用于妊娠性高血压疾病的生物标志物和参数

摘要

本申请披露了包括生物标志物和临床参数的用于预测、诊断、预后和/或监测妊娠性高血压疾病并且尤其是先兆子痫的新测试组；以及相关的方法、用途、试剂盒和装置。

说明书

技术领域

本发明涉及在受试者中对于诊断、预测、预后和/或监测疾病和病症 有用的生物标志物和参数，尤其是妊娠性高血压疾病，更尤其是先兆子痫； 并且涉及相关的方法、用途、试剂盒和装置。

背景技术

在许多疾病和病症中，预防性和/或治疗性治疗的有利结果强烈地与 疾病或病症的早期和/或准确预测、诊断、预后和/或监测相关。因此，存 在对于用于疾病和病症的早期和/或准确预测、诊断、预后和/或监测的另 外的和优选改善的方式的持续需要，以指导治疗方法的选择。

在妊娠期间发生的高血压疾病是全世界产妇的发病率和死亡率的主 要原因，并且也与增加的围产期死亡率相关。

在妊娠性高血压疾病中的显著位置属于先兆子痫（PE），其在约5% 至10%的怀孕女性中会发生（Solomon&Seely2006,Endocrinol Metab Clin  North Am35（1）:157-71,vii）。

PE可以被描述为在以前血压正常怀孕女性中在20周妊娠以后的新发 作高血压和蛋白尿，其可以是轻度或严重的。在20周妊娠以后患有轻度 疾病的患者显示>140/90的血压和基于24小时尿样本记录具有>300mg蛋 白的蛋白尿，并且通常接近预产期分娩而没有显著的复合病变。然而，约 25%的PE倾向于是严重的，涉及中枢神经系统功能障碍的症状和体征、 肝细胞损伤、减少的尿量和显著升高的血压（收缩压>160mmHg或舒张 压>110mmHg）。通常在妊娠中三个月的后期和妊娠末三个月的早期发生 严重的PE并且与增加的产妇和围产期发病率和死亡率相关。

PE的严重并发症包括1）HELLP综合征，其特征在于溶血、升高的 肝酶和低血小板，和2）子痫，其特征在于癫痫的发展。尽管上述两种病 症均是罕见的，它们与较差的预后相关（Solomon&Seely2006，在上文 中）。

先兆子痫还与胎儿并发症如宫内发育迟缓（IUGR）和小孕龄（SGA） 相关。

对于PE，仅有的疗法是娩出婴儿和胎盘。超过37周的妊娠，可以保 证分娩。在小于34周的孕龄时，治疗高血压和严密的胎儿监视可以防止 脑血管意外并延长妊娠，而没有治愈潜在疾病过程。对于严重的PE或子 痫的发展，分娩也是认为正当的（Sibai&Barton2007,Am J Obstet Gynecol 196（6）:514.e1-9）。

很大程度上仍然未解决PE的病因学和病理生理学并且它的诊断目前 完全基于疾病显现后的临床标准（Roberts et al.2003,Hypertension41（3）: 37-45）。然而，最近的数据表明，导致PE的事件可以早在妊娠前三个月 就潜在地开始和进展。

因而，在妊娠性高血压疾病尤其包括PE中，可靠的且早期的预测和 /或诊断对于成功的治疗干预是关键的。因此，用于诊断、预测、预后和/ 或监测妊娠性高血压疾病的长远的准备、可选择的和优选改善的方法和工 具仍然是最重要的。

然而，用来预测PE的发展的临床上有用的筛选试验是稀少的 （Conde-Agudelo et al.2004,Obstet Gynecol104:1367-91）。依赖于风险因 子也是不够标准的，因为（虽然已确定了PE的许多风险因子）50%以上 的病例特别地发生于年轻的、低风险的、未经产的女性中。因此，在它们 的发作和疾病进展方面妊娠性高血压疾病尤其是PE很大程度上仍是不可 预测的。

Lewitt等，1998（Journal of Endocrinology159:265）记载认为在妊娠 中胰岛素样生长因子（IGF）系统是重要的，并且与先兆子痫的病理生理 学相关。

Mistry等，2008（Hypertension52:881）报道在先兆子痫孕妇中降低 的硒浓度和谷胱甘肽过氧化物酶活性。

Rayman等2003（Am J Obstet Gynecol189:1343）观察到先兆子痫的 受试者的脚中趾甲的硒浓度显著低于其匹配的对照。

PerkinElmer Health Sciences Inc.的WO2009/094665涉及利用包括来 自受试者的血样的胎盘生长因子（PIGF）水平和妊娠相关血浆蛋白A （PAPP-A）水平的测试组和受试者中血压的测量用于测定妊娠的个体中 先兆子痫的风险的方法。

发明内容

通过进行大量的实验和测试，发明人确定了包含一种或多种生物标志 物和一种或多种临床参数的组，所述组密切预测和/或指示妊娠性高血压疾 病（此后为“HDP”），更具体地说，先兆子痫（此后为“PE”）。

根据本发明，通过提供包含以下各项的测试组实现了用于诊断、预测、 预后和/或监测HDP并且尤其是PE的另外的并且明显改善的方法和装置：

-测量胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位 （IGFALS）的水平，

-孕产妇历史参数‘患有早期PE的母亲或姐妹和/或患有缺血性心脏 病的父亲’（此后为“fh_petxcardio”）的得分，和

-测量血压。

应该理解的是本文中披露的参数fh_petxcardio在其中包含与孕产妇 历史参数‘受试者的母亲或姐妹患有先兆子痫’，即‘患有早期PE的母亲 或姐妹’（本文中还表示为“fh_pet”）和/或与孕产妇历史参数‘受试者的 父亲患有/患过缺血性心脏病’，即‘患有缺血性心脏病的父亲’（本文中还 表示为“father_any_ihd”）有关的信息。在优选实施方式中，参数 father_any_ihd可以涵盖或是指妇女的父亲已经患有心脏病发作、冠心病、 冠状动脉搭桥（coronary bypass）、血管成形术（angioplasty）或心绞痛的 事实（参见如BMJ2011,vol.342,d1875,supplementary info）。

因此，参数fh_petxcardio的阳性得分可以表明参数fh_pet潜在的阳性 得分，或可以表明参数father_any_ihd潜在的阳性得分，或可以表明参数 fh_pet和father_any_ihd两者潜在的阳性得分。

发明人已经认识到当仅得到孕产妇历史参数father_any_ihd的得分而 得不到参数fh_petxcardio的得分时，可以实现HDP尤其是PE的满意的并 且甚至更加精确的评价。因此，优选的实施方式提供包括以下各项的测试 组：

-胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位（IGFALS）水平的 测量结果，

-对孕产妇历史参数‘患有缺血性心脏病的父亲’（father_any_ihd）的得 分，和

-血压的测量结果。

当进一步包含选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至少 两种或者甚至至少三种（即，≥1、≥2或≥3）生物标志物和/或参数时， 本测试组的实施方式可以提供HDP或PE的更加可靠且早期的预测和/或 诊断：硒蛋白P（SEPP1）的水平的测量结果、s-内皮因子（ENG）的水 平的测量结果、利血平（quiescin）Q6水平的测量结果（QSOX1）、过氧 化物酶-2（peroxiredoxin-2）（PRDX2）水平的测量结果、血糖水平的测量 结果、体重指数（BMI）的测量结果、对于孕产妇的历史参数‘受试者的 父亲患有缺血性心脏病’（“father_any_ihd”）的得分、对于孕产妇的历史 参数‘受试者的母亲或姐妹患有先兆子痫’（“fh_pet”）的得分、血管内 皮生长因子受体3（FLT4）的水平的测量结果、溶酶体Pro-X羧肽酶（PRCP） 的水平的测量结果、过氧化物酶-1（PRDX1）的水平的测量结果、亮氨酰 -胱氨酸氨肽酶（leucyl-cystinyl aminopeptidase）（LNPEP，OTASE）的水 平的测量结果、腱糖蛋白-X（TNXB）的水平的测量结果、基膜-特异性类 肝素硫酸蛋白聚糖核心蛋白（HSPG2）的水平的测量结果、细胞表面糖蛋 白（CD146、MUC18、MCAM）的水平的测量结果、磷脂酰肌醇-聚糖- 特异性磷脂酶D（GPLD1）的水平的测量结果、胶原质α-3(VI)链（COL6A3） 的水平的测量结果、库尼茨型（Kunitz-type）蛋白酶抑制剂1（SPINT1） 的水平的测量结果、肝细胞生长因子样蛋白（MST1）的水平的测量结果、 疑似（可能）G-蛋白偶联受体126（GPR126）的水平的测量结果、细胞间 粘附分子3（ICAM3）的水平的测量结果、和C反应蛋白（CRP）的水平 的测量结果；在最优选的组中使用的生物标志物和参数：特别优先选自由 以下各项所组成的组中：SEPP1的水平的测量结果、ENG的水平的测量 结果、QSOX1的水平的测量结果、PRDX2的水平的测量结果、和血糖水 平的测量结果。在一些实施方式中，可以不包括ENG的水平的测量结果。

当除了IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分或优选 father_any_ihd的得分、和血压的测量结果，本测试组的进一步的实施方 式进一步包含选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至少两种 或者甚至至少三种（即≥1、≥2或≥3）生物标志物和/或参数时，本测试 组的进一步的实施方式可以提供HDP或PE更加可靠的且早期的预测和/ 或诊断：SEPP1的水平的测量结果、s-内皮因子（ENG或s-ENG）的水平 的测量结果、利血平Q6（QSOX1）的水平的测量结果、PRDX2的水平的 测量结果、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、对father_any_ihd的 得分、对fh_pet的得分、参数bb_hdl的值（即高密度脂蛋白水平；例如， 在实验部分，该参数可以表示从受试者中得到并保存在SCOPE生物库中 的HDL水平），参数bb_total_hdl_ratio的值（即总胆固醇与高密度脂蛋白 的比值；例如，在实验部分中该参数可以表示从受试者中得到并保存在 SCOPE生物库中的总胆固醇与HDL的比值），对参数代谢综合征的得分 {病症代谢综合征本身是已知的（参见，例如Alberti et al.Diabetic Medicine, 2006,vol.23,469-480），并且根据领域建立的定义和方法诊断为患有代谢 综合征的任何受试者都将被计分为对如本文中预期的对于参数代谢综合 征为“1”或“是”或“阳性”。在优选实施方式中，当受试者满足以下4 种病症中的至少2种时，她可以定性为代谢综合征阳性（如得分=“1”或 “是”或阳性）：1）BMI>=30，2）bb_trig>1.7（mmol/L）（参数“bb_trig” 表示甘油三酯水平，例如，在实验部分中，该参数可以表示从受试者中得 到并保存在SCOPE生物库中的甘油三酯水平），3）bb_hdl<1.29（mmol/L） 和4）1st_vst_sbp_2nd>130（mm Hg）或1st_vst_dbp_2nd>85（mm Hg）}， 参数甘油三酯水平（“bb_trig”）的值、FLT4的水平的测量结果、PRCP的 水平的测量结果、PRDX1的水平的测量结果、LNPEP的水平的测量结果、 TNXB的水平的测量结果、HSPG2的水平的测量结果、MUC18的水平的 测量结果、GPLD1的水平的测量结果、COL6A3的水平的测量结果、 SPINT1的水平的测量结果、MST1的水平的测量结果、GPR126的水平的 测量结果、ICAM3的水平的测量结果、CRP的水平的测量结果、含解聚 素（disintegrin）和金属蛋白酶结构域蛋白12（ADAM12）的水平的测量 结果、磷脂酰胆碱-固醇酰基转移酶（LCAT）的水平的测量结果、回旋同 源物4（roundabout homolog4）（ROBO4）水平的测量结果、外核苷酸焦 磷酸酶（核苷酸外焦磷酸酶，ectonucleotide pyrophosphatase）/磷酸二酯酶 家族成员2（ENPP2）的水平的测量结果、和蛋白S100-A9（S100A9）的 水平的测量结果。

当除了IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分、和血压的 测量结果，它们进一步包含选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更 优选至少两种或者甚至三种（即≥1、≥2或≥3）生物标志物和/或参数时 该测试组的其它实施方式可以提供HDP或PE的更加可靠且早期的预测和 /或诊断：SEPP1的水平的测量结果、s-内皮因子（ENG或s-ENG）的水 平的测量结果、BMI的测量结果、fh_pet的得分、bb_hdl的值、 bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、HSPG2的水平的测量结果、 MUC18的水平的测量结果、SPINT1的水平的测量结果、ADAM12的水 平的测量结果、LCAT的水平的测量结果、ROBO4的水平的测量结果、 ENPP2的水平的测量结果、和S100A9的水平的测量结果。

为了简明，在本文中词组“[生物标志物]的水平的测量”与词组如“[生 物标志物]水平的测量”或简单的“[生物标志物]水平”可以同义地使用。

此外，在整个该说明书披露的任何一个组中，可以由硒水平的测量结 果补充或替代硒蛋白P（SEPP1）的水平的测量结果。因此，对于本文中 详细说明的包含硒蛋白P（SEPP1）水平测量结果的任何一个组，本说明 书还披露了包含硒水平的测量结果而不包括SEPP1水平的测量结果的其 它相同的组，和除了SEPP1水平的测量结果外还包含硒水平测量结果的另 一个其它相同的组。然而，可以优选至少或仅SEPP1水平的测量结果。

体现本发明原理的特别优选的测试组（此后为“组A”）包含IGFALS 水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、和血压的测量结果；和：

-进一步包含SEPP1的水平的测量结果、ENG的水平的测量结果、QSOX1 的水平的测量结果、PRDX2的水平的测量结果、和血糖水平的测量结 果中的任一种或多种，尤其是任一种、任两种或任三种；或者

-进一步包含SEPP1的水平的测量结果、QSOX1的水平的测量结果、 PRDX2的水平的测量结果、和血糖水平的测量结果中任一种或多种， 尤其是任一种、任两种或任三种。

优选地，组A可以包含father_any_ihd的得分而不包含fh_petxcardio 的得分。

体现本发明原理的另一个特别优选的测试组（此后为“组B”）包含 IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、和SEPP1 的水平的测量结果；和：

-可选地并且优选地进一步包含ENG的水平的测量结果、QSOX1的水 平的测量结果、PRDX2的水平的测量结果、和血糖水平的测量结果中 的任一种或多种，尤其是任一种、任两种或任三种；或者

-可选地并且优选地进一步包含QSOX1的水平的测量结果、PRDX2的 水平的测量结果、和血糖水平的测量结果中的任一种或多种，尤其是 任一种、任两种或全部的三种。

优选地，组B可以包含father_any_ihd的得分而不是fh_petxcardio的 得分。

体现本发明原理的进一步特别优选的测试组（此后为“组C”）包含 IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、和血 糖水平的测量结果；和：

-可选地并且优选地进一步包含SEPP1的水平的测量结果、和ENG的 水平的测量结果中的任一种或两种；或者

-可选地并且优选地进一步包含SEPP1的水平的测量结果。

优选地，组C可以包含father_any_ihd的得分而不是fh_petxcardio的 得分。

体现本发明原理的又一个特别优选的测试组（此后为“组D”）包含 IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、和 QSOX1水平的测量结果；和：

-可选地并且优选地进一步包含ENG的水平的测量结果、SEPP1的水平 的测量结果、和PRDX2的水平的测量中的任一种或多种，尤其是任一 种、任两种或全部的三种；或

-可选地并且优选地进一步包括SEPP1的水平的测量结果、和PRDX2 的水平的测量结果中的任一种或两种；或者

-可选地并且优选地进一步包括ENG的水平的测量结果。

优选地，组D可以包括father_any_ihd的得分而不是fh_petxcardio的 得分。

已经实现了根据本发明的测试组的特定实施方式，其在诊断、预测、 预后和/或监测HDP尤其是PE中表现出出乎意料地有利的、甚至相互促 进程度的特异性和选择性。

因此，在一个实施方式中，组（此后为“组E”）包含或由IGFALS 水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、血糖水平的测 量结果、和SEPP1水平的测量结果组成。优选地，组E可以包含 father_any_ihd的得分替代fh_petxcardio的得分。

组E也可以有利地包括ENG水平的测量结果。因此，在一个实施方 式中，组（此后为“组F”）包含或由IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio 的得分、血压的测量结果、血糖水平的测量结果、SEPP1水平的测量结果、 和ENG水平的测量结果组成。优选地，组F可以包含father_any_ihd的得 分替代fh_petxcardio的得分。

在另一个实施方式中，组（此后为“组G”）包含或由IGFALS水平 的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、SEPP1水平的测量 结果、PRDX2水平的测量结果、和QSOX1水平的测量结果组成。优选地， 组G可以包含father_any_ihd的得分替代fh_petxcardio的得分。

在又一个实施方式中，组（此后为“组H”）包含或由IGFALS水平 的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压的测量结果、ENG水平的测量结 果、和QSOX1水平的测量结果组成。优选地，组H可以包含father_any_ihd 的得分而不是fh_petxcardio的得分。

