原发性肥大性骨关节病致病基因

摘要

本发明涉及原发性肥大性骨关节病（PHO）的标记物。更具体而言，本发明涉及原发性肥大性骨关节病（PHO）的基因标记物及其用途，以及扩增其的引物、检测其的探针以及相关试剂盒。

说明书

技术领域

本发明涉及原发性肥大性骨关节病（PHO）的标记物。更具体而言，本发明涉及原发性肥大性骨关节病（PHO）的基因标记物。 

背景技术

原发性肥大性骨关节病（primary hypertrophic osteoarthropathy；PHO),也称作厚皮性骨膜病（pachydermoperiostosis；PDP)，是一种很少见的家族遗传疾病，通常表现为：回状头皮增生、杵状指、骨膜增厚和大关节痛，属于常染色体遗传病，严重影响患者的外观，给患者造成巨大心理负担。PHO通常为男性发病，女性较少发病（男女比例为7:1）[4,5]，目前我国所报道的32例病患均为男性。治疗一般采用手术切除增生皮肤。PHO病因尚不清楚，多数人认为本病为遗传性疾病，但由于遗传模式尚未清楚，发病率极低，且由于疾病表现严重导致家族性病例极罕见，因此对于该疾病的致病基因研究较为困难。国外早期的分子方面发病机制聚焦于前列腺素E2（PGE2）的代谢途径，PGE2是体内普遍存在的脂类代谢物，其产物会扩大炎症区域，故而在体内循环水平较低。研究发现了患者羟基前列腺素脱氢酶（HPGD）基因中负责编码分解PGE2酶（15-PGDH）的部分发生了突变，导致了酶功能的丧失。并在患者和携带者尿液中发现了PGE2含量的上升。 

目前单基因疾病的研究开始大量采用外显子组重测序的方法，最近，外显子组测序（exome sequencing）被成功地应用于发现稀有单基因疾病的致病基因，如Freeman–Sheldon综合症的MYH3基因，Schinzel-Giedion综合征的SETBP1基因，以及严重大脑畸形的WDR62突变等(Ng SB,Turner EH,Robertson PD,et al,Targeted capture and massively parallel sequencing of 12 human exomes.Nature 2009,461(7261):272-276;A H,BW vB,C G,et al,De novo mutations of SETBP1 cause Schinzel-Giedion syndrome.D-9216904(-1546-1718(Electronic));Bilguvar K,Ozturk AK,Louvi A,et al,Whole-exome sequencing identifies recessive WDR62mutations in severe brain malformations.Nature 2010,467(7312):207-210.)。全外显子测序技术已被证明为降低稀有单基因疾病候选基因甚至发现其致病基因的有力、有效手段，仅通过对几个很少的个体（包括患者及正常对照）的全外显子进行测序来筛选与疾病相关的变异，其成功率大为提升。 

本领域中急需找到PHO的致病基因，以及突变位点。 

发明内容

本研究通过外显子组测序的方法确定了PHO的致病基因。 

在第一方面，本发明涉及PHO的生物标记物，即突变的SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白，所述生物标记物是具有选自如下的突变的SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40Cfs*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)。 

在一个实施方案中，本发明的突变的SLCO2A1基因为SEQ ID NO:1的序列中具有以下突变： 

在外显子2中移码突变(c.121delC)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A)。 

在一个实施方案中，本发明的突变的SLCO2A1蛋白为SEQ ID NO:2的序列中具有以下突变： 

在外显子2中移码突变(p.L40Cfs*36)； 

在外显子13中错义突变(p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(p.A241Y)。 

在一个实施方案中，本发明的突变的SLCO2A1蛋白为SEQ ID NO:2的序列中具有外显子2中移码突变(p.L40Cfs*36)，在一个具体实例中，所述突变的SLCO2A1蛋白的序列是SEQ ID NO:31。 

在第二方面，本发明涉及一种检测PHO的方法，所述方法包括检测受试者的SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白中是否存在突变位点，如果有突变位点，则所述受试者被鉴定为患有PHO或易患PHO，所述突变位点选自如下任一种或其组合： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)。 

