，例如以粉末或颗粒的形式，或者采用液体形式，特别是含水的形式，例如悬浮液、分散液、凝胶、乳膏、糊剂，或者采用固体形式。在即用型的组合物的情况下，优选含水的液体形式，因为此形式适于喷洒。

在干燥的形式下，前述菌株的酵母菌优选采用脱水、冻干和/或囊封的形式。

在即用型的控制植物病害组合物中，已利用适当方式配制了用于植物的活性物质(前述酿酒酵母的菌株)。因此，将活性物质例如与可接受的载体，例如填装喷洒类型喷射器的液体、肥料、用于温室的培养基质混合。即用型的组合物可采用粉末的形式，但是优选液体形式。

不同于意图应用于植物上的即用型的控制植物病害组合物，所述浓缩的控制植物病害组合物意图由使用者与制剂(载体)混合，从而形成最终的即用型组合物。优选地，该制剂是水或水性溶液。因此，通常使用者将颗粒(浓缩的控制植物病害组合物)溶解于水中、或者将水性悬浮液或分散液(浓缩的控制植物病害组合物)稀释于水中，从而获得最终的即用型组合物。

如果在浓缩的控制植物病害组合物中酵母菌为脱水形式并且如果最终组合物是为液体形式(通常是水性形式)，则应注意采取防止使酵母再水合的常用预防措施；例如，适于溶解/再水合的制剂温度(通常为水或水性溶液)有利的是在20至25℃之间。

无论控制植物病害组合物是浓缩的还是即用型的，在任一种情况下该组合物一般包含一种或数种固体或液体制剂。

该制剂可由任何化合物组成、或者由能够便于或者优化运输、贮存、处理、应用和/或使活性物质在植物或其其部分上持续存在的任何惰性材料所组成。该制剂适合于所希望的目的：活性物质的保持、在贮存期间或者在制备处理混合物中使用期间将活性物质维持于悬浮液中、抗起泡、防尘、对植物的粘附、渗透入组织、以及其它目的。这个或者这些制剂可以是固体、液体；可以单独使用或者组合使用。

制剂可以特别是选自表面活性剂、分散剂、防腐剂、湿润剂、乳化剂、粘附剂、pH缓冲剂、营养素；可以单独使用或者混合使用。

应用于植物的酿酒酵母的量是由本领域技术人员所确定的，特别是取决于被处理的病原体或多种病原体、植物类型、菌株、以及所使用菌株的组合等。优选地，应用的量足以保护植物抗病原体或者限制或抑制所存在病原体的生长和作用。该量例如可通过田间试验而获得(或者，例如当植物是果实时，通过实验室测试、或者在果实包装站自己测试)。

优选地，即用型的控制植物病害组合物含有在10⁴至10¹¹cfu/毫升之间、优选在10⁵至10¹⁰cfu/毫升之间、更优选在5×10⁵至5×10⁹cfu/毫升之间的量的前述酵母菌的菌株。

上述控制植物病害组合物，在其最终(即用型的)形式中可通过不同的方式并按照处理的不同步骤或程序而施用于植物。在一优选实施方式中，该组合物是液体，并且是通过喷洒特别是喷洒在叶面或地面上而应用。在一具体实施方式中，该组合物是液体，并且通过喷洒在收获的花或果实上而应用。

可替代地，能够以与肥料、培养支持剂、喷洒水或其他产品的混合物形式来应用所述组合物。因此，可通过地面喷洒、机械掺和、与肥料、强化剂混合、或者以预混剂的形式、或者其它方法将所述组合物施用于根部。

其它可能的活性佐剂

在针对植物的由病原体所引起病害的预防性或治疗性处理的范围内，可使用其它活性佐剂。“活性佐剂”表示能够有助于预防或治疗由病原体所引起植物病害、或者能够增强上述酿酒酵母的菌株在预防或治疗由病原体所引起植物病害的效果的任何化合物(不同于前述酿酒酵母的菌株)。