基本上在整个妊娠和/或产后，或当在妊娠中的一个或多个时间段（如 在前三个月、中三个月和/或末三个月）内或产后评价时，或仅当在妊娠或 产后的一个或多个比较短的时间段内（如约10、8、6、4或2周）评价时， 本组可以显示出其对于HDP或PE的诊断、预测、预后和/或监测的值。 在本文中全部这样的组是有用的和合适的。

在测试时认为健康的受试者中，即，在检测时没有临床明显（clinically  manifest）（活动的）的HDP或PE的受试者中，本组可以特别有利地使得 能够预测HDP或PE的随后的/稍后的发病率。有利地，因此本组可以尤 其在妊娠约10至约24周之间的受试者中评价，优选在妊娠约13至约22 周之间，更优选在妊娠约14至21周之间，更优选在妊娠约15至20周之 间；如在妊娠约12至约18周之间（即15+/-约3周），优选在约13至约 17周之间（即15+/-约2周），优选在约14至约16周之间（即15+/-约1 周）或更优选在约15周；或如在妊娠约17至约23周之间（即20+/-约3 周），优选在约18至约22周之间（即20+/-约2周），优选在约19至约21 周之间（即20+/-约1周）或更优选在约20周（关于人类女性妊娠）。这 样的预测可以优选表明被测受试者将发展为临床明显的HDP或PE的可能 性、概率或风险，可选地还使得能够预测某一时间段内的发作或在妊娠或 产后的特定年龄发作如，例如早发型先兆子痫（即临床表现<妊娠34周） 与早产型PE（即临床表现<妊娠37周）与临产型PE（即临床表现妊娠37 周）。

特别优选地，本组在妊娠约17至23周之间（即20+/-约3周）优选 在约18至约22周之间（即20+/-约2周），优选在约19至约21周之间（即 20+/-约1周）或更优选在约20周（关于人类女性妊娠）的被测受试者中 使得能够预测HDP或PE的随后的/稍后的发病率。

优选地，除了IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分和血压 的测量结果，在妊娠15+/-约3周或优选在15+/-约2周或优选在15+/- 约1周或更优选在约15周要评价的测试组可以进一步包含下列各项中的 至少一种、更优选至少两种或甚至至少三种：PRDX2水平、QSOX1水平、 SEPP1水平、ENG水平、FLT4水平、TNXB水平、HSPG2水平、LNPEP 水平、MST1水平、GPR126水平、ICAM3水平、CRP水平、BMI的测量 结果、孕产妇历史参数father_any_ihd的得分、和孕产妇历史参数fh_pet 的得分；特别优先选自由以下各项所组成的组：PRDX2水平、QSOX1水 平、SEPP1水平和ENG水平（此后为“组I”）。在一些实施方式中，可以 排除ENG水平的测量结果。优选地，该段中详述的组，特别是如组I，可 以包含father_any_ihd的得分替代fh_petxcardio的得分。

优选地，在妊娠15+/-约3周，优选在15+/-约2周或优选在15+/- 约1周或更优选在约15周，使用以上列出的组D、G或H中的任何一个 可以获得HDP或PE的非常可靠且早期的预测和/或诊断，更优选地其中 所述组D、G或H包括father_any_ihd的得分替代fh_petxcardio的得分。

优选地，除了IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分和血压 的测量结果，在妊娠20+/-约3周或优选在20+/-约2周或优选在20+/- 约1周或更优选在约20周待评价的测试组可以进一步包含下列各项中的 至少一种、更优选至少两种或者甚至至少三种：ENG水平、SEPP1水平、 FLT4水平、PRCP水平、PRDX1水平、LNPEP水平（虽然不限于排除ENG 水平的组，但LNPEP水平对其可能是特别有用的）、TNXB水平、HSPG2 水平、MUC18/MCAM水平、GPLD1水平、COL6A3水平和SPINT1水 平、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、孕产妇历史参数father_any_ihd 的得分和孕产妇历史参数fh_pet的得分；特别地优先选自由以下各项所组 成的组：血糖水平的测量结果和SEPP1和ENG中任何一个的水平的测量 结果（此后为“组J”）。在一些实施方式中，可以排除ENG水平的测量结 果。优选地，该段中详述的组，特别是如组J，可以包含father_any_ihd 的得分而不包含fh_petxcardio的得分。

优选地，在妊娠20+/-约3周，优选在20+/-约2周或优选在20+/- 约1周或更优选在约20周，使用以上列出的组C、E或F中的任何一个 可以获得HDP或PE的非常可靠且早期的预测和/或诊断，更优选其中所 述组C、E或F包含father_any_ihd的得分而不包含fh_petxcardio的得分。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于预测 HDP或优选PE，优选在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2周或更 优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所述组包含IGFALS水平的测 量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，并且进一步可选地并 且优选地包含选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至少两种 或甚至更优选至少三种标志物和/或参数：SEPP1水平、ENG水平、BMI 的测量结果、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、 HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12水平、LCAT水平、 ROBO4水平、ENPP2水平和S100A9水平。该类型的优选的≥4个成员的 组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd 的得分和血压的测量结果，和选自由以下各项所组成的组中的一种标志物 或参数：ENG水平、bb_hdl的值、代谢综合征的得分、MUC18水平和 ADAM12水平；特别优先选自由ENG水平、bb_hdl的值、代谢综合征的 得分和ADAM12水平所组成的组。该类型的优选的≥5个成员的组可以 包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分 和血压的测量结果，和选自由以下各项所组成的组中的两种标志物和/或参 数：SEPP1水平、ENG水平、BMI的测量结果、bb_hdl的值、 bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、MUC18水平、SPINT1水平 和ADAM12水平；特别优选其中至少一种并且更优选至少两种所述标志 物和/或参数选自ENG水平、bb_hdl的值、代谢综合征的得分、MUC18 水平和ADAM12水平。该类型的优选的≥6个成员的组可以包含或由以 下各项组成：IGFALS水平的测量、father_any_ihd的得分和血压的测量结 果，和选自由以下各项所组成的组中的三种标志物和/或参数：SEPP1水 平、ENG水平、BMI的测量结果、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、 代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12 水平、LCAT水平、ROBO4水平、ENPP2水平和S100A9水平；特别优选 其中至少一种并且更优选至少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物 和/或参数选自ENG水平、BMI的测量结果、bb_hdl的值、代谢综合征的 得分、MUC18水平和ADAM12水平。该类型的特别优选的组可以包含或 由在示例性组T4.1至T4.4中的任何一个中包含的标志物或参数组成，如 实施例5中所示。

进一步优选的实施方式提供了测试组，尤其适合但不限于用于使用 “rule-in”测试预测HDP或优选地预测PE，优选在妊娠的20+/-约3周（优 选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所 述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结 果，并且进一步可选地且优选地包含选自由以下各项所组成的组中的至少 一种、更优选至少两种或甚至更优选至少三种标志物和/或参数：SEPP1 水平、ENG水平、BMI的测量结果、bb_hdl的值、代谢综合征的得分、 HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12水平、ROBO4水平 和ENPP2水平。该类型的优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各项组 成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果， 和选自由ENG水平和ADAM12水平所组成的组中的一种标志物或参数。 该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水 平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由SEPP1 水平、ENG水平、BMI的测量结果、代谢综合征的得分、MUC18水平和 ADAM12水平所组成的组中的两种标志物和/或参数。该类型的优选的≥6 个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、 father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由以下各项所组成的组 中的三种标志物和/或参数：SEPP1水平、ENG水平、BMI的测量结果、 bb_hdl的值、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1 水平、ADAM12水平、ROBO4水平和ENPP2水平；特别优选其中至少一 种并且更优选至少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物和/或参数选 自ENG水平、BMI的测量结果、代谢综合征的得分、MUC18水平和 ADAM12水平。该类型的特别优选的组可以包含或由在示例性组T5.1至 T5.9中的任何一个中包含的标志物或参数组成，如实施例5所示。

进一步优选的实施方式提供了测试组，特别适于但不限于用于预测 HDP或优选地预测早产型PE，优选在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/- 约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所述组包含IGFALS 水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，并且进一步 可选地且优选地包含选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至 少两种或甚至更优选至少三种标志物和/或参数：SEPP1水平、ENG水平、 bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、MUC18水平、SPINT1水平、 ADAM12水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥5个成员的组可以包含 或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血 压的测量结果，和选自由以下各项所组成的组中的两种标志物和/或参数： SEPP1水平、ENG水平、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、 MUC18水平、SPINT1水平和ADAM12水平；特别优选其中至少一种并 且更优选至少两种所述标志物和/或参数选自ENG水平、代谢综合征的得 分、SPINT1水平和ADAM12水平。该类型的优选的≥6个成员的组可以 包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分 和血压的测量结果，和选自由以下各项所组成的组中的三种标志物和/或参 数：SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、SPINT1 水平、ADAM12水平和ROBO4水平；特别优选其中至少一种并且更优选 至少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物和/或参数选自ENG水平、 代谢综合征的得分、SPINT1水平和ADAM12水平。该类型的特别优选的 组可以包含或由在示例性组T6.1至T6.2中的任何一个中包含的标志物或 参数组成，如实施例5所示。

进一步优选的实施方式提供了测试组，特别适合但不限于用于使用 “rule-in”测试预测HDP或优选地预测早产型PE，优选在妊娠20+/-约3 周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周）， 所述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量 结果，并且进一步可选地且优选地包含选自由以下各项所组成的组中的至 少一种、更优选至少两种或甚至更优选至少三种标志物和/或参数：SEPP1 水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12 水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量 结果，和选自由ENG水平、代谢综合征的得分和ADAM12水平所组成的 组中的两种标志物或参数；该类型的优选的≥6个成员的组可以包含或由 以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的 测量结果，和选自由SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18 水平、SPINT1水平、ADAM12水平和ROBO4水平所组成的组中的三种 标志物和/或参数；特别优选其中至少一种并且更优选至少两种并且甚至更 优选至少三种所述标志物和/或参数选自ENG水平、代谢综合征的得分、 SPINT1水平和ADAM12水平。该类型的特别优选的组可以包含或在示例 性组T7.1至T7.4中的任何一个中包含的标志物或参数组成，如实施例5 所示。

进一步优选的实施方式提供了测试组，特别适合但不限于用于在非肥 胖的受试者中预测HDP或优选地预测PE，优选在妊娠20+/-约3周（优 选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所 述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结 果，并且进一步可选地且优选地包含选自由以下各项所组成的组中的至少 一种、更优选至少两种或甚至更优选至少三种标志物和/或参数：SEPP1 水平、ENG水平、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、ADAM12 水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥4个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量 结果，和选自由ENG水平、ADAM12水平和ROBO4水平所组成的组中 的一种标志物或参数；特别优选选自由ENG水平和ADAM12水平组成的 组。该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS 水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由 SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水 平和ROBO4水平所组成的组中的两种标志物和/或参数；特别优选其中至 少一种并且更优选至少两种所述标志物和/或参数选自SEPP1水平、ENG 水平、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥6 个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、 father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由SEPP1水平、ENG水 平、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、ADAM12水平和 ROBO4水平所组成的组中的三种标志物和/或参数；特别优选其中至少一 种并且更优选至少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物和/或参数选 自SEPP1水平、ENG水平、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平。 该类型的特别优选的组可以包含或由在示例性组T8.1至T8.4中的任何一 个中包含的标志物或参数组成，如实施例5所示。

进一步优选的实施方式提供了测试组，特别适合但不限于用于在非肥 胖受试者中使用“rule-in”测试预测HDP或优选地预测PE，优选在妊娠 20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选 在约20周），所述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分 和血压的测量结果，并且进一步可选地且优选地包含选自由以下各项所组 成的组中的至少一种、更优选至少两种或甚至更优选至少三种标志物和/ 或参数：SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18 水平、ADAM12水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥4个成员的组可 以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得 分和血压的测量结果，和选自由ENG水平和ADAM12水平所组成的组中 的一种标志物或参数；该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量 结果，和选自由SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水 平、ADAM12水平和ROBO4水平所组成的组中的两种标志物和/或参数； 特别优选其中至少一种并且更优选至少两种所述标志物和/或参数选自 SEPP1水平、ENG水平、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平。 该类型的优选的≥6个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水 平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由SEPP1 水平、ENG水平、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、ADAM12 水平和ROBO4水平所组成的组中的三种标志物和/或参数；特别优选其中 至少一种并且更优选至少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物和/或 参数选自SEPP1水平、ENG水平、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4 水平。该类型的特别优选的组可以包含或由在示例性组T9.1至T9.10中的 任何一个中包含的标志物或参数组成，如实施例5所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于在非肥胖 的受试者中预测HDP或优选地预测早产型PE，优选在妊娠20+/-约3周 （优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周）， 所述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量 结果，并且进一步可选地且优选地包含选自由SEPP1水平、ENG水平、 代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平所组成 的组中的至少一种、更优选至少两种或甚至更优选至少三种标志物和/或参 数。该类型的优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS 水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由ENG 水平和ADAM12水平所组成的组中的一种标志物或参数；该类型的优选 的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、 father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由SEPP1水平、ENG水 平、代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平所 组成的组中的两种标志物和/或参数；特别优选其中至少一种并且更优选至 少两种所述标志物和/或参数选自ENG水平、MUC18水平、ADAM12水 平和ROBO4水平。该类型的优选的≥6个成员的组可以包含或由以下各 项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结 果，和选自由SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、 ADAM12水平和ROBO4水平所组成的组中的三种标志物和/或参数；特 别优选其中至少一种并且更优选至少两种并且甚至更优选至少三种所述 标志物和/或参数选自ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、 ADAM12水平和ROBO4水平。该类型的特别优选的组可以包含或由在示 例性组T10.1至T10.4中的任一个中包含的标志物或参数组成，如实施例 5所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于在非肥胖 的受试者中使用“rule-in”测试预测HDP或优选地预测早产型PE，优选 在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或 更优选在约20周），所述组包含IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd 的得分和血压的测量结果，并且进一步可选地且优选地包含选自由SEPP1 水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水平和 ROBO4水平所组成的组中的至少一种、更优选至少两种或甚至更优选至 少三种标志物和/或参数。该类型的优选的≥4个成员的组可以包含或由以 下各项组成：IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测 量结果，和选自由ENG水平和ADAM12水平所组成的组中的一种标志物 或参数；该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成： IGFALS水平的测量结果、father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选 自由SEPP1水平、ENG水平、代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12 水平和ROBO4水平所组成的组中的两种标志物和/或参数；特别优选其中 至少一种并且更优选至少两种所述标志物和/或参数选自ENG水平、 MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平。该类型的优选的≥6个成 员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果、 father_any_ihd的得分和血压的测量结果，和选自由SEPP1水平、ENG水 平、代谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平所 组成的组中的三种标志物和/或参数；特别优选其中至少一种并且更优选至 少两种并且甚至更优选至少三种所述标志物和/或参数选自ENG水平、代 谢综合征的得分、MUC18水平、ADAM12水平和ROBO4水平。该类型 的特别优选的组可以包含或由在示例性组T11.1至T11.7中的任一个中包 含的标志物或参数组成，如实施例5所示。

鉴于已经进行的另外的实验和测试，本发明人还认识到不必须包含参 数fh_petxcardio的得分或参数father_any_ihd的得分的组也可以密切地预 测和/或指示HDP、更具体地说是PE。

根据本发明的另一方面，通过提供包含以下各项的测试组实现了用于 诊断、预测、预后和/或监测（优选预测）HDP尤其是PE的另外的和明显 改进的方法和装置：

-胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位（IGFALS）的 水平的测量结果，和

-血压的测量结果。

在优选实施方式中，测试组可以包含：

-胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位（IGFALS）的 水平的测量结果，

-血压的测量结果，和

选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至少两种或者甚至 至少三种（即，≥1、≥2、或≥3）生物标志物和/或参数：SEPP1的水平 的测量结果、s-内皮因子水平的测量结果、QSOX1的水平的测量结果、 PRDX2的水平的测量结果、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、fh_pet 的得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、bb_trig 的值（参数“bb_trig”表示甘油三酯水平，例如，在实验部分中，该参数 可以表示从受试者中获得并保存在SCOPE生物库中的甘油三酯水平）、 FLT4水平的测量结果、PRCP的水平的测量结果、PRDX1的水平的测量 结果、LNPEP的水平的测量结果、TNXB的水平的测量结果、HSPG2的 水平的测量结果、MUC18的水平的测量结果、GPLD1的水平的测量结果、 COL6A3的水平的测量结果、SPINT1的水平的测量结果、MST1的水平 的测量结果、GPR126的水平的测量结果、ICAM3的水平的测量结果、CRP 的水平的测量结果、ADAM12的水平的测量结果、LCAT的水平的测量结 果、ROBO4的水平的测量结果、ENPP2的水平的测量结果、和S100A9 的水平的测量结果。