在一个实施方案中，SLCO2A1蛋白为SEQ ID NO:2的序列表示。 

在一个实施方案中，SLCO2A1基因为SEQ ID NO:1的序列表示。 

在一个实施方案中，本发明的检测PHO的方法包括如下至少一组引物扩增的步骤： 

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6； 

SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10； 

SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12； 

SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16； 

SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24； 

SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26。 

在一个实施方案中，本发明的检测PHO的方法中检测突变位点通过选自如下的技术进行：测序、电泳、核酸杂交、原位杂交、PCR、逆转录酶链反应和变性高效液相色谱。 

在第三方面，本发明涉及通过PCR检测SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白突变中使用的引物对，所述突变是选自如下任一种或其组合： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)， 

其中所述引物对分别基于选自如下的位置前后设计，使得扩增该位置（编号基于SLCO2A1的cDNA序列，724+1表示cDNA序列的724位之后在基因组DNA中是内含子序列，该内含子序列的第一位发生突变，940+1与之类似）：121、1781、1681、440、940+1和724+1。 

在第四方面，本发明涉及与突变SLCO2A1基因互补的核酸探针，所述突变是选自如下任一种或其组合： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)， 

所述探针与突变SLCO2A1基因的互补区包括选自如下的位置（编号基于SLCO2A1的cDNA序列，724+1表示cDNA序列的724位之后在基因组DNA中是内含子序列，该内含子序列的第一位发生突变，940+1与之类似）：121、1781、1681、440、940+1和724+1。 

在第五方面，本发明涉及检测突变SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白的试剂盒，包含一组或多组引物对，其中所述突变是选自如下任一种或其组合： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)， 

其中所述引物对分别基于选自如下的位置前后设计，使得其扩增产物涵盖该位置（编号基于SLCO2A1的cDNA序列，724+1表示cDNA序列的724位之后在基因组DNA中是内含子序列，该内含子序列的第一位发生突变，940+1与之类似）：121、1781、1681、440、940+1和724+1。 

在一个实施方案中，所述检测突变SLCO2A1基因或SLCO2A1蛋白的试剂盒包含选自如下的至少一组引物： 

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6； 

SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10； 

SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12； 

SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16； 

SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24； 

SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26。 

在第六方面，本发明涉及检测突变SLCO2A1基因的试剂盒，包含一个或多个核酸探针，所述突变是选自如下任一种或其组合： 

在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C*36)； 

在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)； 

在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)； 

在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)； 

在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)； 

在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)， 

所述探针与突变SLCO2A1基因上包含选自如下的位置的区域互补（编号基于SLCO2A1的cDNA序列，724+1表示cDNA序列的724位之后在基因组DNA中是内含子序列，该内含子序列的第一位发生突变，940+1与之类似）：121、1781、1681、440、940+1和724+1。 

该研究将为PHO的发病机制研究奠定重要基础，有可能为PHO的患者治疗提供全新的理论依据。 

具体实施方式

在本发明中，采用本领域通用表示法表示突变。例如，突变(c.1781G>A;p.C593Y)中，c表示cDNA，p表示蛋白质，DNA水平的突变对应蛋 白质水平的突变；移码突变(c.121delC;p.L40Cfs*36)中，c.121delC表示DNA水平第121位缺失C，p.L40Cfs*36表示从40位起算的36个氨基酸的移码，形成的突变蛋白质仅有75个氨基酸，如SEQ ID NO:31中所示；在错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)中，c.940+1表示c.940后面是内含子，+1表示该内含子的第1位，这位的G突变为A；同理在突变(c.724+1G>A;p.A241Y)中，c.724+1G>A表示c.724后面是内含子，+1表示该内含子的第1位，这位的G突变为A。 

野生型SLCO2A1基因的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，其中 

外显子1：为1-96；外显子2：为97-234；外显子3：为235-397；外显子4：为398-625；外显子5：为626-724；外显子6：为725-861；外显子7：为862-940；外显子8：为941-1105；外显子9：为1106-1295；外显子10：为1296-1461；外显子11：为1462-1625；外显子12：为1626-1690；外显子13：为1691-1814；外显子14：为1815-1932。其中外显子5后的内含子第1位和外显子7后的内含子第1位是G（在本发明中该位置分别以724+1和940+1表示），该突变影响剪接，从而使得剪接后的蛋白序列分别发生A241Y和R343H突变。 

SEQ ID NO:2：野生型SLCO2A1蛋白的氨基酸序列。 

对于本发明说明书和权利要求书中，提及基因序列，本领域技术人员应当理解，实际包括互补双链的任意一条，或者两条。为了方便，在本说明书和权利要求书中，虽然多数情况下只给出了一条链，但实际上也公开了与之互补的另一条链。例如提及SLCO2A1基因的cDNA序列，实际上包括该序列以及其互补序列。例如，提及SEQ ID NO:1，实际包括其互补序列。本领域技术人员还可以理解，利用一条链可以检测另一条链，反之亦然。 

