一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方法

摘要

本发明公开了一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方法，它包括如下步骤：制定选育目标、建立选育系、新品系纯化等步骤。具体为以葡萄牙牡蛎金黄色贝壳和全重为选育目标，通过群体选育和家系选育方法建立选育系，通过连续数代的定向纯化筛选出贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系。通过连续数代选育的葡萄牙牡蛎新品系具有生长快、贝壳金黄、商品价值高等优点，它适宜作为单体牡蛎养殖及生食牡蛎生产，这对于提高葡萄牙牡蛎养殖产量、商品价值和经济效益具有重要作用。

说明书

技术领域

本发明涉及水产遗传育种领域，具体地涉及一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的 培育方法。

背景技术

牡蛎(Ostreidae)属软体动物门(Mollusca)、双壳纲(Bivalvia)、珍珠贝目 (Pterioidae)、牡蛎科(Ostreidae)，是重要的海洋生物。其肉味鲜美，营养价值较高， 素有“海中牛奶”之美称，是世界各国重要的海水养殖对象，也是中国乃至世界养殖产量 最大的经济贝类。中国牡蛎产量居全球首位，而福建又是中国最大的牡蛎养殖区，主要养 殖葡萄牙牡蛎(Crassostrea angulata)，2012年葡萄牙牡蛎养殖产量已占全国牡蛎产量 的37％以上。但随着葡萄牙牡蛎养殖面积的逐年增加和产量的不断提高，也出现种质退化 现象，葡萄牙牡蛎原有的特征和品质发生改变，近几年突出表现在育苗成功率降低，养殖 牡蛎经常出现大批量死亡，并呈现养殖个体小型化、生长慢等经济性状持续衰退现象，影 响了牡蛎的养殖产量和质量。此外，目前我国牡蛎养殖仍沿用传统养殖方式，产品主要以 开壳鲜肉销售，产值低，养殖效益不高，与国外牡蛎价格相比相差甚远。因此培育高产、 优质的牡蛎新品系、实现牡蛎良种产业化，对推动我国牡蛎养殖产业持续健康发展具有重 要意义。

壳色作为一个可遗传的质量性状，在扇贝等一些贝类遗传育种研究中已取得较好成 果。本发明采用选择育种方法，以牡蛎贝壳金黄色和全重为选育目标，开展金黄壳色速长 葡萄牙牡蛎新品系选育，培育的新品系不仅生长速度快，且贝壳金黄、颜色绚丽。该品系 非常适宜单体牡蛎养殖及生食牡蛎生产，以提高葡萄牙牡蛎的养殖产量、商品价值和经济 效益。

发明内容

本发明的目的在于提供一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方法。

本发明提供的技术方案如下：

一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方法，它包括如下步骤：

1)亲贝选择：从葡萄牙牡蛎大量养殖群体中挑选2龄以上，贝壳呈金黄色、颜色绚丽、 壳型规整的个体；测量所有挑选个体的全重，然后截取全重前10％的雌雄个体作为繁殖亲 贝；

2)精卵获得：解剖亲贝，辨别雌雄，将性腺发育良好的亲贝分别进行洗卵、洗精，并 用300目筛绢过滤杂质，卵分别收集于标记的160L塑料白桶，精液分别收集于标记的 500ml烧杯中；

3)人工受精与孵化：

a.群体交配：取雌雄亲贝各20-25个，把其卵子和精子混合交配；

b.个体交配：取雌雄亲贝，进行雌雄个体1对1交配，建立家系；

将各组受精卵分别置于标记的160L塑料白桶中孵化，精液浓度以每个卵子周围3-4 个精子为宜，精液过多时采用沉淀法洗卵2-3次；受精卵密度40-50个/ml，微充气，孵 化水温25-30℃；