在特别优选的实施方式中，测试组可以包含：

-胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位（IGFALS）的 水平的测量结果，

-血压的测量结果，和

-选自由以下各项所组成的组中的至少一种、更优选至少两种或者甚 至至少三种（即，≥1、≥2、或≥3）生物标志物和/或参数：SEPP1的水 平的测量结果、ENG的水平的测量结果、BMI的测量结果、father_any_ihd 的得分、fh_pet的得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合 征的得分、bb_trig的值、HSPG2的水平的测量结果、MUC18的水平的测 量结果、SPINT1的水平的测量结果、ADAM12的水平的测量结果、LCAT 的水平的测量结果、ROBO4的水平的测量结果、ENPP2的水平的测量结 果和S100A9的水平的测量结果。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于预测 HDP或优选地预测PE，优选在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2 周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所述组包含IGFALS水 平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选地且优选地包含选自由 实施例6的表12中列出的那些标志物和参数所组成的组中的至少一种、 更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还更优选至少四种标志物和/ 或参数，为此表12的第2、3、4和5列（column）中的至少一列中给出 的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的组中存在）。该类 型的优选的≥3个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的 测量水平和血压的测量水平，和选自由表12列出的那些标志物和参数所 组成的组中的一种标志物或参数，为此表12中第2列给出的数值不是0 （即，标志物或参数在至少一个认为成功的3个成员的组中存在）；特别 优先选自由表12中列出的那些标志物和参数所组成的组中，为此由表12 的第2列中区域“组的数量”中的数除表12中第2列中列出的数值的结 果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的3 个成员的组中存在）。该类型的优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各 项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表12中列 出的那些标志物和参数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表12 中第3列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的4 个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种并且更优选至少两种所述标 志物和/或参数选自由表12中列出的那些标志物和参数所组成的组中，为 此由表12的第3列中区域“组的数量”中的数除表12中第3列中列出的 数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为 成功的4个成员的组中存在）。该类型的优选的≥5个成员的组可以包含或 由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由 表12列出的那些标志物和参数所组成的组的三种标志物和/或参数，为此 表12中第4列列出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功 的5个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种并且更优选至少两种并 且更优选至少三种所述标志物和/或参数选自由表12中列出的那些标志物 和参数所组成的组，为此由表12的第4列中区域“组的数量”中的数除 表12中第4列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物 或参数在至少20%的认为成功的5个成员的组中存在）。该类型的优选的 ≥6个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和 血压的测量结果，和选自由表12列出的那些标志物和参数所组成的组中 的四种标志物和/或参数，为此表12中第5列列出的数值不是0（即，标 志物或参数在至少一个认为成功的6个成员的组中存在）；特别优选其中 至少一种并且更优选至少两种并且更优选至少三种并且甚至更优选至少 四种所述标志物和/或参数选自由表12中列出的那些标志物和参数所组成 的组，为此由表12的第5列中区域“组的数量”中的数除表12中第5列 中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20% 的认为成功的6个成员的组中存在）。特别优选该类型的组可以包含或由 在示例性组12.1至12.4中任一个中包含的标志物和参数组成，如实施例6 所示。进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于使用 “rule-in”测试预测HDP或优选地预测PE，优选在妊娠20+/-约3周（优 选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所 述组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选地 且优选地包含选自由实施例6的表13中列出的那些标志物和参数所组成 的组中的至少一种、更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还更优选 至少四种标志物和/或参数，为此表13的第2、3、4和5列中的至少一列 中列出的数值不是0（即标志物或参数在至少一个认为成功的组中存在）。 该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平 的测量结果和血压的测量结果，和选自由表13中列出的那些标志物和参 数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表13中第3列给出的数值 不是0（即标志物或参数存在于至少一个认为成功的4个成员的组中）；特 别优选其中至少一种并且更优选至少两种所述标志物和/或参数选自由表 13中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表13的第3列中区域 “组的数量”中的数除表13中第3列中列出的数值的结果是0.20（20%） 或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的4个成员的组中存在）。 该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平 的测量结果和血压的测量结果，和选自由表13列出的那些标志物和参数 所组成的组中的三种标志物和/或参数，为此表13中第4列给出的数值不 是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的5个成员的组中存在）；特 别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优选至少三种所述标志物 和/或参数选自由表13中列出的那些标志物和参数所组成的组中，为此由 表13的第4列中区域“组的数量”中的数除表13中第4列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的5个成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表13 列出的那些标志物和参数所组成的组中的四种标志物和/或参数，为此表 13中第5列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的 6个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优 选至少三种并且甚至更优选至少四种所述标志物和/或参数选自由表13中 列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表13的第5列中区域“组 的数量”中的数除表13中第5列中列出的数值的结果是0.20（20%）或 更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的6个成员的组中存在）。 特别优选该类型的组可以包含或由在示例性组13.1至13.8中任一个中包 含的标志物和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于预测 HDP或优选地预测早产型PE，优选在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/- 约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所述组包含IGFALS 水平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选地且优选地包含选自 由实施例6的表14中列出的那些生物标志物和参数所组成的组中的至少 一种、更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还更优选至少四种标志 物和/或参数，为此表14的第2、3、4和5列中的至少一列中给出的数值 不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的组中存在）。该类型优选 的≥4个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果 和血压的测量结果，和选自由表14中列出的那些标志物和参数所组成的 组中的两种标志物和/或参数，为此表14中第3列给出的数值不是0（即， 标志物或参数在至少一个认为成功的4个成员的组中存在）；特别优选其 中至少一种和更优选至少两种所述标志物和/或参数选自由表14中列出的 那些标志物和参数所组成的组，为此由表14的第3列中区域“组的数量” 中的数除表14中第3列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即 标志物或参数存在于至少20%的认为成功的4个成员的组中）。该类型优 选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结 果和血压的测量结果，和选自由表14列出的那些标志物和参数所组成的 组中的三种标志物或参数，为此表13中第4列给出的数值不是0（即，标 志物或参数在至少一个认为成功的5个成员的组中存在）；特别优选其中 至少一种和更优选至少两种并且更优选至少三种所述标志物和/或参数选 自由表14中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表14的第4列 中区域“组的数量”中的数除表14中第4列中列出的数值的结果是0.20 （20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的5个成员的 组中存在）。该类型优选的≥6个成员的组可以包含或由以下各项组成： IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表14列出的那些标 志物和参数所组成的组中的四种标志物或参数，为此表14中第5列给出 的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的6个成员的组中 存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优选至少三种并 且甚至更优选至少四种所述标志物和/或参数选自由表14中列出的那些标 志物和参数所组成的组，为此由表14的第5列中区域“组的数量”中的 数除表14中第5列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标 志物或参数在至少20%的认为成功的6个成员的组中存在）。该类型特别 优选的组可以包含或由在示例性组14.1至14.3中任一个中包含的标志物 和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于使用 “rule-in”测试预测HDP或优选地测试早产型PE，优选在妊娠20+/-约3 周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周）， 所述组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选 地且优选地包含选自由实施例6的表15中列出的那些生物标志物和参数 所组成的组中的至少一种、更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还 更优选至少四种标志物和/或参数，为此表15的第2、3、4和5列中的至 少一列中给出的数值不是0（即标志物或参数存在于至少一个认为成功的 组中）。该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS 水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表15中列出的那些标志物 和参数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表15中第3列给出的 数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的4个成员的组中存 在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种所述标志物和/或参数选自 由表15中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表15的第3列中 区域“组的数量”中的数除表15中第3列中列出的数值的结果是0.20（20%） 或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的4个成员的组中存在）。 该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平 的测量结果和血压的测量结果，和选自由表15列出的那些标志物和参数 所组成的组的三种标志物或参数，为此表15中第4列给出的数值不是0 （即标志物或参数存在于至少一个认为成功的5个成员的组中）；特别优 选其中至少一种和更优选至少两种并且更优选至少三种所述标志物和/或 参数选自由表15中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表15的 第4列中区域“组的数量”中的数除表15中第4列中列出的数值的结果 是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的5个 成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成员的组可以包含或由以下各项组 成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表15列出的那 些标志物和参数所组成的组中的四种标志物或参数，为此表15中第5列 给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的6个成员的 组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优选至少三 种并且甚至更优选至少四种所述标志物和/或参数选自由表15中列出的那 些标志物和参数所组成的组，为此由表15的第5列中区域“组的数量” 中的数除表15中第5列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即， 标志物或参数在至少20%的认为成功的6个成员的组中存在）。该类型特 别优选的组可以包含或由在示例性组15.1至15.7中任一个中包含的标志 物和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于在非肥胖 的受试者中预测HDP或优选地预测PE，优选在妊娠20+/-约3周（优选 在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周），所述 组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选地且 优选地包含选自由实施例6的表16中列出的那些生物标志物和参数所组 成的组中的至少一种、更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还更优 选至少四种标志物和/或参数，为此表16的第2、3、4和5列中的至少一 列中给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的组中存 在）。该类型优选的≥3个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS 水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表16列出的那些标志物和 参数所组成的组中的一种标志物或参数，为此表16中第2列给出的数值 不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的3个成员的组中存在）； 特别优选选自由表16中列出的那些标志物和参数所组成的组中，为此由 表16的第2列中区域“组的数量”中的数除表16中第2列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的3个成员的组中存在）。该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表16 中列出的那些标志物和参数所组成的组的两种标志物和/或参数，为此表 16中第3列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的 4个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种所述标志 物和/或参数选自由表16中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由 表16的第3列中区域“组的数量”中的数除表16中第3列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的4个成员的组中存在）。该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表16 列出的那些标志物和参数所组成的组中的三种标志物或参数，为此表16 中第4列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的5 个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优 选至少三种所述标志物和/或参数选自由表15中列出的那些标志物和参数 所组成的组，为此由表14的第4列中区域“组的数量”中的数除表16中 第4列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在 至少20%的认为成功的5个成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成员 的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量 结果，和选自由表16列出的那些标志物和参数所组成的组的四种标志物 或参数，为此表16中第5列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少 一个认为成功的6个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选 至少两种并且更优选至少三种并且甚至更优选至少四种所述标志物和/或 参数选自由表16中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此通过表16 的第5列中区域“组的数量”中的数除表16中第5列中列出的数值的结 果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的6 个成员的组中存在）。该类型特别优选的组可以包含或由在示例性组16.1 至16.4中任一个中包含的标志物和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于使用 “rule-in”测试在非肥胖的受试者中预测HDP或优选地预测PE，优选在 妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更 优选在约20周），所述组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果， 并且进一步可选地且优选包含选自由实施例6的表17中列出的那些生物 标志物和参数所组成的组的至少一种、更优选至少两种、甚至更优选至少 三种并且还更优选至少四种标志物和/或参数，为此表17的第2、3、4和 5列中的至少一列中给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认 为成功的组中存在）。该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下各项 组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表17中列出 的那些标志物和参数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表17中 第3列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的4个 成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种所述标志物 和/或参数选自由表17中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表 17的第3列中区域“组的数量”中的数除表17中第3列中列出的数值的 结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的 4个成员的组中存在）。该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下各 项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表17列出 的那些标志物和参数所组成的组中的三种标志物或参数，为此表17中第4 列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的5个成员 的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优选至少 三种所述标志物和/或参数选自由表17中列出的那些标志物和参数所组成 的组，为此由表17的第4列中区域“组的数量”中的数除表17中第4列 中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20% 的认为成功的5个成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成员的组可以包 含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选 自由表17列出的那些标志物和参数所组成的组中的四种标志物或参数， 为此表17中第5列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为 成功的6个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种 并且更优选至少三种并且甚至更优选至少四种所述标志物和/或参数选自 由表17中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表17的第5列中 区域“组的数量”中的数除表17中第5列中列出的数值的结果是0.20（20%） 或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的6个成员的组中存在）。 该类型特别优选的组可以包含或由在示例性组17.1至17.8中任一个中包 含的标志物和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于在非肥胖 的受试者中预测HDP或优选地预测早产型PE，优选在妊娠20+/-约3周 （优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或更优选在约20周）， 所述组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，并且进一步可选 地且优选包含选自由实施例6的表18中列出的那些生物标志物和参数所 组成的组中的至少一种、更优选至少两种、甚至更优选至少三种并且还更 优选至少四种标志物和/或参数，为此表18的第2、3、4和5列中的至少 一列中给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的组中 存在）。该类型优选的≥3个成员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS 水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表18列出的那些标志物和 参数所组成的组中的一种标志物或参数，为此表18中第2列给出的数值 不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的3个成员的组中存在）； 特别优选选自由表18中列出的那些标志物和参数所组成的组中，为此由 表18的第2列中区域“组的数量”中的数除表18中第2列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的3个成员的组中存在）。该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表18 中列出的那些标志物和参数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表 18中第3列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的 4个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种所述标志 物和/或参数选自由表18中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由 表18的第3列中区域“组的数量”中的数除表18中第3列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的4个成员的组中存在）。该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表18 列出的那些标志物和参数所组成的组中的三种标志物或参数，为此表18 中第4列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的5 个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优 选至少三种所述标志物和/或参数选自由表15中列出的那些标志物和参数 所组成的组中，为此由表18的第4列中区域“组的数量”中的数除表18 中第4列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数 在至少20%的认为成功的5个成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成 员的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测 量结果，和选自由表18列出的那些标志物和参数所组成的组中的四种标 志物或参数，为此表18中第5列给出的数值不是0（即，标志物或参数在 至少一个认为成功的6个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更 优选至少两种并且更优选至少三种并且甚至更优选至少四种所述标志物 和/或参数选自由表18中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表 18的第5列中区域“组的数量”中的数除表18中第5列中列出的数值的 结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的 6个成员的组中存在）。特别优选该类型的组可以包含或由在示例性组18.1 至18.4中任一个中包含的标志物和参数组成，如实施例6所示。

进一步优选的实施方式提供测试组，特别适合但不限于用于在非肥胖 的受试者中使用“rule-in”测试预测HDP或优选地预测早产型PE，优选 在妊娠20+/-约3周（优选在妊娠20+/-约2周或更优选在20+/-约1周或 更优选在约20周），所述组包含IGFALS水平的测量结果和血压的测量结 果，并且进一步可选地且优选包含选自由实施例6的表19中列出的那些 生物标志物和参数所组成的组中的至少一种、更优选至少两种、甚至更优 选至少三种并且还更优选至少四种标志物和/或参数，为此表19的第2、3、 4和5列中的至少一列中给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一 个认为成功的组中存在）。该类型优选的≥4个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表19 中列出的那些标志物和参数所组成的组中的两种标志物和/或参数，为此表 19中第3列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的 4个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种所述标志 物和/或参数选自由表19中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由 表19的第3列中区域“组的数量”中的数除表19中第3列中列出的数值 的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功 的4个成员的组中存在）。该类型优选的≥5个成员的组可以包含或由以下 各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量结果，和选自由表19 列出的那些标志物和参数所组成的组中的三种标志物或参数，为此表19 中第4列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至少一个认为成功的5 个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优选至少两种并且更优 选至少三种所述标志物和/或参数选自由表15中列出的那些标志物和参数 所组成的组，为此由表19的第4列中区域“组的数量”中的数除表19中 第4列中列出的数值的结果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在 至少20%的认为成功的5个成员的组中存在）。该类型优选的≥6个成员 的组可以包含或由以下各项组成：IGFALS水平的测量结果和血压的测量 结果，和选自由表19列出的那些标志物和参数所组成的组中的四种标志 物或参数，为此表19中第5列给出的数值不是0（即，标志物或参数在至 少一个认为成功的6个成员的组中存在）；特别优选其中至少一种和更优 选至少两种并且更优选至少三种并且甚至更优选至少四种所述标志物和/ 或参数选自由表19中列出的那些标志物和参数所组成的组，为此由表19 的第5列中区域“组的数量”中的数除表19中第5列中列出的数值的结 果是0.20（20%）或更大（即，标志物或参数在至少20%的认为成功的6 个成员的组中存在）。该类型特别优选的组可以包含或由在示例性组19.1 至19.7中任一个中包含的标志物和参数组成，如实施例6所示。

本文中还提供了测试组的用途，测试组包含IGFALS水平的测量结 果、孕产妇历史参数fh_petxcardio的得分、血压的测量结果，并且可选地 且优选地进一步包含以下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至 少三项：SEPP1的水平的测量结果、s-内皮因子的水平的测量结果、QSOX1 的水平的测量结果、PRDX2的水平的测量结果、血糖水平的测量结果、 BMI的测量结果、father_any_ihd的得分、fh_pet的得分、bb_hdl的值、 bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、bb_trig的值、FLT4的水平 的测量结果、PRCP的水平的测量结果、PRDX1的水平的测量结果、LNPEP 的水平的测量结果、TNXB的水平的测量结果、HSPG2的水平的测量结果、 MUC18的水平的测量结果、GPLD1的水平的测量结果、COL6A3的水平 的测量结果、SPINT1的水平的测量结果、MST1的水平的测量结果、 GPR126的水平的测量结果、ICAM3的水平的测量结果、CRP的水平的测 量结果、ADAM12的水平的测量结果、LCAT的水平的测量结果、ROBO4 的水平的测量结果、ENPP2的水平的测量结果、和S100A9的水平的测量 结果；或者，优选地，进一步包含以下各项中的至少一种、更优选至少两 种或甚至至少三种：SEPP1水平、ENG水平、QSOX1水平、PRDX2水平、 FLT4水平、PRCP水平、PRDX1水平、LNPEP水平、TNXB水平、HSPG2 水平、MUC18/MCAM水平、GPLD1水平、COL6A3水平、SPINT1水 平、MST1水平、GPR126水平、ICAM3水平、CRP水平、血糖水平的测 量结果、BMI的测量结果、孕产妇历史参数father_any_ihd的得分和孕产 妇历史参数fh_pet的得分，用于诊断、预测、预后和/或监测HDP或PE， 优选用于预测HDP或PE，更优选用于预测PE。优选地，在该段落中详 述的这些用途中，测试组可以包含father_any_ihd的得分而不包含 fh_petxcardio的得分。