本申请中的基因序列包括DNA形式或RNA形式，公开其中一种，意味着另一种也被公开。例如提及SLCO2A1基因的cDNA序列，实际也包括相应的RNA序列。 

实施例1确定PHO的致病基因。 

发明人近几年在国内收集到5例PHO病例，所有患者均表现出回状头皮增生、易出油出汗、杵状指、X光片检测表明长骨骨膜增厚等典型的PHO疾病特征。 

发明人对其中患有PHO的两兄弟（在表1中编号P1和P2）和其父 母的外显子组序列进行了测序。具体步骤如下： 

样品制备：采集所述两PHO患者及其父母家人外周血，利用试剂盒抽提外周血白细胞中的基因组DNA（RelaxGene Blood DNA System DP319-02.TIANGEN,China），利用NanoDrop 2000测量DNA的浓度及纯度(Thermo Scientific,USA)，所得的每个标本基因组DNA的OD260/OD280均位于1.7-2.0之间，浓度不少于100ng/ul，总量不少于30μl。 

然后，对上述四个样本的外显子组序列进行了测序。测序平台为Illumina Hiseq 2000，依照Illumina/Solexa标准建库说明书（参见http://www.illumina.com/）进行测序，简述如下： 

1）将基因组DNA随机打断成200-300bp左右的片段，随后在片段两端分别连接上接头制备杂交文库； 

2）文库经纯化后经过连接反应介导的PCR(LM-PCR)的线性扩增与生物素标记的DNA文库进行杂交富集，再经过LM-PCR的线性扩增后进行上机测序，读取长度为90bp，每个样本的平均测序深度最少为50； 

3）测序后获得的原始测序片段（reads）由Illumina basecalling Software 1.7进行处理，经过过滤去污染、使用SOAPaligner 2.20（Li R,Li Y,Kristiansen K,et al,SOAP:short oligonucleotide alignment program.Bioinformatics 2008,24(5):713-714；Li R,Yu C,Li Y,et al,SOAP2:an improved ultrafast tool for short read alignment.Bioinformatics 2009,25(15):1966-1967）比对参考基因组，获得比对到基因组上的唯一匹配测序片段。靶区域的基因型由SOAPsnp(Li R,Li Y,Fang X,Yang H,et al,SNP detection for massively p arallel whole-genome resequencing.Genome Res 2009,19(6):1124-1132)确定。 

结果，在这些样本中分别发现：父亲有84841个单核苷酸多态性（SNPs）和7168处的插入/缺失；母亲有83064个单核苷酸多态性（SNPs）和7149处的插入/缺失；患者P1有83547个单核苷酸多态性（SNPs）和7160处的插入/缺失；患者P2有82499个单核苷酸多态性（SNPs）和7109处的插入/缺失。 

随后，对结果通过四个公共数据库（dbSNP(v131): http://hgdownload.cse.ucsc.edu/goldenPath/hg19/database/snp131.txt.gz.；1000人：ftp://ftp.1000genomes.ebi.ac.uk/vol1/ftp或ftp://ftp-trace.ncbi.nih.gov/1000genomes/ftp；hapmap:ftp://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/hapmap；以及YH数据库:http://yh.genomics.org.cn）进行过滤，去掉所有已知的且在数据库中等位基因频率大于0.005的变异。 

发现两患者在基因SLCO2A1上都同时具有两个符合共分离的杂合突变点：在外显子2中移码突变(c.121delC;p.L40C)；在外显子13中错义突变(c.1781G>A;p.C593Y)。通过家族中2名患者和13位正常人SNP筛查共分离，这个位点可能是致病位点。 

结果显示于表1。SLCO2A1负责编码前列腺素转运蛋白，是一个拥有12次跨膜结构的转运子超家族成员。具有14个外显子。能够转运PGD2、PGE1、PGE2、PGF2a和PGH2。 

因此，发明人认为SLCO2A1基因极有可能为PHO的致病基因。 

实施例2在其他病例中确认上述PHO的致病基因。 

接着，发明人纳入其它PHO患者，对SLCO2A1基因为PHO的致病基因进行验证。验证中利用sanger法测序验证SLCO2A1基因的突变，其中考虑了家系内、家系外、散发等样本验证情况。 