4)幼虫培育：受精卵发育至D型幼虫时采用虹吸方法分别将每组幼虫收集于三个已标 记的160L塑料白桶中培育，每组3个平行组；D型幼虫培育密度控制在8-12个/ml，随 着幼虫生长逐渐降低密度，至匍匐幼虫密度降至1-2个/ml；每日换水2次，每次换水 30％-50％，幼虫附着后增至60％-100％；D型幼虫开始投喂金藻，日投饵量从初期的1-2万 细胞/ml逐渐增至中期2-3万细胞/ml，后期3-4万细胞/ml，幼虫发育至壳顶后期添 加扁藻，日投饵量为1-2万细胞/ml；在幼虫培育期间可适当投喂角毛藻或小球藻，幼虫 培育期间水温25-30℃，盐度23-28，pH值8.0-8.5，从D型幼虫培育至匍匐幼虫约需14-20 天；

5)采苗：当幼虫生长至壳长320-330um,70-80％出现眼点时开始投放采苗器；采苗器 采用无毒材料制作的灰色塑料片，塑料片规格为长20-30cm,宽1-3cm，厚0.1-0.3cm；用 60-80丝聚乙烯绳将洗净的塑料片串在一起，绑在横杆上悬挂于育苗池水面下60-80cm处 采苗，每立方米水体投放塑料片30-40串；每片塑料片附苗20-30个；蛎苗长至壳长1-2mm 左右，标记各选育系并移至海区进行苗种中间培育；

在幼虫培育过程中，保持各组选育系幼虫密度相同，投饵量和换水率一致，培育条件 相同；各组选育系的育苗容器、器具分别单独使用，避免混杂；

6)海区牡蛎苗种中间培育：将标记的已附上蛎苗的采苗器移至同一片海区培育；若 遇上自然海区葡萄牙牡蛎幼虫附着期，可先移至池塘培育，待附着期过后再移至海区培育； 在水温13-26℃、盐度26-30的条件下，经过90-120天海区培育，蛎苗可长至壳长4-5cm；

7)牡蛎中苗脱基及单体养殖：当蛎苗长至4-5cm时，弯曲牡蛎附着基塑料片，蛎苗 便顺利脱落，形成单体牡蛎苗；将各选育系剥离的单体牡蛎苗装入标记的养殖筐挂于同一 片海区养殖；养殖期间定期清理附着生物，并测量生长情况；

8)新品系纯化：从贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎选育系第一代中选择具备个体大、贝壳 金黄色性状、壳型规整的个体作为第二代亲本，第二代选育各步骤同第一代选育方法，直 至选育出性状稳定的贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎品系。

其中，步骤5)中，采苗塑料片每串16-20片，片距13-17cm。

其中，步骤5)中，在水温25-30℃，幼虫固着后经5-6天培育，蛎苗可长至壳长1-2mm。

其中，步骤6)中，在水温13-26℃条件下，经过90-120天海区培育，蛎苗可长至壳 长4-5cm。

由上述描述可知，本发明公开了一种贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方法， 它包括如下步骤：制定选育目标、建立选育系、新品系纯化等步骤。具体为以葡萄牙牡蛎 金黄色贝壳和全重为选育目标，通过群体选育和家系选育方法建立选育系，通过连续数代 的定向纯化筛选出贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系。通过连续数代选育的葡萄牙牡蛎新 品系具有生长快、贝壳金黄、商品价值高等优点，它适宜作为单体牡蛎养殖及生食牡蛎生 产，这对于提高葡萄牙牡蛎养殖产量、商品价值和经济效益具有重要作用。

具体实施方式

在葡萄牙牡蛎养殖群体中有极小比例牡蛎贝壳呈金黄色，颜色绚丽，具有较高商品价 值。本方法以牡蛎金黄色贝壳和全重为选育目标。

第1代选育

(1)亲贝选择

2010年8月下旬从葡萄牙牡蛎大量养殖群体中挑选2龄以上，贝壳呈金黄色、颜色 绚丽、壳型规整的个体。测量所有挑选个体的全重，然后截取全重前10％的雌雄个体150 个作为繁殖亲贝。

(2)精卵获得

解剖亲贝，辨别雌雄，将性腺发育良好的亲贝分别进行洗卵、洗精，并用300目筛 绢过滤杂质，卵分别收集于标记的160L塑料白桶，精液分别收集于标记的500ml烧杯中。