根据一实施方式，本发明的控制植物病害组合物可包含这些其它活性佐剂。

根据另一实施方式，可将这些其它活性佐剂单独地给植物施用，作为附加的治疗(相继地或交替地)。

这些其它相关的活性佐剂特别包括：

(1)不同于前述酿酒酵母的菌株的任何拮抗微生物。任何已知的微生物可用作例如一种以上植物病原体的拮抗剂。

优选地，所述拮抗微生物选自细菌、真菌和酵母，优选酵母。

拮抗微生物可以特别地选自：农杆菌属、白粉寄生孢属、短梗霉属、芽孢杆菌属、布勒担孢酵母属、念珠菌属、毛壳菌属、盾壳霉属、隐球菌属、德巴利氏酵母属、德克酵母属、欧文氏菌属、Exophilia spp、粘帚霉属、汉逊酵母属、伊萨酵母属、克鲁维酵母菌属、马利亚霉属、梅奇酵母属、微结节菌属、拟青霉属、青霉菌属、Phlebiopsis spp。；毕赤酵母属、假单胞菌属、假丝酵母属、腐霉菌属、红酵母属、酵母属、复膜孢酵母属、掷孢酵母属、链霉菌属、篮状菌属、木霉菌属、细基格孢属、轮枝菌属、接合酵母菌属以及其混合物；更具体地放射形土壤杆菌、出芽短梗霉、枯草杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜油假丝酵母、Candida saitoana、清酒假丝酵母、纤细假丝酵母、产朊假丝酵、菌膜假丝酵母、小盾壳霉、浅白隐球酵母、罗伦隐球酵母、浅黄隐球酵母、软腐欧文氏菌、链孢粘帚菌、绿粘帚霉、孢汉逊酵母、耐热克鲁维酵母、Metschnikovia fructicola，美极梅奇酵母、鲁考弗美奇、Microdochium dimerum、玫烟色拟青霉、草酸青霉菌、大伏革菌、异常毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、洋葱假单胞菌、绿针假单胞菌、荧光假单胞菌、烟草野火病菌、Pseudozyma flocullosa、粘红酵母、寡雄腐霉、粘质红酵母、酿酒酵母、复膜孢酵母、灰绿链霉菌、黄蓝状菌、深绿木霉、哈茨木霉、多孢木霉、绿色木霉、棘孢木霉、盖姆斯木霉、黑细基格孢、黑白轮枝孢、以及其混合物。

(2)钙、钾或钠盐

在WO2006/032530中对作为活性佐剂的特别有效的盐进行了详细描述，本文将其作为参考。

特别是盐酸盐、丙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、醋酸盐、乙酸盐、甘油酸盐、谷氨酸盐、赤糖酸盐、苏糖酸盐、核糖酸盐、阿糖酸盐、木糖酸盐、来苏糖酸盐、阿洛糖酸、阿卓糖酸盐、葡萄糖酸盐、马来酸盐、古洛糖酸盐、艾杜糖酸盐、半乳糖酸盐、塔龙酸盐、反式庚酸盐、altroheptonate、葡庚糖酸盐、甘露庚糖酸盐、葡庚糖酸盐、艾杜糖庚酸盐、乳糖庚酸盐、塔罗庚酸盐（taloheptonate）、丙醇二酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、蔗糖酸盐、粘液酸盐、乳酸盐、乳葡萄糖酸盐(lactogluconate)、抗坏血酸盐、异柠檬酸盐和柠苹酸盐，优选钠或钙或钾(优选钙)，无论它们是采用无水的形式还是水合的形式。

特别优选乳酸钙。也可以是上述盐的混合物。

(3)刺激剂，选自糖醛酸类、甘露聚糖、β-1,3-葡聚糖、混合物和衍生物(盐、水合物等)。

在糖醛酸类中，优选半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。

(4)杀真菌、抗病毒和/或抗细菌的农用化学物质。

杀真菌物质可以例如选自有机农用化学杀真菌剂或基于硫和/或铜的无机杀真菌剂。

目前可利用的有机农用化学杀真菌剂的实例，特别是:苯甲腈类，包括百菌清、氨基甲酸酯类，包括二硫代氨基甲酸酯类，如代森锰锌、邻苯二甲酰亚胺类，包括克菌丹、磺酰胺类、胍类、醌类、喹啉类、噻二嗪类、酰替苯胺类、羟基酰替苯胺类、和苯基酰胺类、咪唑啉酮类、噁唑烷酮类、甲氧基丙烯酸酯类、氰基咪唑类、氟啶胺、敌螨普、硅嘧菌胺、对二甲酰亚胺类、咯菌腈、有机磷化合物、霜霉威盐酸盐、二苯胺、吡啶基胺类、甾醇生物合成抑制剂(IBS)，包括咪唑类、嘧啶类、羟基嘧啶类、苯胺基嘧啶类、三唑类、螺环菌胺、吗啉类和哌啶类、环酰菌胺、恶霉灵、苯酰菌胺、乙霉威、苯并咪唑类、戊菌隆、喹氧灵、丙森锌、霜脲氰、烯酰吗啉、膦酸酯类、三嗪类。

本发明也可与一种以上的可引起植物防御机制的化合物交替地、联合地或者结合地使用，例如β-氨基丁酸、2,6-二氯异烟酸、阿拉酸式苯-S-甲基或者某些海藻提取物。这种化合物的实例特别是昆布多糖和ulvans。

在此方面，本发明还提供一种用于预防或减缓对一类杀真菌剂耐药的真菌菌株的生长的方法，其特征在于，用前述酿酒酵母的菌株对植物进行处理，如上所述，以降低对所述类杀真菌剂耐药的菌株的选择压力为目的，或者其特征在于将用所述类的杀真菌剂对植物的处理与如上所述用前述菌株的酿酒酵母对植物的处理交替使用或者联合使用。

本发明还提供一种用于预防或减缓对一类抗细菌剂耐药的细菌菌株的生长的方法，其特征在于如上所述以降低对所述类抗细菌剂耐药的菌株的选择压力为目的而利用前述酿酒酵母的菌株处理所述植物，或者其特征在于用所述抗细菌对植物的处理与如上所述用前述菌株的酿酒酵母对植物的处理交替使用或者联合使用。