本文中还提供了测试组的用途，测试组包含IGFALS水平、 father_any_ihd得分、和血压测量结果，并且可选地且优选地进一步包含 以下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1水平、 ENG水平、BMI的测量结果、fh_pet的得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio 的值、代谢综合征的得分、HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、 ADAM12水平、LCAT水平、ROBO4水平、ENPP2水平和S100A9水平， 用于诊断、预测、预后和/或监测HDP或PE，优选用于预测HDP或PE， 更优选用于预测PE。

本文还提供了测试组的用途，测试组包含IGFALS水平和血压的测量 结果，并且可选地且优选地进一步包含以下各项中的至少一项、更优选至 少两项或者甚至至少三项：SEPP1水平、s-内皮因子水平的测量结果、 QSOX1水平的测量结果、PRDX2水平的测量结果、血糖水平的测量结果、 BMI的测量结果、father_any_ihd的得分、fh_pet的得分、bb_hdl的值、 bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、bb_trig的值、FLT4水平的 测量结果、PRCP水平的测量结果、PRDX1水平的测量结果、LNPEP水 平的测量结果、TNXB水平的测量结果、HSPG2水平的测量结果、MUC18 水平的测量结果、GPLD1水平的测量结果、COL6A3水平的测量结果、 SPINT1水平的测量结果、MST1水平的测量结果、GPR126水平的测量结 果、ICAM3水平的测量结果、CRP水平的测量结果、ADAM12水平的测 量结果、LCAT水平的测量结果、ROBO4水平的测量结果、ENPP2水平 的测量结果、和S100A9水平的测量结果；或者，优选地，进一步包含以 下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1水平、 ENG水平、BMI的测量结果、father_any_ihd的得分、fh_pet的得分、bb_hdl 的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、bb_trig的值、HSPG2 水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12水平、LCAT水平、ROBO4 水平、ENPP2水平和S100A9水平，用于诊断、预测、预后和/或监测HDP 或PE，优选用于预测HDP或PE，更优选用于预测PE。

特别提供任何一个上述测试组的用途，例如，特别但不限于本文中以 A、B、C、D、E、F、G、H、I或J表示的测试组中的任何一个，用于诊 断、预测、预后和/或监测HDP或PE，优选用于预测HDP或PE，更优选 用于预测PE，更优选其中所述组A、B、C、D、E、F、G、H、I或J包 含father_any_ihd的得分而不包含fh_petxcardio的得分。当可应用且需要 时，如上文解释的，可以在其各自优选的孕龄时如此应用或评价特定的试 验组。

本文还提供了用于在受试者中诊断、预测、预后和/或监测HDP或 PE，优选用于预测HDP或PE，更优选用于预测PE的方法，包括在所述 受试者中测试或评估测试组，其包含IGFALS水平的测量结果、孕产妇历 史参数fh_petxcardio得分、和血压的测量结果，并且可选地且优选地进一 步包含以下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1 的水平、s-内皮因子的水平的测量结果、QSOX1的水平的测量结果、PRDX2 的水平的测量结果、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、father_any_ihd 的得分、fh_pet的得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合 征的得分、bb_trig的值、FLT4的水平的测量结果、PRCP的水平的测量 结果、PRDX1的水平的测量结果、LNPEP的水平的测量结果、TNXB的 水平的测量结果、HSPG2的水平的测量结果、MUC18的水平的测量结果、 GPLD1的水平的测量结果、COL6A3的水平的测量结果、SPINT1的水平 的测量结果、MST1的水平的测量结果、GPR126的水平的测量结果、 ICAM3的水平的测量结果、CRP的水平的测量结果、ADAM12的水平的 测量结果、LCAT的水平的测量结果、ROBO4的水平的测量结果、ENPP2 的水平的测量结果、和S100A9的水平的测量结果；或者，优选地，进一 步包含以下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1 水平、ENG水平、QSOX1水平、PRDX2水平、FLT4水平、PRCP水平、 PRDX1水平、LNPEP水平、TNXB水平、HSPG2水平、MUC18/MCAM 水平、GPLD1水平、COL6A3水平、SPINT1水平、MST1水平、GPR126 水平、ICAM3水平、CRP水平、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、 孕产妇历史参数father_any_ihd的得分、和孕产妇历史参数fh_pet的得分。 优选地，在该段中详述的该种方法中，测试组可以包含father_any_ihd的 得分而不是fh_petxcardio的得分。

本文还提供了用于在受试者中诊断、预测、预后和/或监测，优选用 于预测HDP或优选PE的方法，包括在所述受试者中测试或评估测试组， 其包含IGFALS水平、孕产妇历史参数father_any_ihd得分、和血压的测 量结果，并且可选地且优选地进一步包含以下各项中的至少一项、更优选 至少两项或者甚至至少三项：SEPP1水平、ENG水平、BMI的测量结果、 fh_pet得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、 HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12水平、LCAT水平、 ROBO4水平、ENPP2水平和S100A9水平。

本文还提供了用于在受试者中诊断、预测、预后和/或监测，优选预 测HDP或优选PE的方法，包括在所述受试者中测试或评估测试组，其包 含IGFALS水平和血压的测量结果，并且可选地并优选地进一步包含以下 各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1的水平、 s-内皮因子的水平的测量结果、QSOX1的水平的测量结果、PRDX2的水 平的测量结果、血糖水平的测量结果、BMI的测量结果、father_any_ihd 的得分、fh_pet的得分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合 征的得分、bb_trig的值、FLT4的水平的测量结果、PRCP的水平的测量 结果、PRDX1的水平的测量结果、LNPEP的水平的测量结果、TNXB的 水平的测量结果、HSPG2的水平的测量结果、MUC18的水平的测量结果、 GPLD1的水平的测量结果、COL6A3的水平的测量结果、SPINT1的水平 的测量结果、MST1的水平的测量结果、GPR126的水平的测量结果、 ICAM3的水平的测量结果、CRP的水平的测量结果、ADAM12的水平的 测量结果、LCAT的水平的测量结果、ROBO4的水平的测量结果、ENPP2 的水平的测量结果、和S100A9的水平的测量结果；或者，优选地，进一 步包含以下各项中的至少一项、更优选至少两项或者甚至至少三项：SEPP1 水平、ENG水平、BMI的测量结果、father_any_ihd的得分、fh_pet的得 分、bb_hdl的值、bb_total_hdl_ratio的值、代谢综合征的得分、bb_trig的 值、HSPG2水平、MUC18水平、SPINT1水平、ADAM12水平、LCAT 水平、ROBO4水平、ENPP2水平和S100A9水平。

特别地提供了用于在受试者中诊断、预测、预后和/或监测HDP或 PE的方法，优选用于预测HDP或PE，更优选用于预测PE，包括在所述 受试者中测试或评估以上所述测试组中的任何一个，特别是诸如但不限于 本文中表示为A、B、C、D、E、F、G、H、I或J的测试组中的任何一个， 更优选其中所述组A、B、C、D、E、F、G、H、I或J包含father_any_ihd 的得分而不是fh_petxcardio的得分。当可以应用并且需要时，如上文解释 的，可以在其各自优选的孕龄时对试验组进行该方法。

为了在受试者测试或者评估测试组，本方法、并且尤其是其中从和/ 或关于受试者采集数据的该类方法的检查阶段，包括在来自受试者的样品 中测量包含在所述测试组中的生物标志物的水平（即数量、量）并且测量 或给包含在所述测试组中的参数评分。

因此，使用本文中教导的测试组用于在受试者中诊断、预测和/或预 后HDP或PE的方法可以包括以下步骤：（i）在来自受试者的样品测量 包含在所述测试组中的生物标志物的量，并且测量或对包含在受试者的所 述测试组中的参数评分；（ii）比较一种或多种生物标志物的量并且在（i） 中使用代表HDP或PE的已知诊断、预测和/或预后的参考值测量或评定 的参数的测量结果或得分；（iii）发现一种或多种生物标志物的量和/或在 （i）中测得的或评分的一种或多种参数的测量结果或得分与参考值的偏 差或无偏差；和（iv）将偏差或无偏差的所述发现归因于在受试者中HDP 或PE的特定的诊断、预测和/或预后。可以对受试者在两个以上连续的时 间点施行该方法，并且可以比较在所述连续时间点下各自的结果，借此确 定在所述连续时间点处在诊断、预测和/或预后HDP或PE之间存在或不 存在变化。当这样应用时，该方法可以在受试者中随着时间的推移监测 HDP或PE的诊断、预测和/或预后的变化。

例如，与表示预测或诊断无HDP或PE（即，健康状态）或表示对 HDP或PE良好预后的参考值相比，来自受试者的样品中的生物标志物的 量和受试者中参数的测量结果或得分的偏差可以分别表明该受试者具有 或处在患有HDP或PE的风险中，或者可以表明在受试者中对HDP或PE 的较差预后（如，例如，PE将恶化或进展到HELLP综合征或子痫的预后）。 在另一个实施例中，与表示无HDP或PE预测或诊断或表示对HDP或PE 良好预后的参考值不存在偏差可以分别表明受试者不具有或不处于患有 HDP或PE的风险中，或者可以表明在受试者中对HDP或PE的良好预后。 在又一个实施例中，与表示HDP或PE预测或诊断（即疾病状态）或表示 对HDP或PE较差预后的参考值的不存在偏差可以分别表明受试者具有或 处于患有HDP或PE的风险中，或者可以表明在受试者中对HDP或PE 的较差预后。

在妊娠和/或产后期间，生物标志物的量和参数的测量结果或得分可 以变化。为了提高本方法和应用的准确性，在检查的受试者中，将生物标 志物的量和在妊娠或产后的给定时间下测得的或评定的参数的测量结果 或得分优选地与在相同或基本相同的妊娠或产后的时间下建立的参考值 进行比较，例如在+/-约3周内，优选在+/-约2周内，更优选在+/-约1周 内，还更优选在+/-约0.5周内。

在用于监测的方法的一个实施方式中，使用如本文中教导的测试组用 于监测HDP或PE或用于监测发展的HDP或PE的可能性的方法包括以 下步骤：（i）在两个或多个连续的时间点处在受试者中，在来自受试者的 样品中测量包含在所述测试组中的一种或多种生物标志物的量，并且测量 或对包含在所述测试组中的参数评分；（ii）比较在两个或多个连续的时间 点下在（i）中测量或评定的一种或多种生物标志物的量和一种或多种参数 的测量结果或得分；（iii）发现在所述两个或多个连续的时间点之间在（i） 中测量或评定的一种或多种生物标志物的量和/或一种或多种参数的测量 结果或得分的偏差；（iv）将偏差或无偏差的所述发现归因于所述两个或多 个连续的时间点之间在受试者中HDP或PE的改变、发展的HDP或PE 的可能性的改变。

还披露了使用本文中教导的测试组来确定受试者是否（如，例如，仍 然或不再）需要治疗性或预防性（预防性）治疗HDP或PE的方法，该方 法包括：（i）在受试者中，在来自受试者的样品中测量包含在所述测试组 中的一种或多种生物标志物的量，并且测量或对包含在所述测试组中的一 种或多种参数评分；（ii）将在（i）中测量或评定的一种或多种生物标志 物的量和一种或多种参数的测量结果或得分与代表HDP或PE的已知的诊 断、预测和/或预后的参考值比较；（iii）发现在（i）中的一种或多种生物 标志物的量和/或测量或评定的一种或多种参数的测量结果或得分与参考 值的偏差；（iv）从所述发现中推断存在或不存在治疗性或预防性治疗 HDP或PE的需要。

当该方法能够得出结论：受试者具有或处于患有HDP或PE的风险 或具有对HDP或PE的较差预后时，可以特别指定治疗。例如，入院时或 在留在医疗保健中心期间的患有HDP或PE的患者可以如本文教导的测试 以判断继续治疗所述HDP或PE的必要性，并且当不再需要或仅在给定的 有限程度上需要这样的治疗时，则可以出院。

HDP或PE的示例性治疗性和预防性治疗尤其包括抗高血压治疗（尤 其使用β-阻滞剂、钙通道阻滞剂、血管舒张剂和/或DOPA脱羧酶抑制剂， 如，例如甲基多巴、拉贝洛尔、醋丁洛尔、美托洛尔、吲哚洛尔、普萘洛 尔、硝苯地平、伊拉地平和/或肼屈嗪、MgSO₄治疗和/或阿司匹林（参见， 例如Bujold et al.,Obstet Gynecol2010,vol.116,402-14）、流产、和如通过 引产（labour induction）或剖腹产的分娩。

对于已知或预期处于发展HDP或PE的风险中，例如，具有HDP或 PE的一种或多种风险因素的受试者，本文中披露的实验组、方法和用途 风险是特别有用的。在没有限制的情况下，与HDP并优选PE有关的风险 因素包括未经产、多次妊娠、妊娠之间延长的时间间隔、在以前的妊娠中 HDP或PE的历史或者HDP或PE的家族史、极端的年龄（<20岁和>40 岁）、肥胖、慢性高血压、慢性肾病、偏头痛、头痛、（妊娠性）糖尿病、 多囊卵巢综合征、自身免疫病如狼疮、类风湿性关节炎、结节病或MS、 血管或结缔组织疾病、维生素D缺乏、抗磷脂抗体综合征或遗传性易栓症、 以前的伴侣患有HDP或PE的男性伴侣、胎儿水肿和不明原因的胎儿宫内 生长受限。

在一个实施方式中，在受试者中，本测试组、方法和用途可以与存在 或不存在和/或一个或多个HDP或PE的风险因素的水平的测定补充或结 合。

在一般临床实践中，认为肥胖的受试者（在妊娠前或在前三个月BMI ≥30）处于许多妊娠并发症的风险中，包括如妊娠性糖尿病、先兆子痫等， 并且从而需经增加的产前护理（NHS National Institute for Health and  Clinical Excellence(NICE)clinical guideline62:Antenatal Care-Routine  Care for the Healthy Pregnant woman,March2008）。因此，在某些优选实施 方式中，提供组并且组可以在非肥胖的受试者（BMI<30），更尤其是未生 育过的非肥胖的女性中使用。

任何一个本文中教导的测试组、方法或用途可以优选地使得敏感性和 /或特异性（优选地，敏感性和特异性）为至少50%、至少60%、至少70% 或至少80%，例如，≥85%或≥90%或≥95%，例如，约80%至100%之间 或约85%至95%之间。

在整个本说明书中提及“疾病和/或病症”涵盖如本文披露的任何这 样的疾病和病症，只要符合特定详述的上下文，更具体但非限制性地包括 妊娠性高血压疾病（HDP）并优选先兆子痫（PE）。

本测试组、方法和用途可以用于还没有被诊断为患有上述疾病和病症 （例如，预防性筛查）的受试者，或已经被诊断为患有该种疾病和病症的 受试者，或被怀疑患有该种疾病和病症（例如，显示一种或多种特征性体 征和/或症状）的受试者，或具有发展该种疾病和病症的风险（例如，遗传 易感性；存在一种或多种发展、环境或行为风险因子）的受试者。该测试 组、方法和用途还可以用来检测疾病和病症的进展的不同阶段或严重性。 该测试组、方法和用途还可以用来检测该疾病和病症对预防性或治疗性治 疗或其它干预措施的响应。该测试组、方法和用途可以进一步用来帮助医 生基于受试者的疾病和病症的恶化、维持现状、部分恢复、或完全恢复， 来决定进一步治疗或观察或患者从医疗保健中心出院。此外，本文教导的 该测试组、方法和用途可以用于群体筛查，如，例如，一般群体的筛查或 基于一个或多个标准例如，年龄、血统、职业、各个疾病和病症的风险因 素的存在或不存在等划分的群体的筛查。

本测试组、方法和用途还可以受益于与各种疾病和病症有关的一种或 多种其它生物标志物和/或临床参数的评估的进一步补充或结合。

通过实例而非限制的方式，对在评价HDP或PE中有用的其它生物 标志物包括：可溶性fms样酪氨酸激酶-1（sFlt-1，sVEGFR-1）（Maynard et  al.2003,J Clin Invest111(5):649-58）、胎盘生长因子（PIGF）和血管内皮 生长因子（VEGF）（Polliotti et al.2003;Obstet Gynecol101:1266-74）和 Proteogenix Inc.的WO2009/097584A1和属于Auckland Uniservices Ltd.的 WO2009/108073A1中披露的生物标志物，其通过引用结合与此。

用于妊娠女性受试者的其它有用的临床参数可以包括但不限于年龄、 种族、吸烟状态（特别是在15周访视时）、饮酒（特别是在前三个月）、 出生体重、阴道出血的出现率（特别是对在15周访视之前超过5天）（是 /否）等。

