Sn-1(3)单酰基甘油酯和脂质吸收

摘要

本发明总体上涉及脂质领域，具体地讲，本发明的目的在于例如在脂质消化不良或吸收不良的情况下改善脂质吸收。本发明的一个实施方案涉及包含sn-1(3)单酰基甘油的组合物，其中所述sn-1(3)单酰基甘油的sn-1或sn-3位被酰基例如脂肪酸占据，sn-2位未被占据。脂肪酸可以是具有抗炎特性的脂肪酸。

说明书

本发明总体上涉及脂质领域，具体地讲，本发明的目的在于例如在脂质消化不良或吸收不良的情况下改善脂质吸收。本发明的一个实施方案涉及包含sn-1(3)单酰基甘油的组合物，其中所述sn-1(3)单酰基甘油的sn-1或sn-3位被酰基例如脂肪酸占据，sn-2位未被占据。脂肪酸可以是具有抗炎特性的脂肪酸。

在吸收不良例如胰功能不全、胆汁盐缺乏、由于肠切除造成的短肠或粘膜病的情况下，生物活性脂肪酸的递送是至关重要的。

在这些生理学条件下，消化途径、包括胰脂肪酶对食物中甘油三酯的降解以及肠摄取所需的胶束宏观结构的形成均受到破坏。

在这些情况下，具有例如抗炎特性的生物活性脂肪酸的递送是非常重要的，因为该类型的脂肪酸有助于降低炎症反应。

根据已发表的文献(Freeman CP等人,J Dairy Sci1965;48:853-8;Innis SM等人,Lipids1994;29:541-5)，目前认为位于甘油酯sn-2位的脂肪酸比位于sn-1(3)位的脂肪酸更容易被机体吸收。

因此可以推测，在sn-2位带有脂肪酸的单酰基甘油(MAG)将会是提供易于吸收的脂肪酸的理想载体。

但是，已知sn-2MAG在例如长时间保存和/或在升高的温度下会发生异构化，生成sn-1(3)和sn-2MAG的混合物(Compton D.L.等人,20007;Lyubachevskaya G和Boyle-Roden E.,2000)。因此，目前并不认为使用Sn-2MAG提供脂肪酸能够比使用鱼油更有效地被吸收。

对于人类而言，目前还没有饮食方案可用于有效地递送必需脂肪酸，特别是当涉及脂质消化和吸收的机制被破坏时。因此，在医院中，通常使用胃肠外营养制剂。

在年老的宠物例如年老的狗或猫中，同样没有解决方案。

但是，需要能够使得脂肪酸即使在脂质吸收不良的情况下也能够被有效吸收的食品组合物。

因此，本发明的目的是提供最佳的甘油酯结构，其能够使脂肪酸，例如具有抗炎特性的脂肪酸例如EPA被有效吸收，特别是在吸收不良的情况下。该甘油酯结构应当在递送脂肪酸方面比鱼油更为有效。

本发明人出人意料地发现，与本领域中目前的推测相反，可以通过独立权利要求的主题实现该目的。从属权利要求进一步定义了本发明的实施方案。

发明人发现，可以通过使用sn-2和sn-1(3)MAG的混合物显著地改善脂肪酸吸收。

令人惊奇的是，与本领域目前所确信的相反，发现sn-2和sn-1(3)MAG的混合物在递送供吸收的脂肪酸方面比纯的sn-2MAG更为有效。

此外，发现sn-2和sn-1(3)MAG的混合物即使在消化不良或吸收不良的情况下也可以比鱼油在正常情况下更有效地提供脂肪酸。

因此，本发明涉及sn-1(3)MAG任选地与sn-2MAG(参见图1)组合以递送生物活性脂肪酸例如二十碳五烯酸(EPA)的用途，例如，在脂质消化不良或吸收不良的情况下。

MAG在吸收前无需被消化并且具有内在的乳化特性，使得液滴在肠道吸收前可以很好地分散。

发明人在脂质消化不良/吸收不良动物模型中测试了他们的想法。利用奥利司他(一种众所周知的胰腺和胃脂肪酶抑制剂)获取吸收不良条件。用主要含有二十碳五烯酸(EPA)的长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)补充剂喂食动物。使用鱼油作为甘油三酯源并评估不同的EPA甘油酯，例如图1中的那些。以不同的时间间隔测定血红细胞和血浆脂质的脂肪酸组成。在实验结束时，测定不同组织的脂肪酸组成。统计学评估表明，使用奥利司他降低了血红细胞中的EPA掺入量。发现与施用含有EPA在sn-1、sn-2和sn-3位的混合物的鱼油相比，在接受本发明的sn-1(3)MAG的动物中，血红细胞中的EPA掺入水平明显更高。这清楚地表明，在例如脂质吸收不良的情况下，以甘油三酯形式提供的LC-PUFA的掺入量降低。但是，如果以sn-1(3)MAG的形式提供LC-PUFA，则组织掺入量在脂质吸收不良/消化不良的情况下不会发生改变。