分别对5名患者、20名家系内正常人（即该5例患者的父母，他们均未发病）和384名家系外正常人（即与表2中所有患者无血缘关系的对照）基因进行检测，针对SLOCO2A1基因所有外显子序列设计引物，通过PCR扩增，产物纯化，测序的方法获得有关序列，根据序列测定结果属于突变型还是野生型，验证SLCO2A1与PHO疾病之间相关性。 

具体方法步骤如下： 

1.DNA提取： 

分别采取5名家系内患者、20名家系内正常人和384名家系外正常人外周静脉血按照实施例1的方法提取基因组DNA和测定DNA含量。 

2.引物设计及PCR反应 

引物设计参考人类基因组序列数据库hg19/build36.3，具体见下。 

a)引物序列： 

b)反应体系： 

PCR扩增体系： 

c)PCR反应条件： 

94℃：        5分钟； 

30个循环：    94℃30秒，55℃30秒，72℃45秒； 

72℃：        10分钟； 

12℃：        持续。 

3）将步骤2中获得的获自5名PHO患者、20名家系内正常人（即该5例患者的父母，他们均未发病）和384名家系外正常人的PCR扩增产物直接进行DNA测序，方法同实施例1。 

发明人又在3个患者的SLCO2A1上发现4个新的符合共分离的突变位点：在外显子12中错义突变(c.1681C>T;p.R560C)；在外显子4中错义突变(c.440G>A;p.W146X)；在外显子7-8剪接中错义突变(c.940+1G>A;p.R343H)；在外显子5-6剪接中错义突变(c.724+1G>A;p.A241Y)。见表1，至此，本发明鉴定的所有6个点都符合隐性遗传。 

发明人收集到的5例PHO病例均在SLOCO2A1基因中检测到有意义的突变位点。同时所发现的突变位点在家族正常人及384例同种族无关正常对照中均未能检测到，提示所检测到的位点很可能并非SNP。同时R561C和C594Y在不同物种的同种蛋白中均高度保守，因此我们认为SLCO2A1基因为PHO的致病基因。 