然而，根据一具体实施例，本发明的控制植物病害组合物中不含任何对酿酒酵母有毒的杀真菌剂、抗病毒和/或抗菌物质。根据一具体实施方式，在利用前述菌株的酿酒酵母进行处理之前，除了在充分的等待时间内进行观察以外，不采用借助于在对酿酒酵母有毒剂量下的任何杀真菌、抗病毒和/或抗细菌农用化学物质的处理。

实施例

以下实施例是用来说明本发明而不是限制本发明。

实施例1

按以下方法对本发明针对收获后真菌病害的效力进行测试。

在每个葡萄柚上作出三处损伤。将控制植物病害组合物应用于各损伤处，让其变干，然后接种包含病原体的组合物。

所使用的病原体为指状青霉，浓度为5×10⁴孢子/毫升。

在20℃下进行4或5天保温培养后，测量病损的平均直径。

使用以下4种含有各种浓度微生物(将微生物培养物在无菌蒸馏水中进行系列稀释而获得)的控制植物病害组合物：

A：包含于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3936菌株的组合物。

B：包含于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（（CNCM））保藏的保藏号I-3937菌株的组合物。

C：包含于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3938菌株的组合物。

D：包含于2008年3月4日在法国国家微生物保藏中心（CNCM）保藏的保藏号I-3939菌株的组合物。

酵母菌的菌株来自于法国Lesaffre International。

病原体是从腐烂的葡萄柚中分离获得；于4℃下在葡萄糖-马铃薯琼脂糖斜面上储存；于25℃在葡萄糖-马铃薯琼脂糖斜面中培养；除去培养2-3周后形成孢子的边缘的孢子；制成在无菌蒸馏水中的悬浮液，用血球计数器调整孢子浓度。

每次测试平均使用10个以上的葡萄柚。

测定不同的预防性处理相对于未处理对照的效力，并且将结果示于以下的表1。在第4天测量病损的直径，除了在第5天获得的标出星号(*)的结果外。

表1–预防指状青霉对葡萄柚的感染

实施例2

除了使用苹果来代替葡萄柚并且将灰葡萄孢(孢子的悬浮液，浓度为10⁶孢子/毫升)和扩展青霉(孢子悬浮液的，浓度为10⁵孢子/毫升)用作病原体以外，其余重复与实施例1同样类型的实验。在接种6天后进行病损的评估，每次对15个果实的结果取平均值。

将针对灰葡萄孢的获得结果示于以下的表2a和表2b中，将对抗扩展青霉的结果示于以下的表3a和表3b中。

表2a防止灰葡萄孢对苹果的感染

表2b–防止灰葡萄孢对苹果的感染

表3a防止扩展青霉对苹果的感染

表3b–防止扩展青霉对苹果的感染

实施例3

除了使用食用葡萄来代替葡萄柚并且将灰葡萄孢用作病原体外，其余重复与实施例1中同样类型的实验。此外，酵母菌保护的效力经以下确定：在接种病原体7天后对每串葡萄中受感染葡萄浆果的数量进行计数，以便把所述葡萄串分类成4个类别：(1)健康的葡萄串；(2)约10%的葡萄串被感染；(3)约25%的葡萄串被感染；(4)约50%以上的葡萄串被感染。将0分指定给类别(1)、将0.1分指定给类别(2)、将0.25分指定给类别(3)，将0.6指定给类别(4)，从而计算出平均损害值。

将在未受损葡萄串上获得的结果示于以下的表4，将在受损葡萄串中获得的结果示于以下的表5。

表4–防止灰葡萄孢对未受损食用葡萄的感染

表5–防止灰葡萄孢对受损食用葡萄的感染

实施例4

此实验是在田间和果实包装站的实际条件下进行。在“幻想曲（Fantasia）”种的油桃的果园里，对10棵树(包括5棵未处理的树和5棵经处理的树)进行鉴定和编号。

采用瞬时分散法在20℃下将干燥酵母颗粒分散于水中，制备浓度为25g/L的处理混合物(即用型的控制植物病害组合物)。用于制造这些颗粒的菌株是菌株A。

在收获之前，在已除去腐烂的果实后对树上的果实进行处理。在收获后，给装果实盘标上树号并放入冷冻室。

将果实在冷条件下(4℃)保持一周，然后在常温(约25℃)下保持3天，用以促进病害的发展。然后进行评分。当出现果仁丛梗孢或灰葡萄孢的病斑时，对于每个所观察的果实，记录病斑的数量和直径(以毫米计)。

最后，计算出健康果实的数量、有病斑的果实数量、健康果实和带病斑果实的百分率、每个果实的病斑平均数、病斑的平均直径。依据Abott方法基于有病斑果实的百分率、病斑的平均数和平均直径计算出效力。将结果示于以下的表6。

表6–在收获条件控制植物病害的效果