因此，本发明的一个实施方案是包含sn-1(3)MAG的组合物。

酰基可以是功能性脂肪酸。

对于本发明的目的而言，功能性脂肪酸是对健康有益的脂肪酸。

例如，功能性脂肪酸可以是具有抗炎特性的脂肪酸。具有抗炎特性的脂肪酸是本领域技术人员已知的。

例如，具有抗炎特性的脂肪酸可以选自二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亚麻酸(ALA)、十八碳四烯酸(stearidonic acid,SA)、γ-亚麻酸(GLA)、双高-γ-亚麻酸(DGLA)、二十二碳五烯酸(DPA)、金松油酸(sciadonic acid)和刺柏油酸(juniperonic acid)。

金松油酸是5Z,11Z,14Z-二十碳三烯酸。刺柏油酸是5(Z),11(Z),14(Z),17(Z)-二十碳四烯酸。

可用于本发明的构架的典型的MAG可以选自sn-1(3)-单二十碳五烯酸甘油、sn-1(3)-单二十二碳六烯酸甘油、sn-1(3)-单十八碳三烯酸甘油、sn-1(3)-单十八碳四烯酸甘油、sn-1(3)-单二十碳三烯酸甘油、sn-1(3)-单二十二碳五烯酸甘油、sn-1(3)-单金松油酸甘油、sn-1(3)-单刺柏油酸甘油或其组合。

例如，发明人用sn-1(3)-单二十碳五烯酸甘油作为sn-1(3)-单酰基甘油获得了非常好的结果。在此，即使在消化不良/吸收不良的情况下，脂肪酸的吸收也好于鱼油在正常情况下的脂肪酸吸收(图2)。

当然，组合物可以含有在sn-1(3)位具有不同脂肪酸的不同MAG的混合物。

脂肪酸可以以这样的方式混合，例如，使n-3和n-6脂肪酸之间具有特定的比例。

n-3脂肪酸包括例如α-亚麻酸、十八碳四烯酸、二十碳三烯酸、n-3二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、鱼泡酸(clupanodonic acid)、二十二碳六烯酸、n-3二十四碳五烯酸或n-3二十四碳六烯酸。

n-6脂肪酸包括例如亚油酸、γ-亚麻酸、n-6二十碳二烯酸、双高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、n-6二十二碳二烯酸、肾上腺酸、n-6二十二碳五烯酸或十八碳三烯酸。

该组合物可含有不同sn-1(3)单酰基甘油酯的组合;例如n-3和n-6脂肪酸的比例为约5:1至约15:1;例如约8:1至约10:1。

例如，本发明的组合物可用于递送具有抗炎特性的脂肪酸。

本发明的组合物在脂质消化不良或吸收不良的情况下尤其有用。

因此，本发明的组合物可以施用于患有脂质消化不良或吸收不良的情况的个体。

该组合物可用于患者任何类型的脂质消化不良或吸收不良的情况的个体。例如，所述吸收不良的情况可能是由于胰功能不全、胆汁盐缺乏、粘膜病和/或短肠引起的。

例如，如果MAG衍生物所包含的脂肪酸是具有抗炎特性的脂肪酸，则本发明的组合物可用于治疗或预防炎性病症。

本发明还涉及其中的酰基是具有抗炎特性的脂肪酸的sn-1(3)-单酰基甘油在制备用于治疗或预防炎性病症、特别是在脂质消化不良和/或吸收不良的情况下治疗或预防炎性病症的组合物中的用途。

炎性病症可选自急性炎症例如脓毒症，以及慢性炎症例如炎性肠疾病、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎、坏死性肠炎、皮肤炎症，例如UV或化学物质引起的皮肤炎症、湿疹、反应性皮肤、牛皮癣、白癜风、痤疮、炎性肠综合征、肝炎、酒精性肝硬化、过敏、遗传性过敏症、骨炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎、甲状腺炎、I型糖尿病、乳糜泻、比尔默氏病、多发性硬化、脑脊髓炎、眼炎、肥胖相关性炎症、年龄相关性低度炎症、Blau综合征、阿尔茨海默病、心血管疾病、动脉粥样硬化、代谢综合征或其组合。

本发明的组合物可以包含sn-2MAG和sn-1(3)MAG的混合物。

取决于用作脂肪酸sn-1(3)位的酰基的脂肪酸的性质，所述混合物可以通过异构化自动形成。

因此，该组合物可以包含不超过总MAG的25重量%，优选不超过15重量%的sn-2MAG。

可以通过调节pH至中性范围和/或将组合物保持在低温下来阻止或者至少是显著减慢不希望的异构化作用。

因此，组合物的pH范围可以为约5-8，优选约5-7。

还可以将组合物存放在8℃或更低的温度下。

即使在食用后，也可以通过抑制脂肪酶B的作用来进一步阻止MAG的异构化。

因此，该组合物可以进一步包含脂肪酶B抑制剂。脂肪酶B抑制剂是本领域技术人员已知的。优选可食用的脂肪酶B抑制剂。“可食用的”是指该物质被批准用于人或动物食用。

本发明的组合物可以是任何类型的可食用组合物。优选地，该组合物是用于口服或肠道给药的组合物。

例如，该组合物可选自食品、动物食品、药物组合物、营养组合物、保健食品、饮料、食品添加剂或药品。

例如，该组合物可以是例如在医院内肠道给药的液体营养配方。

该组合物还可以是用于向年龄在60岁以上的人群给药的营养制剂。

该组合物还可以是用于在牛奶或水中复溶的粉末组合物。

如果将组合物以粉末的形式提供，其可以是贮存稳定的粉末。可以通过使该组合物的水活度小于0.2，例如在0.19-0.05的范围内、优选小于0.15来获得贮存稳定性。水活度或a_w是体系中水的能量状态的量度。其定义为水的蒸汽压除以相同温度下纯水的蒸汽压;因此，纯净蒸馏水的水活度正好为1。