可以分开独立地评价本实验组中一种或多种生物标志物和一种或多 种参数的各自的数量、测量结果或得分，即，各自与其相应的参考值对比。 更有利地，对于一种或多种生物标志物和一种或多种参数的数量、测量结 果或得分可以用来建立生物标志物-和-参数曲线，该曲线可以与相应的多 参数参考值适当地对比。在又一个可替代的方案中，可以通过适当的权重 因子（weighing factor）调节一种或多种生物标志物和参数的数量、测量 结果或得分并加和以产生一个单一值，随后可以将该单一值与从而得到的 相应的参考值适当地对比。应当理解的是这种权重因子可能取决于用于量 化生物标志物和测量结果或参数评分的方法学，并且对于特定的实验装置 可以是确定的，并且包含在适用于诊断、预测和/或预后如本文中教导的疾 病和病症的模型中。可以使用多种方法，如载体向量机（support vector  machine）、贝叶斯分类器、逻辑回归等用于建立该类模型（Cruz et al. Applications of Machine Learning in Cancer Prediction and Prognosis.Cancer  Informatics2007;2;59-77）。

根据包含生物标志物和/或临床参数的其它实验组之前采用的已知的 步骤可以建立本文中使用的参考值。可以亦或在如本文中教导的方法和用 途之内（即组成步骤）亦或之外（即没有组成步骤）可以建立参考值。因 此，本文中教导的任何一种方法或用途都可能包括建立必要的参考值的步 骤。

因此，还提供了用于建立如本文中教导的测试组的参考值的方法，所 述参考值代表：

(a)预测或诊断不存在本文中教导的疾病或病症或它们的良好预后， 或者

(b)预测或诊断本文中教导的疾病或病症或它们的较差预后，

包括：

（i）在来自以下受试者的样品中测量包含在所述测试组中的一种或 多种生物标志物的量，并且在以下受试者中测量或对包含在所述测试组中 的参数评分：

（ia）没有患有相应疾病或病症的或没有处于患有该类疾病或病 症的风险中的或对该类疾病或病症具有良好预后的一个或多个受 试者，或

（ib）患有相应疾病或病症的或处于患有该类疾病或病症的风险 中的或对该类疾病或病症具有较差预后的一个或多个受试者，和

（iia）从如在（ia）中测量的一种或多种生物标志物的量和参数的测 量结果或得分建立代表预测或诊断不存在相应疾病或病症或由此代表良 好预后的参考值，或

（iib）由生物标志物的量和在（ib）中测量的参数的测量结果或得分 建立表示相应疾病或病症的预测或诊断或由此表示较差预后的参考值。

进一步提供了用于在受试者中建立用于本文教导的测试组的基线参 考值的方法，包括：（i）在来自受试者的样品中测量包含在所述测试组中 的一个或多个生物标志物的量，并且当受试者未患有本文中教导的疾病或 病症时，在一个或多个时间点，在受试者中测量或对包含在所述测试组中 的参数评分，和（ii）将如在（i）中测量的一种或多种生物标志物的量和 一种或多种参数的测量结果或得分建立为受试者的范围或平均参考值，其 是所述受试者的基线参考值。

可以通过如本领域中已知的任何合适的技术测量一种或多种生物标 志物的量。

例如，可以采用能够特异性结合到相应的生物标志物的结合剂 （binding agents）。结合剂尤其可以是抗体、适体、光适体、蛋白质、肽、 拟肽（peptidomimetic）或小分子。例如，可以采用免疫检测技术或质谱分 析法或色谱法、或所述方法的组合。

进一步披露了试剂盒，特别是用于在受试者中诊断、预测、预后和/ 或监测如本文中教导的疾病或病症的试剂盒，试剂盒包括（i）用于测量包 含在如本文中教导的测试组中的一种或多种生物标志物的装置，特别是在 来自受试者的样品中，（ii）可选地用于测量或对包含在测试组中的一个或 多个参数评分的装置（然而，可以使用与试剂盒不同的装置独立地测量所 述一个或多个参数），特别是在受试者中，和（iii）可选地并优选地用于 测试组的参考值或用于建立所述参考值的装置，其中所述参考值代表各种 疾病或病症的已知的诊断、预测和/或预后。

在本试剂盒中用于测量一种或多种生物标志物的量的装置可以分别 包括能够特异性结合到所述一种或多种生物标志物的一种或多种结合剂。 结合剂特别可以是抗体、适体、光适体、蛋白质、肽、拟肽分子或小分子。 可以将结合剂方便地固定在固相或载体上。本试剂盒可以采用免疫检测技 术或质谱分析技术或色谱技术、或所述技术的组合。

因此还披露了试剂盒，特别是用于在受试者中诊断、预测、预后和/ 或监测本文中教导的疾病或病症的试剂盒，试剂盒包括：（i）能够特异性 结合到包含在本文中教导的测试组中的一种或多种生物标志物的一种或 多种结合剂，特别是在来自受试者的样品中，（ii）优选地，所述一种或多 种生物标志物的已知的量或浓度（例如，用于用作对照、标准物和/或校准 物），（iii）可选地用于测量或对包含在测试组中的参数评分的装置，尤其 是在受试者中（然而，可以使用与试剂盒不同的装置独立地确定所述参 数），（iv）可选地并优选地用于测试组的参考值或用于建立所述参考值的 装置，其中，所述参考值表示相应疾病或病症的已知的诊断、预测和/或预 后。如该说明书的其它地方教导的可以适当地标记在（i）和/或（ii）下的 所述组成。

进一步披露了本文中描述的任何一种试剂盒用于诊断、预测、预后和 /或监测本文中教导的疾病或病症的用途。

还披露了可用于测量包含在本文中教导的测试组中的一种或多种生 物标志物的试剂和工具。因此，披露了包括包含在在本文中教导的测试组 中的生物标志物的蛋白质、多肽或肽阵列或微阵列。还披露了包含能够特 异性结合至包含在本文中教导的测试组中的生物标志物的一种或多种结 合剂的结合剂阵列（binding agent array）或微阵列，优选已知量的或浓度 的所述结合剂。

还披露了构造为便携式设备，如，例如，床边（Bed-side）设备的如 上文教导的试剂盒，用于在家里或临床环境中使用。

因而相关方面提供了在来自受试者的样品中能够测量包含在如本文 教导的测试组中的生物标志物的量的便携式测量设备，包括（i）用于从受 试者中获得样品的装置，（ii）用于在所述样品中测量包含在测试组中的一 种或多种生物标志物的量的装置，和（iii）用于将样品中所述一种或多种 生物标志物的量可视化的装置。测试设备可以可选地进一步包括（iv）用 于在受试者中测量或对包含在测试组中的参数评分的装置（然而，可以使 用与该试剂盒不同的装置独立地确定所述参数），和/或（v）用于可视化受 试者中所述参数的测量结果或得分的装置。在一个实施方式中，部分（ii） 和（iii）的装置可以是相同的。在一个实施方式中，部分（iii）和（v）的 装置可以是相同的。

在一个实施方式中，所述可视化装置能够指示受试者中一种或多种生 物标志物的量和一种或多种参数的测量结果或得分是否偏离本文中教导 的某一参考值或基线值。因此，便携式测试设备还可以适当地包括所述参 考值或基线值或用于建立其的装置。

在以下部分和所附权利要求中描述了本发明的以上和进一步的方面 和优选实施方式。将所附权利要求的主题由此具体地并入本说明书中。

附图说明

图1示出了在全部的、非肥胖的、和肥胖的受试者中先兆子痫计算的 PPV-阈值曲线的示例性曲线，其基于在这些人口中之前所报导的发病率， 分别为5.3%、4.3%和10.3%（BMJ2011,vol.342,d1875，上文）。

具体实施方式

除非上下另外明确指出，否则本文中所使用的“一个”、“一种”、和 “该”的单数形式包括单数和复数指称。

本文中所使用的术语“包含”、“包括”和“由…..组成”与“包括”、 或“含有”是同义的，并且是包容性的或开放式的并且并不排除另外的、 未列举的成员、要素或方法步骤。该术语还涵盖“由…..组成”和“基本 上由…..组成”。

由端点列举的数值范围包括在相应范围内的全部数和分数、和列举的 端点。

当提及可测量值如参数、量、持续时间等时，本文中所使用的术语“约” 是指包括给定值的变化和从给定值开始的变化，尤其是+/-10%或更小，优 选+/-5%或更小，更优选+/-1%或更小，和还更优选+/-0.1%或更小的给定值 的变化和从给定值开始的变化，只要在所披露的发明中这样的变化适合于 进行。应当理解的是，还特别并优选地披露了修饰语“约”指的数值本身。

而术语“一个或多个”，如一组成员中的一个或多个成员，是本身明 确的，通过进一步列举，该术语特别包括提及所述成员的任何一个，或所 述成员的任何两个或更多个，如，例如，所述成员任何的≥3、≥4、≥5、 ≥6或≥7等，并且上达至全部的所述成员。

在本说明书中引用的全部文献通过引用将其全部内容并入本文。

除非另有规定，否则在披露本发明时所使用的全部术语，包括技术和 科学术语，具有由本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。通过 进一步的指导，可以包括术语定义以更好地理解本发明的教导。

发明人确定了包含在诊断、预后、预测和/或监测妊娠性高血压疾病 （HDP）、并且尤其是先兆子痫（PE）中有用的生物标志物和临床参数的 测试组。

本文中使用的术语“组”或“测试组”广泛地指生物标志物和/或参 数的组合、集合或组，特别是当在受试者中测试或评价这样的组的情况下， 组是关于受试者的状况、疾病或病症的预测性的和/或提供信息的。在没有 限制的情况下，本文中预期的组可以包含或由3至10种之间的，优选地4 至8种之间的，更优选5或6种生物标志物和参数组成。

在本领域中术语“生物标志物”是普遍的并且可以广泛地表示生物分 子和/或其可检测部分，相对于受试者的表型和/或基因型的一个或多个方 面，如，例如，相对于受试者关于给定疾病或病症的状态，在受试者中它 的定性和/或定量评估，单独地或与其它数据结合，是预测或信息性的（例 如，预测、诊断和/或预后性的）。特别地，如本文中预期的生物标志物可 以是基于代谢物、RNA（特别是mRNA）、肽、多肽和/或蛋白质的，优选 基于肽、多肽和/或蛋白质的。

在本领域中术语“参数”或“临床参数”是广泛的，并且可以广泛地 表示与从可以与受试者的疾病或病症有关的临床环境中得到的与受试者 有关的信息。特别地，参数可以包括非样品和/或非分析物信息。通过说明 的方法，医疗实践中常见的临床参数可以特别包括受试者的基本特征，如， 例如年龄、性别、体重、身高、BMI、体型、种族；生物物理学的参数（例 如舒张压、收缩压、心率）；图像信息（例如MRI）；既往病史（例如受试 者或其亲戚的医学史）；环境因素等。

本文中预期的，血压的测量结果可以指任何相关的血压参数，如但不 限于第一次测量或第二次测量、舒张压、收缩压和/或平均动脉压。对于 15+/-2或1周，优选可以在测试组中从第二次测量血压（此后为 “1st_vst_map_2nd”）计算15周访视时的平均动脉压。对于20/-2或1周， 优选可以在测试组中从第一次测量血压（此后为“2nd_vst_map_1st”）计 算20周访视时的平均动脉压。此外，血压测量结果可以包括参数 “1st_vst_dbp_2nd”，即，在15周访视时从第二次测量中得到的舒张压, “1st_vst_sbp_2nd”，即，在15周访视时从第二次测量中得到的收缩压和/ 或“2nd_vst_map_2nd”，即，在20周访视时从第二次测量血压中计算得 到的平均动脉压。任何一个或多个血压参数1st_vst_dbp_2nd、 1st_vst_sbp_2nd、1st_vst_map_2nd、和2nd_vst_map_2nd的测量结果在与 实验部分中表4至11中示例的这些有关的组中特别有用。

妊娠性高血疾病（HDP）包括在妊娠期间和/或产后（例如，上达至 产后12周）与高血压有关的疾病和病症的不同种类的集合。

HDP可以方便地分类如下：

I.由妊娠诱导的高血压

a.没有蛋白尿或（全身性）水肿

b.有蛋白尿或（全身性）水肿（即，先兆子痫）

i.轻度

ii.重度

c.子痫

II.同步高血压（慢性高血压）

III.妊娠合并高血压（妊娠加重高血压）

a.并发先兆子痫

b.并发子痫

最近的研究可以不再将PE分类为轻度或严重的，而是可以基于妊娠 时间来确定PE组，优选地：a.早发型（即，临床表现<妊娠34周）；b.早 产型（即，临床表现<妊娠37周，如，例如妊娠>34周并<37周）；c.临产 型（即，临床表现≥妊娠37周）。

如果孕产妇或胎儿症状、体征或测试结果有必要这样，可以另外将 HPD分为预先存在的或妊娠的，可选地向任何类型添加“具有先兆子痫”。

可以方便地将妊娠性非蛋白尿高血压定义为在两个分开的相隔4小 时以上的场合，例如，相隔约4小时至约168小时测得的收缩压BP≥140 mmHg和/或舒张压BP≥90mmHg的血压。当在妊娠前测得或在妊娠20周 前测得高血压时，其可以通常表示这样的高血压为慢性高血压。当妊娠20 周以后在先前血压正常的妇女中测得高血压时，可以表示这样的高血压为 妊娠引起的高血压。通常，妊娠引起的高血压将在产后12周内消退。当 测得至少140/90mmHg的血压但并不持续6小时以上时，可以表示这样 的高血压为短暂性高血压。

妊娠性蛋白尿高血压可以如在前面段落中加以定义的，进一步伴随有 在24小时尿液采集的≥300mg的总蛋白。

HDP还涵盖本领域中通常表示为妊娠高血压、轻度先兆子痫、妊娠 引起的高血压、妊娠特异性高血压、妊娠性毒血症等的疾病和病症。

在本领域中术语“孕龄”、“妊娠龄”和类似术语是普遍的并且通常表 示如从女性的最后一次月经期的第1天的以周数测得的时间。正常妊娠的 人类妊娠是在约38至42周之间，优选约40周。

“先兆子痫（preeclampsia）”（PE或先兆子痫（pre-eclampsia））通常 表示妊娠相关的疾病或病症，其特征为伴随蛋白尿或水肿或两者均有的高 血压。PE还可以伴随肾小球机能失调、脑水肿、肝水肿、凝血功能异常 和/或其它并发症。

PE可以方便地定义为以下体征和症状的一些组合：

（1）在妊娠20周以后，收缩压（BP）≥140mmHg和/或舒张压BP≥90 mmHg（通常在相隔4小时以上的两个场合测得，例如，相隔约4 至约168小时），

（2）在妊娠20周以后，新发作蛋白尿（1+，通过基于尿分析法的纤 维素试纸，在24小时尿液采集的≥300mg的蛋白，或具有≥0.3的蛋 白/肌酸酐比值单随机尿样），和

（3）到产后12周时高血压和蛋白尿的消退，

例如特别是高血压和蛋白尿的组合。

可以方便地将严重PE定义为：

（1）收缩压BP≥160mmHg或舒张压BP≥110mmHg（通常在相隔4 小时以上的两个场合测得，例如，相隔约4至约168小时）或

（2）蛋白尿，其为在24小时的尿样采关注≥3.5g的测量结果或由纤 维素试纸的具有至少3+蛋白的两个随机尿试样。

在PE中，高血压和蛋白尿通常在彼此的7天内发生。在严重PE中， 重度高血压、重度蛋白尿或HELLP综合征（溶血、升高的肝酶、低血小 板）或子痫可以同时发生或每次仅一种症状。

偶然地，严重的PE可以导致癫痫的发展，即，导致子痫。子痫还可 以包括对许多器官或组织如肝脏（例如，肝细胞损害、门静脉周性坏死） 和中枢神经系统（例如，脑水肿和脑出血）的功能障碍或损害。

因此，HDP还包括在本领域中通常表示为PE的疾病和病症，尤其包 括轻度PE、重度PE和伴随其它并发症的PE、子痫和HELLP综合征。

术语“早产型先兆子痫”特别表示在妊娠37周前（<37周）保证婴 儿分娩的先兆子痫。

在医疗和临床实践中术语“预测中”或“预测”、“诊断中”或“诊断” 和“预测”或“预后”是频繁出现的并且很好理解。应当理解的是，短语 对特定疾病或病症的“用于诊断、预测和/或预后的方法”还可以与短语如 用于所述疾病或病症的“诊断中、预测中和/或预后中的方法”或对所述疾 病或病症“进行（或确定或建立）诊断、预测和/或预后的方法”等互换。