(3)人工受精与孵化

①群体交配：取雌雄亲贝各25个，把其卵子和精子混合交配；

②个体交配：取雌雄亲贝，进行雌雄个体1对1交配，建立家系；

将各组受精卵分别置于标记的160L塑料白桶中孵化，受精卵孵化密度40-50个/ml， 微充气，孵化水温28-30℃。

(4)幼虫培育

受精卵发育至D型幼虫时采用虹吸方法分别将每组幼虫收集于三个已标记的160L 塑料白桶中培育(每组3个平行组)。D型幼虫培育密度10个/ml左右，随着幼虫生长逐 渐降低密度，至匍匐幼虫密度降至1-2个/ml。每日换水2次，每次换水30％-50％，幼虫 附着后增至60％-100％。D型幼虫开始投喂金藻，日投饵量从初期的1-2万细胞/ml逐渐 增至中期2-3万细胞/ml，后期3-4万细胞/ml，幼虫发育至壳顶后期添加扁藻，日投饵 量为1-2万细胞/ml。在幼虫培育期间可适当投喂角毛藻或小球藻。幼虫培育期间水温 28-30℃，盐度27，pH值8.2。从D型幼虫培育至匍匐幼虫17天。

(5)采苗

当幼虫生长至壳长320-330um,70-80％出现眼点时开始投放采苗器(附着基)。采苗器 采用无毒聚丙烯制作的灰色塑料片，塑料片规格为长24cm,宽2cm，厚0.2cm。用60-80 丝聚乙烯绳将洗净的塑料片串在一起，每串18片，片距15cm。每片塑料片附苗20-30个 为宜。在水温28-30℃条件下，幼虫固着后经6天培育，蛎苗长至壳长1-2mm，标记各选 育系并移至海区进行苗种中间培育。

在幼虫培育过程中，保持各组选育系幼虫密度相同，投饵量和换水率一致，培育条 件相同；各组选育系的育苗容器、器具分别单独使用，避免混杂。

(6)海区牡蛎苗种中间培育

将标记的已附上蛎苗的采苗器移至福建深沪湾海区培育。在水温13-26℃、盐度26-30 的条件下，经过115天海区培育，蛎苗可长至壳长4-5cm。

(7)牡蛎中苗脱基及单体养殖

当蛎苗长至4-5cm时，弯曲牡蛎附着基塑料片，蛎苗便顺利脱落，形成单体牡蛎苗。 将各选育系剥离的单体牡蛎苗装入标记的养殖筐挂于福建深沪湾海区养殖。养殖期间定期 清理附着生物，并测量生长情况。

经亲贝选择、精卵获得、人工受精与孵化、幼虫培育、采苗、海区牡蛎苗种中间培育、 牡蛎中苗脱基及单体养殖等步骤，获得第1代贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎选育系。2011 年8月下旬第1代发育至性成熟，即进行第2代选育。

第2代选育

(1)亲贝选择

2011年8月下旬，从2010年建立的第1代贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎选育系中选择 具备该性状(个体大、贝壳金黄色、颜色绚丽)的个体150个作为第2代亲贝。

(2)精卵获得、人工受精与孵化、幼虫培育、采苗、海区牡蛎苗种中间培育、牡蛎 中苗脱基及单体养殖等步骤同第1代选育。

2011年获得第1代选育系性成熟，通过实施例1，2012年8月获得第2代选育系性 成熟，至2013年已成功选育出第4代性状稳定的贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎品系。与对 照组(未选育组)相比，金黄壳色速长品系具有生长快、贝壳金黄、颜色绚丽等优点，其 生长速度比对照组提高10％以上。它具有较高的商品价值，适宜作为单体牡蛎养殖及生食 牡蛎生产，这对于提高葡萄牙牡蛎养殖产量、商品价值和经济效益具有重要作用。

本发明采用群体选育和家系选育方法，经过连续4代的定向选育，培育出性状稳定的 贝壳呈金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系，建立了贝壳金黄色速长葡萄牙牡蛎新品系的培育方 法。上述仅为发明的一个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思 对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。