表1： 

序列表说明 

SEQ ID NO:1：野生型SLCO2A1基因的cDNA序列（其中斜体下划线表示该位置是外显子末碱基，其后一位可能发生突变；正体下划线表示该位置可能发生突变）ATGGGGCTCCTGCCCAAGCTCGGCGCGTCCCAGGGCAGCGA CACCTCTACTAGCCGAGCCGGCCGCTGTGCCCGCTCGGTCTT CGGCAACATTAAGGTGTTTGTGCTCTGCCAAGGCCTCCTGCA GCTCTGCCAACTCCTGTACAGCGCCTACTTCAAGAGCAGCCT CACCACCATTGAGAAGCGCTTTGGGCTCTCCAGTTCTTCATC GGGTCTCATTTCCAGCTTGAATGAGATCAGCAATGCCATCCT CATCATCTTTGTCAGCTACTTTGGCAGCCGGGTGCACCGTCC ACGTCTGATTGGCATCGGAGGTCTCTTCCTGGCTGCAGGTGC CTTCATCCTCACCCTCCCACACTTCCTCTCCGAGCCCTACCAG TACACCTTGGCCAGCACTGGGAACAACAGCCGCTTGCAGGCC GAGCTCTGCCAGAAGCATTGGCAGGACCTGCCTCCCAGTAAG TGCCACAGCACCACCCAGAACCCCCAGAAGGAGACCAGCAGC ATGTGGGGCCTGATGGTGGTTGCCCAGCTGCTGGCTGGCATC GGGACAGTGCCTATTCAGCCATTTGGGATCTCCTATGTGGAT GACTTCTCAGAGCCCAGCAACTCGCCCCTGTACATCTCCATC TTATTTGCCATCTCTGTATTTGGACCGGCTTTCGGGTACCTGC TGGGCTCTGTCATGCTGCAGATCTTTGTGGACTATGGCAGGG TCAACACAGCTGCAGTTAACTTGGTCCCGGGTGACCCCCGAT GGATTGGAGCCTGGTGGCTAGGCCTGCTCATTTCTTCAGCTT TATTGGTTCTCACCTCTTTCCCCTTTTTTTTCTTCCCTCGAGC AATGCCCATAGGAGCAAAGAGGGCTCCTGCCACAGCAGATGA AGCAAGGAAGTTGGAGGAGGCCAAGTCAAGAGGCTCCCTGG TGGATTTCATTAAACGGTTTCCATGCATCTTTCTGAGGCTCCT GATGAACTCACTCTTCGTCCTGGTGGTCCTGGCCCAGTGCAC CTTCTCCTCCGTCATTGCTGGCCTCTCCACCTTCCTCAACAAG TTCCTGGAGAAGCAGTATGGCACCTCAGCAGCCTATGCCAAC TTCCTCATTGGTGCTGTGAACCTCCCTGCTGCAGCCTTGGGG ATGCTGTTTGGAGGAATCCTCATGAAGCGCTTTGTTTTCTCTC TACAAGCCATTCCCCGCATAGCTACCACCATCATCACCATCTC CATGATCCTTTGTGTTCCTTTGTTCTTCATGGGATGCTCCACC CCAACTGTGGCCGAAGTCTACCCCCCTAGCACATCAAGTTCT ATACATCCGCAGTCTCCTGCCTGCCGCAGGGACTGCTCGTGC CCAGATTCTATCTTCCACCCGGTCTGTGGAGACAATGGAATC GAGTACCTCTCCCCTTGCCATGCCGGCTGCAGCAACATCAAC ATGAGCTCTGCAACCTCCAAGCAACTGATCTATTTGAACTGC AGCTGTGTGACCGGGGGATCCGCTTCAGCAAAGACAGGATCG TGCCCTGTCCCCTGTGCCCACTTCCTGCTCCCGGCCATCTTCC TCATCTCCTTCGTGTCCCTGATAGCCTGCATCTCCCACAACCC CCTCTACATGATGGTTCTGCGTGTGGTGAACCAGGAGGAAAA GTCATTTGCCATCGGGGTGCAGTTCTTGTTGATGCGCTTGCT GGCCTGGCTGCCATCTCCAGCCCTCTATGGCCTCACCATTGA CCACTCCTGCATCCGGTGGAACTCGCTGTGCTTGGGGAGGCG AGGGGCCTGCGCCTACTATGACAACGATGCTCTCCGAGACAG GTACCTGGGCCTGCAGATGGGCTACAAGGCGCTGGGCATGCT GCTGCTTTGCTTCATCAGCTGGAGGGTGAAGAAGAACAAGGA GTACAACGTGCAGAAGGCGGCAGGCCTCATCTGA 

SEQ ID NO:2：野生型SLCO2A1蛋白的氨基酸序列MGLLPKLGASQGSDTSTSRAGRCARSVFGNIKVFVLCQGLLQLCQ LLYSAYFKSSLTTIEKRFGLSSSSSGLISSLNEISNAILIIFVSYFGSRV HRPRLIGIGGLFLAAGAFILTLPHFLSEPYQYTLASTGNNSRLQAEL CQKHWQDLPPSKCHSTTQNPQKETSSMWGLMVVAQLLAGIGTVP IQPFGISYVDDFSEPSNSPLYISILFAISVFGPAFGYLLGSVMLQIFVD YGRVNTAAVNLVPGDPRWIGAWWLGLLISSALLVLTSFPFFFFPRA MPIGAKRAPATADEARKLEEAKSRGSLVDFIKRFPCIFLRLLMNSL FVLVVLAQCTFSSVIAGLSTFLNKFLEKQYGTSAAYANFLIGAVNL PAAALGMLFGGILMKRFVFSLQAIPRIATTIITISMILCVPLFFMGC STPTVAEVYPPSTSSSIHPQSPACRRDCSCPDSIFHPVCGDNGIEYLS PCHAGCSNINMSSATSKQLIYLNCSCVTGGSASAKTGSCPVPCAHF LLPAIFLISFVSLIACISHNPLYMMVLRVVNQEEKSFAIGVQFLLMR LLAWLPSPALYGLTIDHSCIRWNSLCLGRRGACAYYDNDALRDRY LGLQMGYKALGMLLLCFISWRVKKNKEYNVQKAAGLI 

SEQ ID NO:31：SLCO2A1发生移码突变（c.121delC;p.L40Cfs*36）后所编码蛋白质的氨基酸序列MGLLPKLGASQGSDTSTSRAGRCARSVFGNIKVFVLCQGLCSSA NSCTAPTSRAASPPLRSALGSPVLHRVSFPA 。