借助于进一步的解释并且是无限制地，“预测中”或"预测"通常是指 在（还）未患有所述疾病或病症的受试者中事先声明、指示或预言疾病或 病症。例如，在受试者中预测疾病或病症可以表明例如在一定的时间内或 到一定年龄时受试者将发展所述疾病或病症的可能性、机率或风险。所述 可能性、机率或风险可以特别表示为绝对值、范围或统计数据，或可以相 对于适当的对照受试者或受试者群体（如，例如，相对于一般、正常或健 康的受试者或受试者群体）来表示。因此，受试者将发展疾病或病症的可 能性、机率或风险可以有利地表示为相对于适当的对照受试者或受试者群 体的增加或降低，或表示为成倍增加或成倍降低。在本文中所使用的，术 语在受试者中“预测”如本文教导的病症或疾病还可以特别指，受试者具 有这样的疾病或病症的‘阳性’预测，即，受试者具有患有这样的疾病或病 症的风险（例如，与对照受试者或受试者群体相比，风险显著增加）。如 本文描述的，术语在受试者中“预测没有”如本文教导的疾病或病症可以 特别指，受试者具有上述疾病或病症的'阴性'预测，即，相对于对照受试 者或受试者群体，受试者患有上述疾病或病症的风险并没有显著增加。

在某些优选实施方式中，在本发明的上下文中，可以采取“rule-in” 测试的形式预测HDP特别是PE，借此采用可以充分预测HDP的、优选 预测PE而不识别太多假阳性的组。因此，将测试设计成对于将患者划入 某一治疗方案或高危人群具有最大敏感性。在特别优选的实施方式中，本 文中使用的组可以提供高于或等于0.2（即20%）的阳性预测值（PPV）。 临床上认为这样的PPV值为低发病率的疾病，如HDP，特别是PE。

术语“诊断中”或“诊断”通常是指基于症状和体征和/或根据各种 诊断程序的结果（如，例如，根据一种或多种已知已诊断的疾病或病症的 特征性的生物标志物的存在、不存在和/或量）在受试者中对受试者的疾病 或病症识别、确定或下结论的过程或行为。如本文中所使用的，在受试者 中，“诊断”如本文教导的疾病或病症可以特别指受试者具有这样的疾病 或病症，因此，被诊断为患有该疾病或病症。在受试者中，“诊断没有” 如本文教导的疾病或病症的可以特别指受试者不患有该种疾病或病症，因 此，被诊断为不患有该种疾病或病症。尽管显示表明这样的疾病或病症的 一种或多种常规症状或体征，受试者也可以被诊断为不患有该种疾病或病 症。

术语“预测”（"prognosticating"）或“预后”通常是指对疾病或病症 的进展和恢复前景（例如，可能性、持续时间、和/或程度）的预期。本文 教导的疾病或病症的良好预后可以通常涵盖从疾病或病症的满意的部分 或完全恢复的预期，优选在特定的时间段内。这种良好预后可以更加通常 地涵盖上述疾病或病症的不进一步恶化或加重的预期，优选在特定的时间 段内。本文教导的疾病或病症的较差预后可以通常涵盖该类疾病或病症的 低于标准的恢复和/或不满意的缓慢恢复、或基本上没有恢复或甚至进一步 恶化的预期。

因此，预测或预后疾病或病症可以特别地使得能够预测或预后疾病或 病症发生，或能够预测或预后疾病或病症的进展、恶化、缓解或复发或对 治疗或其它外部或内在因素、情况或应激物的响应等。

此外，监测疾病或病症可以特别地使得能够预测疾病或病症发生、或 能够监测疾病或病症的进展、恶化、缓解或复发、或对治疗或其它外部或 内部因素、情况或应激物的响应，等。有利地，可以在受试者的医疗过程 中应用监测，优选针对缓解这样监测的疾病或病症的医疗。可以在例如决 策中包括这样的监测：患者是否可以出院，是否需要改变治疗或需要进一 步住院治疗。如本文中所预期的，提及监测疾病或病症也具体地包括监测 受试者发展疾病或病症的可能性、风险或机率，即，随着时间的推移监测 在所述可能性、风险或机率中的一种或多种变化。

本文中使用的术语“受试者”或“患者”通常是指人类，但也可以是 指非人动物，优选温血动物，更优选胎生动物，甚至更优选哺乳动物，如， 例如，非人灵长类、啮齿动物、犬科动物、猫科动物、马科动物、绵羊、 猪等。特别意指的是指女性受试者，更特别地是怀孕的或产后女性受试者。 在从妊娠的任何时期（如从妊娠约5周开始或从约8周开始）并且直到产 后约12周（如，直到产后约6周或约3周）都可以进行本测试组、方法 和应用，并且优选在怀孕约10周至约24周之间。

本文中使用的术语“样品”或“生物样品”包括从受试者获得的任何 生物样本。样品可以包括但不限于：全血、血浆、血清、红细胞、白细胞 （例如，外周血单核细胞）、唾液、尿、排泄物（即，粪便）、眼泪、汗液、 脂肪、乳头抽吸物、导管灌洗物、肿瘤渗出物、滑液、脑脊液、淋巴液、 细针抽吸物、羊水、任何其它体液、剪下的指甲、细胞裂解液、细胞分泌 产物、炎症液、阴道分泌物、或活检如优选胎盘活检。优选的样品可以包 括那些包含可检测量的如本文教导的任何一种或多种标志物的样品。在优 选实施方式中，样品可以是全血或其部分成分如，例如，血浆、血清、或 细胞沉淀物。优选地可以容易地通过微侵入方法来获得样品，使得能够从 受试者移除或分离所述样品。样品还可以包括组织样品和活检、组织匀浆 液等。

优选地，样品是血浆。术语“血浆”通常表示血液的基本上无色的水 样液体，其不包含细胞，但血细胞（红细胞、白细胞、凝血细胞等）通常 悬浮其中，包含营养物、糖类、蛋白质、矿物质、酶等。另外优选地，所 述样品可以是尿。

在另一个优选实施方式中，样品可以是胎盘活检，其可以在妊娠期间 利用对妊娠没有或几乎没有组成风险的已知技术来获得，或者在流产或分 娩的情况下在完成流产或分娩后获得，例如，用于病理或诊断的目的或用 于获取关于在所述受试者的未来妊娠中发生HDP如PE的风险的信息。

当在样品中检测或确定所述分子或分析物的所述组的所述分子或分 析物的存在或不存在和/或量时，在样品中“测量”分子或分析物如代谢物、 核酸、RNA、DNA或cDNA、蛋白质、多肽或肽，优选基本上排除其它 分子和分析物，优选基本上排除其它分子和分析物。例如，可以通过测量 编码其的mRNA，或通过测量编码的蛋白或多肽或它们的肽测量生物标志 物。例如，可以通过标准实验室测试测量代谢物（例如，血糖）。例如， 可以通过标准实验室测试测量化学元素或化合物（例如，硒元素）（例如， 如在Rayman et al.2003,Am J Obstet Gynecol189:1343中教导的）。

当对于或在受试者中检测或确定所述参数的存在或不存在和/或量 时，对于或在受试者中“评定了”或“测定了”参数。例如，使用标准测 试和装置可以测量生物物理学参数（例如，血压）。例如，通过回顾相关 的医疗记录或优选通过在检查时询问受试者相关的问题并获得如“是”或 “否”（或潜在地“未知”）陈述的答案可以获得既往参数（例如，孕产妇 历史参数如fh_petxcardio、father_any_ihd、和fh_pet）。

在本领域中，术语“数量”、“量”和“水平”是同义的并且通常很好 理解。关于分子或分析物，该术语可以特别指样品中分子或分析物的绝对 量，或指样品中分子或分析物的相对量，即，相对于另一个值，如相对本 文中教导的参考值，或指表明生物标志物的基线表达的数值的范围。可以 从单个患者或患者组中获得这些数值或范围。

样品中分子或分析物的绝对量可以方便地表示为重量或表示为摩尔 量，或更通常地表示为浓度，例如，重量/体积或摩尔/体积。

样品中分子或分析物的相对量可以方便地表示为相对于所述另一个 值，如相对于如本文教导的参考值的增加或减少或表示为成倍增加或成倍 减少。在第一变量和第二变量（例如，第一量和第二量）之间进行相对比 较可以但不需要首先确定所述第一变量和第二变量的绝对值。例如，测量 方法可以产生用于所述第一和第二变量的可量化的读数（如，例如，信号 强度），其中所述读数是所述变量的值的函数，并且其中可以直接比较所 述读数以产生用于第一变量与第二变量的相对值，而实际上不需要首先将 读数转换成相应变量的绝对值。

如在本文中所使用的，提及任何一种生物标志物、核酸、肽、多肽或 蛋白质对应于在本领域中在相应名称下通常公知的标志物、核酸、肽、多 肽或蛋白质。上述术语包括在其中发现的任何生物体的该标志物、核酸、 蛋白质和多肽，和上述生物体尤其为动物，优选温血动物，更优选脊椎动 物，还更优选哺乳动物，包括人类和非人哺乳动物，仍然更优选人类。上 述术语特别包括具有天然序列的该类标志物、核酸、蛋白质和多肽，即， 其基本序列相同于在自然界中发现的或源于自然界的标志物、核酸、蛋白 质和多肽的基本序列。技术人员知道，由于物种之间的遗传趋异，不同物 种之间的天然序列可以不同。此外，由于在特定物种内的正常的遗传多样 性（变异），在相同物种的不同个体之间或甚至之内，天然序列可以不同。 此外，由于转录后或翻译后修饰，在相同物种的不同个体之间或甚至之内， 天然序列可以不同。在本文中意指标志物、核酸、蛋白质和多肽的任何这 样的变体或同种型。因此，在自然界中发现的或源于自然界的标志物、核 酸、蛋白质和多肽的全部序列被认为是“天然的”。当形成部分活生物体、 器官、组织或细胞时，当形成部分生物样品时，和当至少部分地从上述来 源分离时，该术语包括标志物、核酸、蛋白质和多肽。当通过重组或合成 方式产生时，该术语还包括标志物、核酸、蛋白质和多肽。

如本文教导的示例性的人类生物标志物、核酸、蛋白质或多肽可以是 如在NCBI基因库（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）下给出的登录号下所注 解的。技术人员还可以理解，在一些情况下，所述序列可以是如本文教导 的生物标志物、核酸、蛋白质或多肽的前体（例如，前体蛋白）并且可以 包括从成熟的生物标志物、核酸、蛋白质或多肽加工掉的部分。技术人员 可以进一步理解，虽然以下可以列出仅一种或多种变异体，但包括全部变 异体。除非另有规定，否则以以下形式来提供下述条目：名称（代码；用 于一种或多种代表性氨基酸序列（如变异体）的基因库登录号，随后使时 间和基因库序列版本）：

基膜-特异性硫酸乙酰肝素蛋白聚糖核心蛋白（HSPG2，NP_005520.4）

细胞表面糖蛋白（MUC18/MCAM，NP_006491.2）

胶原α-3(VI)链（COL6A3，NP_004360.2，NP_476505.3，NP_476506.3， NP_476507.3，NP_476508.2）

C-反应蛋白（CRP；NP_000558；v.2）

内皮因子（ENG，NP_000109.1，NP_001108225.1）

肝细胞生长因子样蛋白（MST1；NP_066278，v.3.）。

胰岛素样生长因子-结合蛋白复合物酸不稳定亚单位(IGFALS； NP_004961.1)

细胞间粘附分子3（ICAM3；NP_002153，v.2）

库尼茨型蛋白酶抑制剂1（SPINT1，NP_001027539.1，NP_003701.1， NP_857593.1）

亮氨酰-胱氨酰氨肽酶（LNPEP，OTASE，NP_005566.2，NP_787116.2）

溶酶体Pro-X羧肽酶（PRCP，NP_005031.1，NP_955450.2）

过氧化物还原酶1（PRDX1;NP_002565，v.1；NP_859047，v.1； NP_859048，v.1）

过氧化物还原酶2（PRDX2；NP_005800.3），

磷脂酰肌醇-聚糖-特异性磷脂酶D（GPLD1；NP_001494，v.2； NP_803436，v.1）

疑似（可能）G蛋白偶联受体126（GPR126；NP_001027566，v.1； NP_001027567，v.1；NP_065188，v.4；NP_940971，v.1）

利血平Q6（QSOX1，NP_001004128.1，NP_002817.2）

硒蛋白P（SEPP1，NP_001078955.1，NP_001087195.1，NP_005401.3）

腱糖蛋白-X（TNXB；NP_061978，v.6；NP_115859，v.2）

血管内皮生长因子受体3（FLT4或VGFR3；NP_002011，v.2； NP_891555，v.2）

含分解素和金属蛋白酶域的蛋白12（ADAM12；NP_003465.3）

磷脂酰胆碱-甾醇酰基转移酶（LCAT，NP_000220.1）

回旋同源物4（ROBO4，NP_061928.4）

外核苷酸焦磷酸酶（核苷酸外焦磷酸酶，ectonucleotide  pyrophosphatase）/磷酸二酯酶家族成员2（ENPP2，NP_001035181.1）

蛋白S100-A9（S100A9,NP_002956.1）

本文提及的任何生物标志物、核酸、蛋白质或多肽还可以涵盖其片段。 因此，本文提及测量（或测量其的量）任何一种生物标志物、核酸、蛋白 质或多肽可以涵盖测量生物标志物、核酸、蛋白质或多肽，如，例如，测 量其成熟和/或加工后的可溶性/分泌形式（例如，血浆循环形式）和/或测 量其一种或多种片段。

例如，可以共同测量任何生物标志物、核酸、蛋白质或多肽和/或其 一种或多种片段，使得测得的量对应于共同测量的物种的总量。在另一个 实施例中，可以单独地测量生物标志物、核酸、蛋白质或多肽和/或其一种 或多种片段。优选地，所述片段可以是血浆循环（即非细胞或膜结合的） 形式。在不受任何理论限制的情况下，该类循环形式可以源自通过自然加 工的全长生物标志物、核酸、蛋白质或多肽，或可以来自在样品中发生的 已知的降解过程。在某些情况下，循环形式还可以是全长生物标志物、核 酸、蛋白质或多肽，其被发现在血浆中循环。因此，所述"循环形式"可以 是任何生物标志物、核酸、蛋白质或多肽，或任何其加工后的可溶性形式 或任一个的片段，其在样品中循环，即，其并不结合至所述样品的细胞或 膜部分。

除非根据上下文另有指明，否则本文提及的任何生物标志物、核酸、 蛋白质或多肽和其片段还可以通常涵盖所述生物标志物、核酸、蛋白质或 多肽和片段的修饰形式，如带有表达后修饰，包括，例如：磷酸化、糖基 化、脂化、甲基化、半胱氨酰化、磺化、谷胱苷肽化、乙酰化、甲硫氨酸 氧化成甲硫氨亚砜或甲硫氨砜等。

在一个实施方式中，任何生物标志物、核酸、蛋白质或多肽和其片段 可以是人类的，即，它们的基本序列可以与天然存在的人类生物标志物、 核酸、蛋白质或多肽的相应基本序列相同。因此，在这方面，修饰语“人 类”是指各个生物标志物、核酸、蛋白质或多肽的基本序列，而不是指它 们的起源或来源。例如，这样的生物标志物、核酸、蛋白质或多肽和片段 可以存在于人类受试者的样品中或从人受试者的样品分离，或可以通过其 它方式（例如，通过重组表达、无细胞翻译或非生物肽合成）获得。

术语蛋白、多肽或肽的“片段”通常是指所述蛋白、多肽或肽的N 端和/或C端缺失或截短的形式。该术语涵盖通过任何机制产生的片段， 如但不限于通过所述肽、多肽或蛋白的可替换地翻译、外切蛋白酶解和/ 或内切蛋白酶解和/或降解，如，例如，体内或体外，如，例如，通过物理、 化学和/或酶的蛋白水解。非限制性地，蛋白、多肽或肽的片段可以以所述 蛋白、多肽或肽的氨基酸序列的至少约5%、或至少约10%，例如，≥20%、 ≥30%或≥40%，如≥50%，例如≥60%、≥70%或≥80%，或甚至≥90%或≥95% 存在。

例如，片段可以包括相应全长蛋白的≥5个连续氨基酸、或≥10个连 续氨基酸、或≥20个连续氨基酸、或≥30个连续氨基酸，例如，≥40个连 续氨基酸，如，例如≥50个连续氨基酸，例如，≥60、≥70、≥80、≥90、≥100、 ≥200、≥300、≥400、≥500或≥600个连续氨基酸的序列。

在一个实施方式中，与相应的成熟、全长蛋白或它的可溶性或血浆循 环形式相比，片段可以是N端和/或C端截短1至约20个氨基酸，如，例 如，1至约15个氨基酸、或1至约10个氨基酸、或1至约5个氨基酸的。