本发明组合物的能量密度可以根据患者的需求进行调整。

例如，本发明的组合物的能量密度可以在0.5kcal/ml至15kcal/ml的范围内。

对于患有吸收不良和/或食欲差的患者，可能优选相当高的能量密度。对于这样的患者，可以采用7-12kcal/ml的能量密度。

该组合物还可含有蛋白质源和/或碳水化合物源。优选易于消化的碳水化合物和/或蛋白质。

至少部分水解的蛋白质是易于消化和吸收的。因此，提供至少部分水解的蛋白质(水解度为2至20%)可能是有利的。如果需要水解的蛋白质，则可按照本领域已知的方法根据需要进行水解过程。例如，可以通过在一步或多步中用酶水解蛋白质级分来制备蛋白水解物。对于广泛水解蛋白，可以依次采用碱性蛋白酶2.4L(Alcalase2.4L)(EC940459)、中性蛋白酶0.5L(Neutrase0.5L)(得自Novo Nordisk Ferment AG)和胰酶在55℃下将蛋白质进行三重水解。

本发明组合物的脂肪酸的量可以根据患者的需求进行调整。

在治疗性应用中，将MAG衍生物以足以至少部分治愈或阻止疾病及其并发症的症状的量进行给药。足以实现该目的的量被定义为“治疗有效剂量”。对该目的有效的量取决于本领域技术人员已知的多种因素，例如疾病的严重程度以及患者的体重和一般状况。

在预防性应用中，将MAG衍生物以足以至少部分降低疾病发生风险的量向易患或存在患有特定疾病风险的个体进行给药。该量被定义为“预防有效剂量”。同样，精确的量取决于多种与患者有关的特定因素，例如患者的健康状态和体重。

本发明的组合物以足以提供治疗有效剂量或预防有效剂量的MAG衍生物的量给药。

例如，该组合物可以含有其量相当于约1%至40%组合物能量，例如约5%至40%组合物能量的sn-1(3)MAG衍生物。

本领域技术人员可以理解，可以自由地组合本文所述的本发明的所有特征而不超出所公开的本发明的范围。具体地讲，关于本发明的用途所述的特征可以应用于本发明的组合物，并且反之亦然。

从以下实施例和附图中可以明显看出本发明的其它优点和特点。

图1显示了本发明所用的EPA甘油酯的例子:sn-1(3)-单二十碳五烯酸甘油的混合物。

图2显示了EPA在血红细胞中的掺入量。处置:喂食含或不含奥利司他的鱼油的对照大鼠以及喂食图1所述的MAG的大鼠。值为平均值±SEM(n=6)。

实施例:

在脂质消化不良或吸收不良动物模型中进行测试。利用奥利司他(一种众所周知的胰腺和胃脂肪酶抑制剂)获取消化不良或吸收不良条件。用主要含有二十碳五烯酸(EPA)的长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)补充剂喂食动物21天。使用鱼油作为甘油三酯源并评估图1中所述的不同的EPA甘油酯(购自Cognis GmbH,德国)。以足以使脂吸收降低40%的量给予奥利司他。将接受不含奥利司他的鱼油的组作为阳性对照。以不同的时间间隔(第3天、第7天、第14天和第21天)测定血红细胞和血浆脂质的脂肪酸组成。在实验结束时，测定不同组织的脂肪酸组成。

主要目标是监测血红细胞和血浆脂质中的EPA水平。评估的主要比较是接受含有EPA的MAG(图1)并同时接受奥利司他的组与阳性对照组(鱼油+奥利司他)之间EPA水平的差异。

例如，在第7天获得的血红细胞脂质中的EPA数据如图2所示。统计学评估表明，使用奥利司他降低了血红细胞中的EPA掺入量(接受鱼油并接受奥利司他的组与接受鱼油但不接受奥利司他的组之间的比较)。该比较是非常重要的，因为它证实了模型的有效性。接受含有EPA的MAG的动物的血红细胞中的EPA掺入量在统计学上高于鱼油+奥利司他组(所有的P值低于0.05);并且更令人惊奇的是，其甚至高于鱼油组。

该实施例清楚地表明，在脂质消化不良或吸收不良的情况下，以甘油三酯形式提供的LC-PUFA掺入量降低。但是，如果以sn-1(3)MAG并结合sn-2MAG的形式提供LC-PUFA，则组织掺入量即使在脂质消化不良或吸收不良的情况下也不会发生改变，并且甚至还有提高。