在一个实施方式中，可以通过所述蛋白、多肽或肽的体外蛋白水解来 获得特定蛋白、多肽或肽的片段，以从样品有利地获得可检测的肽。例如， 可以通过适宜的物理、化学和/或酶剂来实现这样的蛋白水解，酶剂例如， 蛋白酶，优选蛋白内切酶，即，在蛋白、多肽或肽链内内部剪切的蛋白酶。 适宜的蛋白内切酶的非限制性列表包括丝氨酸蛋白酶（EC3.4.21）、苏氨 酸蛋白酶（EC3.4.25）、半胱氨酸蛋白酶（EC3.4.22）、天冬氨酸蛋白酶（EC 3.4.23）、金属蛋白酶（EC3.4.24）和谷氨酸蛋白酶。示例性的非限制性的 蛋白内切酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、产酶溶杆菌蛋白内切 酶Lys-C、金黄色葡萄球菌蛋白内切酶Glu-C（内肽酶V8）或溶组织梭菌 蛋白内切酶Arg-C（梭菌蛋白酶）。可以使用其它已知的或尚未被识别的酶； 技术人员可以基于它们的剪切特异性和频率来选择合适的蛋白酶以获得 所期望的肽形式。优选地，可以通过胰蛋白酶类（EC3.4.21.4）的肽内切 酶来实现蛋白水解，优选胰蛋白酶，如，但不限于从牛胰腺、人胰腺、猪 胰腺制备的胰蛋白酶、重组胰蛋白酶、Lys-乙酰化胰蛋白酶、溶液中的胰 蛋白酶、固定于固体载体上的胰蛋白酶等。胰蛋白酶是特别有用的，特别 是由于剪切的高特异性和效率。本发明还设想任何胰蛋白酶样蛋白酶的应 用，即，具有和胰蛋白酶类似的特异性。另外，化学试剂可以用于蛋白水 解。例如，可以在Met处剪切CNBr；可以在Trp处剪切BNPS-粪臭素。 基于所采用的酶或化学试剂，技术人员可以确定用于处理的条件，例如， 蛋白质浓度、酶或化学试剂浓度、pH、缓冲剂、温度、时间。

相对于特定成分（如例如，核酸、蛋白质、多肽、肽或其片段），术 语“分离的”通常表示该成分以分离形式存在，例如，已从它的自然环境 分离的或以分离形式制备自它的自然环境的一种或多种其它成分。例如， 以与它天然存在的人体或动物体分离的形式存在的分离的人或动物核酸、 蛋白质、多肽、肽或片段。

本文中使用的术语“分离的”还可以优选涵盖修饰语“纯化的”。本 文中所使用的术语“纯化的”关于其不要求绝对纯度的一种或多种核酸、 蛋白质、多肽、肽和/或其片段。相反，它表示这些一种或多种核酸、蛋白 质、多肽、肽和/或片段处于离散环境中，其中相对于其它蛋白，它们的丰 度（方便地以质量或重量或浓度来表达）大于在生物样品中的丰度。离散 环境是指单一介质，如，例如单一溶液、凝胶、沉淀物、冻干物等。可以 通过已知的方法，包括，例如，实验室合成或重组合成、色谱法、制备电 泳、离心法、沉淀、亲和纯化等来获得纯化的核酸、肽、多肽、或片段。

纯化的一种或多种蛋白、多肽、肽和/或片段可以优选由离散环境的 蛋白含量的按重量计≥10%、更优选≥50%，如≥60%、更优选≥70%、如≥80%、 和还更优选≥90%、如≥95%、≥96%、≥97%、≥98%、≥99%或者甚至100% 组成。可以例如通过劳里法（Lowry et al.1951.J Biol Chem193:265），可 选地如由Hartree1972（Anal Biochem48:422-427）所描述的方法来确定 蛋白含量。此外，可以通过在还原或非还原条件下的SDS-PAGE并利用考 马斯蓝或，优选地，银染，来确定肽或多肽的纯度。

在一些实施方式中，本文披露的试剂可以包含可检测的标记（标签） （label）。术语“标记”是指其可以用来提供可检测和优选可量化的读数 或性能，并且其可以连接于或组成感兴趣的实体的一部分，如肽或多肽或 特异性结合剂的任何原子、分子、部分或生物分子。可以通过质谱法、光 谱法、光学方法、比色法、磁法、光化学法、生化法、免疫化学方法或化 学方法来适当地检测标记。标记包括但不限于染料；放射性标记如³²P、³³P、 ³⁵S、¹²⁵I、¹³¹I；电子致密试剂；酶（例如，如在免疫测定中通常使用的辣 根磷酸酶或碱性磷酸酶）；结合部分如生物素-链霉亲和素；半抗原如地高 辛；发光、磷光或发荧光部分；质量标签；和单独或与通过荧光共振能量 转移（FRET）可以抑制或转移发射光谱的部分组合的荧光染料。

例如，标记可以是改变质量的标记。优选地，相对于它的相应的未标 记的肽，改变质量的标记可以涉及在肽的一个或多个氨基酸中存在不同的 稳定同位素。在质谱应用中，质量标记的肽作为阳性对照、标准物和校准 物特别有用。特别地，包括一种或多种不同同位素的肽是化学上相似的， 以相同的方式色谱地和电泳地分离并且还以同样的方式离子化和片段化。 然而，在适宜的质量分析仪中，这样的肽和其可选地选择的片段化离子将 显示可区分的m/z比，并由此可以加以区分。可区分的稳定同位素对的实 例包括H和D、¹²C和¹³C、¹⁴N和¹⁵N或¹⁶O和¹⁸O。通常，在本发明中分 析的生物样品的肽和蛋白质可以基本上仅包含在自然界具有高发生率的 常见同位素，如，例如H、¹²C、¹⁴N和¹⁶O。在这样的情况下，可以用在 自然界具有低发生率的一种或多种不常见同位素标记质量标记的肽，如例 如D、¹³C、¹⁵N和/或¹⁸O。也可以预期，在其中生物样品的肽或蛋白质将 包含一种或多种不常见同位素的情况下，质量标记肽可以包含各自的一种 或多种常见同位素。

使用一种或多种同位素标记的氨基酸底物，或通过化学或酶促修饰未 标记肽以对其引入一种或多种不同同位素，特别地通过合成或重组生产， 可以获得同位素标记的合成肽。通过实例性而非限制性的方式，在商业可 获得的氘化L-甲硫氨酸CH₃-S-CD₂CD₂-CH(NH₂)-COOH或氘化精氨酸 H₂NC(=NH)-NH-(CD₂)₃-CD(NH₂)-COOH的存在下合成或重组产生D-标记 肽。应被理解的是，氘化的或含¹⁵N或¹³C形式的任何氨基酸的存在可以 被考虑用于合成或重组生产标记肽。在另一个非限制性实施例中，可以在 H₂¹⁶O或H₂¹⁸O中用胰蛋白酶处理肽，导致在所述肽的COOH端加入两个 氧（分别为¹⁶O或¹⁸O）（例如，US2006/105415）。

因此，还预期本文中教导的生物标志物、肽、多肽或蛋白质和其片段 （如本文教导的），可选地包含可检测标记，作为（阳性）对照、标准物 或校准物在所述生物标志物、肽、多肽或蛋白质和其片段的定性或定量检 测分析（测量方法）中的用途，和特别是在用于在受试者中诊断、预测、 预后和/或监测如本文教导的疾病或病症的方法中的用途。可以以任何形式 来供给生物标志物、蛋白质、多肽或肽，特别是作为沉淀物、真空干燥的 冷冻干燥物、在液体或冷冻的溶液中、或共价地或非共价地固定在固体相 上，如例如，固定在固体色谱基质或玻璃或塑料或其它合适表面上（例如， 作为肽阵列和微阵列的一部分）。可以容易地制备肽，例如，从天然来源 分离，或重组或合成地制备。

进一步披露了能够特异性地结合至本文教导的的生物标志物、肽、多 肽或蛋白质和其片段的结合剂。如在整个本说明书中所预期的，结合剂可 以特别包括抗体、适体、光适体、蛋白质、肽、拟肽或小分子。

在整个本说明书中所使用的术语“特异性结合”是指一种药剂（在本 文中还称作“特异性结合剂”）结合于一种或多种期望的分子或分析物上， 基本上排除其它随机或无关的分子，并且可选地基本上排除其它结构相关 的分子。术语“特异性结合”并不必须要求一种药剂排他地结合于它的一 个或多个预期靶标上。例如，在结合的条件下，如果药剂对一个或多个预 期靶标的亲和力是药剂对非靶标分子的亲和力的至少约2倍、优选至少约 5倍、更优选至少约10倍、更优选至少约25倍、还更优选至少约50倍、 和甚至更优选至少约100倍或更大，则可以说，药剂特异性地结合于一个 或多个感兴趣的靶标上。

优选地，该药剂可以以这样的结合K_A≥1x10⁶M^-1的亲合常数（K_A）、 更优选K_A≥1x10⁷M^-1、还更优选K_A≥1x10⁸M^-1、甚至更优选K_A≥1x10⁹M^-1、 和还更优选K_A≥1x10¹⁰M^-1或K_A≥1x10¹¹M^-1结合于它的预期靶，其中， K_A=[SBA_T]/[SBA][T]，SBA表示特异性结合剂，T表示预期靶。可以通 过本领域中已知的方法实现确定K_A，如，例如，利用平衡透析和斯卡查 德图（Scatchard plot）分析。

如本文中所使用的，以其最广泛的意义使用术语“抗体”，并且通常 是指任何免疫结合剂。该术语具体地包括完整的单克隆抗体、多克隆抗体、 多价（例如，2价、3价或更高价）和/或由至少两个完整的抗体形成的多 特异性的抗体（例如，双或更多特异性的抗体）、和抗体片段，只要它们 表现出期望的生物活性（特别是，特异性地结合感兴趣的抗原的能力）， 和这些片段的多价和/或多特异性的复合物。术语“抗体”不仅包括通过包 括免疫法的方法产生的抗体，而且还包括任何多肽，例如重组表达的多肽， 其被制成包括至少一个能够特异性地结合于感兴趣的抗原上的表位的互 补决定区（CDR）。因此，上述术语适用于这样的分子，而与它们是体外 或体内产生的无关。

抗体可以是IgA、IgD、IgE、IgG和IgM种类中的任一种，并且优选 IgG类抗体。抗体可以是多克隆抗体，如从其来源纯化的（例如，亲和纯 化的）抗血清或免疫球蛋白。抗体可以是单克隆抗体或单克隆抗体的混合 物。单克隆抗体可以以更大的选择性和重现性靶向特定抗原或抗原内的特 定表位。通过实施例而非限制性的方式，可以通过首先由Kohler等人在 1975年（Nature256:495）描述的杂交瘤方法，或可以通过重组DNA方 法（例如，如在US4,816,567中描述的）生产单克隆抗体。还可以利用如 由Clackson等人1991年（Nature352:624-628）和Marks等人1991年（J  Mol Biol222:581-597）描述的技术从噬菌体抗体文库分离单克隆抗体。

抗体结合剂可以是抗体片段。“抗体片段”包含完整抗体的一部分， 其包含其抗原结合区或可变区。抗体片段的实例包括Fab、Fab'、F(ab')2、 Fv和scFv片段；双体（diabodies）；线性抗体；单链抗体分子；和抗体片 段多价和/或多特异性抗体，其形成自，如双体、三体、和多体。以上名称 Fab、Fab'、F（ab'）2、Fv、scFv等预期具有它们的在本领域中建立的意 义。

术语抗体包括源自或包含来自任何动物物种的一个或多个部分的抗 体，优选脊椎动物物种，包括，例如鸟类和哺乳动物。非限制性地，抗体 可以是鸡抗体、火鸡抗体、鹅抗体、鸭抗体、珍珠鸡抗体、鹌鹑抗体或雉 抗体。同样非限制性地，抗体可以是人抗体、鼠科（例如，小鼠、大鼠等） 抗体、驴抗体、兔抗体、山羊抗体、绵羊抗体、豚鼠抗体、骆驼（如西亚 骆驼（Camelus bactrianus）和单峰驼（Camelus dromaderius））抗体、美 洲驼羊（例如，羊驼（Lama paccos）、驼羊（Lama glama）或瘦驼（Lama  vicugna））抗体或马抗体。

技术人员将理解，抗体可以包括一个或多个氨基酸缺失、添加和/或 取代（例如，保守性取代），只要这样的改变保持其结合相应抗原。抗体 还可以包括其组成氨基酸残基的一种或多种天然或人工修饰（例如，糖基 化等）。

在本领域中用来生产多克隆和单克隆抗体和其片段的方法是众所周 知的，如用来生产重组抗体或其片段的方法（参见，例如，Harlow and Lane, “Antibodies:A Laboratory Manual”,Cold Spring Harbour Laboratory,New  York,1988;Harlow and Lane,“Using Antibodies:A Laboratory Manual”, Cold Spring Harbour Laboratory,New York,1999,ISBN0879695447; “Monoclonal Antibodies:A Manual of Techniques”,by Zola,ed.,CRC Press  1987,ISBN0849364760;“Monoclonal Antibodies:A Practical Approach”,by  Dean&Shepherd,eds.,Oxford University Press2000,ISBN0199637229; Methods in Molecular Biology,vol.248:“Antibody Engineering:Methods and  Protocols”,Lo,ed.,Humana Press2004,ISBN1588290921）。

术语“适体”是指可以特异性地结合于靶分子如肽的单链或双链寡 DNA、寡RNA或寡DNA/RNA或它们的任何类似物。有利地，对于它们 的靶适体可以显示出相当高的特异性和亲和力（例如，K_A为约1x10⁹M^-1的数量级）。在US5,270,163；Ellington&Szostak1990（Nature346: 818-822）；Tuerk&Gold1990（Science249:505-510）；或"The Aptamer  Handbook:Functional Oligonucleotides and Their Applications",by  Klussmann,ed.,Wiley-VCH2006,ISBN3527310592中特别描述了适体生 产，通过引用结合于此。术语“光适体”是指包含一个或多个可以共价结 合于或交联于靶分子的光反应性官能团的适体。术语“拟肽”是指为相应 肽的拓扑类似物的非肽药剂。在本领域中合理设计肽的拟肽的方法是已知 的。例如，在Horwell1995（Trends Biotechnol13:132-134）中描述了基于 硫酸化的8聚体肽CCK26-33的三种拟肽的合理设计、和基于11聚体肽 物质P的两种拟肽的合理设计、和相关的拟肽设计原则。

术语“小分子”是指具有与在制药中通常使用的那些有机分子相当大 小的化合物，优选有机化合物。该术语排除生物大分子（例如，蛋白质、 核酸等）。优选的有机小分子的尺寸范围上达至约5000Da，如上达至约 4000Da，优选上达至3000Da，更优选上达至2000Da，甚至更优选上达 至约1000Da，如上达至约900、800、700、600或上达至约500Da。

因此，还披露了使用如本文教导的任何一种或多种（分离的）标记、 肽、多肽或蛋白质和它们的片段（即，用作免疫抗原），可选地附着至呈 递载体用于免疫动物例如，非人类动物如实验室或农场动物的方法。免疫 和制备来自免疫血清的抗体试剂本身是众所周知的并且在本说明书的其 它地方提及的文献中描述。待免疫的动物可以包括任何动物物种、优选温 血物种、更优选脊椎动物物种、包括例如，鸟类、鱼类、和哺乳动物。非 限制性地，抗体可以是鸡抗体、火鸡抗体、鹅抗体、鸭抗体、珍珠鸡抗体、 鹌鹑抗体或雉抗体。同样非限制性地，抗体可以是人抗体、鼠科（例如， 小鼠、大鼠等）抗体、驴抗体、兔抗体、山羊抗体、绵羊抗体、豚鼠抗体、 鲨鱼抗体、骆驼抗体、美洲驼抗体或马抗体。术语“呈递载体”或“载体” 通常是指免疫原性分子，当其结合于第二分子时，通常通过提供另外的T 细胞表位，增强对后者的免疫应答。呈递载体可以是（多）肽结构或非肽 结构，特别是如聚糖、聚乙二醇、拟肽、合成聚合物等。示例性的非限制 性载体包括人B型肝炎病毒核心蛋白、多C3d结构域、破伤风毒素片段C 或酵母Ty颗粒。

通过本文教导的免疫法获得的或可获得的免疫血清特别可以用于产 生抗体试剂，其特异性地结合于本文披露的任何一种或多种生物标志物、 肽、多肽或蛋白质和它们的片段。

可以使用能够借助于另一种药剂（例如，借助于探针结合伴侣）进行 检测的标签标记结合分子。这种标签可以是如生物素、链霉亲和素、his 标签、myc标签、麦芽糖、麦芽糖结合蛋白或本领域中已知的具有结合伴 侣的任何其它种类的标签。在探针:结合伴侣排列中可以采用的缔合的实例 可以是任何缔合，并且包括如生物素:链霉亲和素、his标签:金属离子（例 如Ni²⁺）、麦芽糖:麦芽糖结合蛋白。

结合分子结合物可以与检测剂结合或附着至检测剂以便于检测。实验 室检测剂的实例包括但不限于：发光标记；比色标记，如染料；荧光标记； 或化学标记，如电活性剂（例如，亚铁氰酸盐）；酶；放射性标记；或射 频标记。更常见的是，检测剂是颗粒。在实施本发明中有用的颗粒的实例 包括但不限于胶体金颗粒；胶体硫颗粒；胶体硒颗粒；胶体硫酸钡颗粒； 胶体硫酸铁颗粒；金属碘酸盐颗粒；卤化银颗粒；二氧化硅颗粒；胶体金 属（含水）氧化物颗粒；胶体金属硫化物颗粒；胶体硒化铅颗粒；胶体硒 化镉颗粒；胶体金属磷酸盐颗粒；胶体金属铁酸盐颗粒；以有机或无机层 涂覆的任何上述胶体颗粒；蛋白质或肽分子；脂质体；或有机聚合物乳胶 颗粒，如聚苯乙烯乳胶珠。优选的颗粒是胶体金颗粒。可以通过任何常规 方式来制备胶体金，如在G.Frens,1973Nature Physical Science,241:20 （1973）中概述的方法。替代方法可以是在美国专利号5,578,577、 5,141,850、4,775,636、4,853,335、4,859,612、5,079,172、5,202,267、5,514,602、 5,616,467、5,681,775中描述的方法。

在本文中，可以使用任何现有的、可用的或常规的分离、检测和量化 方法来测量样品中生物标志物、肽、多肽、蛋白质和/或它们的片段存在或 不存在（例如，读数为存在与不存在；或可检测量与不可检测量）和/或量 （例如，读数为绝对量或相对量，如，例如，绝对浓度或相对浓度）（在 样品中将要如此测量的感兴趣的任何分子或分析物，包括如本文教导的任 何一种或多种生物标志物、肽、多肽、蛋白和它们的片段，在下文中可以 统称为生物标志物）。

例如，这样的方法可以包括生物化学测定法、免疫测定法、质谱分析 法、或色谱法、或它们的组合。

术语“免疫测定”通常指已知用于在样品中检测一种或多种感兴趣的 分子或分析物的方法，其中由特异性结合剂，通常为抗体，与感兴趣的分 子或分析物之间的特异性结合赋予感兴趣的一种或多种分子或分析物的 免疫测定的特异性。免疫测定技术包括但不限于直接ELISA（酶联免疫吸 附测定）、间接ELISA、夹心ELISA、竞争性ELISA、多重ELISA、放射 性免疫测定（RIA）、ELISPOT技术、和本领域中已知的其它类似技术。 在本领域中这些免疫测定法的原理是已知的，如John R.Crowther,"The  ELISA Guidebook",1st ed.,Humana Press2000,ISBN0896037282。

通过进一步的解释并且无限制地，直接ELISA采用标记的一抗来结 合于并从而量化样品中固定在载体如微孔板上的靶抗原。间接ELISA使 用结合于靶抗原的未标记的一抗和识别并使得能够量化结合抗原的一抗 的标记的二抗。在夹心ELISA中，使用结合于抗原内的一个抗原位点的 固定的‘捕获’抗体从样品中捕获靶抗原，并且在去除未结合分析物以后， 使用结合至所述抗原内的另一个抗原位点的‘检测’抗体来检测这样捕获 的抗原，其中检测抗体可以是如上所述被直接标记的或可间接检测的。竞 争性ELISA使用标记的‘竞争剂’，其可以是一抗或靶抗原。在一个实施 例中，使用样品孵育未标记的固定的一抗，使该反应可以达到平衡，然后 加入标记的靶抗原。在后者的结合部位还未被来自样品的未标记靶抗原占 据的地方，后者将结合至一抗。因此，结合的标记抗原的检测量与样品中 未标记抗原的量呈负相关。多重ELISA通常在多个阵列地址下使得能够 在单室（例如，微孔板）内同时检测两种或多种分析物（参见如Nielsen& Geierstanger2004.J Immunol Methods290:107-20和关于进一步指导，Ling  et al.2007.Expert Rev Mol Diagn7:87-98）。如所理解的，通常是通过酶 （如，例如，辣根过氧化物酶）结合进行ELISA技术中的标记并且终点 通常是比色、化学发光或荧光、磁、压电、热电和其它。

放射性免疫测定（RIA）是基于竞争的技术并且涉及将已知量的带有 抗体的放射性标记的（例如，¹²⁵l-或¹³¹l-标记的）靶抗原与所述抗原混合， 然后添加来自样品的未标记的或‘冷’抗原，并测量替代的标记抗原的量 （参见，例如，"An Introduction to Radioimmunoassay and Related  Techniques",by Chard T,ed.,Elsevier Science1995,ISBN0444821198用于 指导）。

通常地，在本文中，可以获得关于肽的质量、和优选关于所选肽的片 段化和/或（部分）氨基酸序列的精确信息的任何质谱（MS）技术（例如， 在串联质谱法，MS/MS中；或在源后衰变，TOF MS中）都是有用的。合 适的肽MS和MS/MS技术和系统本身是众所周知的（参见如，Methods in  Molecular Biology,vol.146:"Mass Spectrometry of Proteins and Peptides", by Chapman,ed.,Humana Press2000,ISBN089603609x；Biemann1990. Methods Enzymol193:455-79；或Methods in Enzymology,vol.402: "Biological Mass Spectrometry",by Burlingame,ed.,Academic Press2005, ISBN9780121828073），并且可以在本文中使用。适合生物标志物肽分析 的MS装置、仪器和系统可以包括但不限于：基质辅助激光解吸/电离飞行 时间（MALDI-TOF）MS；MALDI-TOF源后衰变（PSD）；MALDI-TOF/TOF； 表面增强激光解吸/电离飞行时间质谱（SELDI-TOF）MS；电喷雾电离质 谱（ESI-MS）；ESI-MS/MS；ESI-MS/（MS）ⁿ（n是大于零的整数）；ESI 3D或线性（2D）离子阱MS；ESI三重四极子MS；ESI四极正交TOF （Q-TOF）；ESI傅里叶变换MS系统；硅上解吸/电离（DIOS）；次级离子 质谱法（SIMS）；大气压化学电离质谱法（APCI-MS）；APCI-MS/MS； APCI-（MS）ⁿ；大气压光电离质谱法（APPI-MS）；APPI-MS/MS；和APPI- （MS）ⁿ。使用本领域中已建立的方式，如，例如，碰撞诱导解离（CID）， 来实现在串联MS（MS/MS）布置中的肽离子片段化。通过质谱法的生物 标志物的检测和量化可以涉及多反应监测（MRM），如，特别是由Kuhn 等人2004（Proteomics4:1175-86）所描述的。MS肽分析方法可以有利地 与上游肽或蛋白分离或分级分离法结合，如，例如与下文描述的色谱法和 其它方法结合。

色谱法（层析法）也可以用于测量生物标志物。本文中使用的术语“色 谱法”涵盖在本领域中如此称呼的和广泛可获得的用于分离化学物质的方 法。在一种优选的方法中，色谱法是指其中当移动流在固定液或固相（“固 定相”）周围或以上流动时，由于分析物的微分分布，由液体或气体的移 动流（“流动相”）携带的化学物质（分析物）的混合物被分离成所述流动 相和所述固定相之间的成分。固定相通常可以是细分固体、过滤材料片、 或在固体表面上的液体薄膜等。色谱法还广泛适用于分离生物来源的化合 物，如，例如，氨基酸、蛋白质、蛋白质的片段或肽等。

本文中所使用的色谱法可以优选是柱色谱（即，其中将固定相沉积或 填充在柱中），优选液相色谱法，和还更优选HPLC。虽然在本领域中色 谱法的细节是众所周知的，但关于进一步指导，参见，例如，Meyer M.,1998, ISBN:047198373X，和"Practical HPLC Methodology and Applications", Bidlingmeyer,B.A.,John Wiley&Sons Inc.,1993。色谱法的示例性类型包 括但不限于：高效液相色谱法（HPLC）、正相HPLC（NP-HPLC）、反相 HPLC（RP-HPLC）、离子交换色谱法（IEC）、如阳离子或阴离子交换色谱 法、亲水性相互作用色谱法（HILIC）、疏水性相互作用色谱法（HIC）、 包括凝胶过滤色谱法或凝胶渗透色谱法的尺寸排阻色谱法（SEC）、色谱 聚焦，亲和色谱法如免疫亲和、固定金属亲和色谱法，等。

色谱法，其包括一维、二维或多维色谱法，与另外的肽分析法结合， 如，例如，与如在本说明书的其它地方描述的下游质谱分析法结合，可以 用作肽分级分离法。

在本发明中，可选地与任何上述分析方法结合，可以使用另外的肽或 多肽分离、鉴别或量化方法，用于测量生物标志物。该种方法包括但不限 于：化学提取分配、包括毛细管等电聚焦（CIEF）、毛细管等速电泳（CITP）、 毛细管电色谱（CEC）等的等电聚焦（IEF），一维聚丙烯酰胺凝胶电泳 （PAGE）、二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D-PAGE）、毛细管凝胶电泳（CGE）、 毛细管区带电泳（CZE）、胶束电动色谱（MEKC）、自由流动电泳（FFE） 等。

可以使用例如在早期妊娠期间利用经宫颈胎盘活检或不危害妊娠的 类似方法获得的胎盘组织的RNA分析来建立RNA水平下的生物标志物的 水平。该测试涉及在妊娠的第十周至第十二周之间移取少量的胎盘组织。 在超声波引导下经由阴道，将细管插入胎盘并获取少量的活检。可替代地， 可以从妊娠自然流产的受试者获得胎盘活检以确立所述过早流产的病因。 鉴于未来妊娠，这种信息是重要的预测工具。

可以利用本领域中已知的标准定量RNA测量工具检测RNA水平。 非限制性的实例包括基于杂交的分析、微阵列表达分析、数字基因表达 （DGE）、RNA原位杂交（RISH）、Northern印迹分析等；PCR、RT-PCR、 RT-qPCR、终点PCR、数字PCR等；支持的寡核苷酸检测、热测序、通 过合成的Polony循环测序、同时双向测序、单分子测序、单分子实时测 序、真正的单分子测序、杂交辅助纳米孔测序和通过合成的测序。

还可以利用标准的免疫组化技术在如上所述获得的胎盘活检中检测 生物标志物的存在，其中在胎盘组织中直接检测生物标志物蛋白的存在、 不存在或量。可以按照在本领域中众所周知的常规程序来固定活检组织。

本文教导的各个方面和实施方式可以进一步依靠比较在样品中测得 的生物标志物的量或患者中参数的测量结果或得分与参考值，其中所述参 考值表示本文教导的疾病或病症的已知预测、诊断和/或预后。

例如，不同的参考值可以表示患有如本文教导的给定疾病或病症的风 险（例如，异常升高的风险）的预测与患有所述疾病或病症的没有或正常 风险的预测。在另一个实施例中，不同的参考值可以表示患有该类疾病或 病症的不同程度的风险的预测。

在进一步的实施例中，不同的参考值可以表示本文教导的给定疾病或 病症的诊断与没有上述疾病或病症的诊断（如，例如，健康、或所述疾病 或病症康复等的诊断）。在另一个实施例中，不同的参考值可以表示不同 严重性的该类疾病或病症的诊断。

在又一个实施例中，不同的参考值可以表示对本文教导的给定疾病或 病症的良好预后与所述疾病或病症的较差预后。在另一个实施例中，不同 的参考值可以表示对该种疾病或病症的不同的有利或不利的预后。

这样的比较通常可以包括任何方式以确定在待比较的数值之间至少 一个差异的存在或不存在和可选地该种差异的大小。比较可以包括外观检 察、测量结果的算术或统计比较。这样的统计比较包括但不限于运用规则。

可以按照先前用于其它生物标志物和参数的已知程序建立参考值。例 如，可以在特征在于所述疾病或病症的特定的诊断、预测和/或预后（即， 对其而言，疾病或病症的所述诊断、预测和/或预后适用）的个体或个体的 群体中建立参考值。这样的群体可以包括但不限于≥2、≥10、≥100、或甚 至数百或更多个体。

第一数值与第二数值的“偏差”通常可以涵盖任何方向（例如，增加： 第一数值>第二数值；或减小：第一数值<第二数值）和任何程度的改变。

例如，相对于与其进行比较的第二数值，偏差可以涵盖第一数值非限 制性地减少至少约10%（约0.9倍或更少）、或至少约20%（约0.8倍或更 少）、或至少约30%（约0.7倍或更少）、或至少约40%（约0.6倍或更少）、 或至少约50%（约0.5倍或更少）、或至少约60%（约0.4倍或更少）、或 至少约70%（约0.3倍或更少）、或至少约80%（约0.2倍或更少）、或至 少约90%（约0.1倍或更少）。

例如，相对于与其进行比较的第二数值，偏差可以涵盖第一数值非限 制性地增加至少约10%（约1.1倍或以上）、或至少约20%（约1.2倍或以 上）、或至少约30%（约1.3倍或以上）、或至少约40%（约1.4倍或以上）、 或至少约50%（约1.5倍或以上）、或至少约60%（约1.6倍或以上）、或 至少约70%（约1.7倍或以上）、或至少约80%（约1.8倍或以上）、或至 少约90%（约1.9或倍以上）、或至少约100%（约2倍或以上）、或至少 约150%（约2.5倍或以上）、或至少约200%（约3倍或以上）、或至少约 500%（约6倍或以上）、或至少约700%（约8倍或以上）等。

优选地，偏差可以指统计学上显著的观察到的改变。例如，偏差可以 指观察到的改变其落在给定群体中的参考值的误差容限的范围之外（如， 例如，通过标准偏差或标准误差，或通过其预定倍数来表示，例如，±1 ×SD或±2×SD、或±1×SE或±2×SE）。偏差还可以指落在由给定群体中 的数值限定的参考范围以外的数值（例如，在包括所述群体中的值的 ≥40%、≥50%、≥60%、≥70%、≥75%或≥80%或≥85%或≥90%或≥95%或甚 至≥100%的范围以外）。

在另一个实施方式中，如果观察到的改变超过给定阈值或截止值，则 可以认为是偏差。可以如本领域通常已知的来选择这样的阈值或截止值， 以为所选的诊断、预测和/或预后方法提供敏感性和/或特异性，例如，至 少50%、或至少60%、或至少70%、或至少80%、或至少85%、或至少 90%、或至少95%的敏感性和/或特异性。

本发明进一步提供了用于诊断、预测、预后和/或监测如本文教导的 任何一种疾病或病症的试剂盒或装置，其包括用于在患者的样品中检测包 含在如本文教导的测试组中的生物标志物的水平的装置。在一个优选实施 方式中，可以在临床环境或家中使用本发明的这样的一种或多种试剂盒。 该试剂盒可以用于诊断所述疾病或病症、用于监测用药剂治疗患有所述疾 病或病症的受试者的有效性、或用于对于在所述受试者中发生所述疾病或 病症的预防性筛查。

在临床环境中，该试剂盒或装置可以以床边装置或应急小组设置的形 式，例如，作为救护车或其它移动急救车辆的装备或团队装备的一部分或 作为急救箱的一部分。诊断试剂盒或装置可以协助医生、急救助手、或护 士来决定接受观察的患者是否正发展如本文教导的疾病或病症，其后可以 进行适当的行动或治疗。

家庭测试试剂盒给予患者读数，她可以将其传达给医生、急救助手或 医院的急诊科，其后可以采取适当的行动。对于具有病史或具有患有如本 文教导的任何一种疾病或病症的风险的人，这样的家庭测试装置特别有 用。

非限制性的实例是：包括用于附着至固相的一种或多种必需生物标志 物的特异性结合分子的系统，例如，横流试纸或纤维素试纸装置和本领域 中众所周知的类似装置。用来进行生化分析的一个非限制性的实例是使用 测试条和标记的抗体，该组合不需要膜的任何洗涤。测试条是众所周知的， 例如，在妊娠检测试剂盒领域，其中抗hCG抗体存在于支撑上，并通过 尿的流动搬运到允许可视化的固定二抗上与hCG复合。这样的家庭测试 装置、系统或试剂盒的其它非限制性的实例可以参见例如下列美国专利： 6,107,045、6,974,706、5,108,889、6,027,944、6,482,156、6,511,814、5,824,268、 5,726,010、6,001,658，或美国专利申请：2008/0090305或2003/0109067。 在一个优选的实施方式中，本发明提供了横向流动装置或纤维素试纸 （dipstick）。这样的纤维素试纸包括测试条，其允许样品通过毛细流动从 条的一端移动，其中样品施加在这样的条的另一端，在那里测量所述样品 中分析物的存在。在另一个实施方式中，本发明提供了包括试剂条的装置。 这样的试剂条包括一个或多个测试垫，当使用样品浸湿测试垫时，其在分 析物存在时提供颜色变化和/或指示所述样品中蛋白质的浓度。

为了获得其中仅当样品中需要的生物标志物的水平高于某个预定阈 值水平或值时才形成信号的半定量测试条，在测试条上可以存在用于生物 标志物的预定量的固定捕获抗体。这使得能够捕获存在于样品中的一定量 的生物标志物，其对应于预定的阈值水平或值。然后，可以将通过例如结 合的或标记的结合分子结合的剩余量的生物标志物（如果有的话）迁移到 检测区，如果在样品中的生物标志物的水平高于预定阈值水平或数值，其 将仅产生信号。

用来确定样品中的任何所需生物标志物的量是否低于或高于一定的 阈值水平或值的另一种可能的方法是，使用捕获存在于样品中的全部所述 生物标志物的捕获一抗，与标记的二抗结合，当结合至固相时产生一定的 信号或颜色。然后可以将颜色或信号的强度与参考颜色或信号图比较，表 明当信号的强度高于一定的阈值信号时，测试是阳性的。可替代地，可以 使用包括例如光吸收传感器或光发射仪的电子设备来测量颜色或信号的 量或强度，产生所形成的信号强度或颜色吸光度的数值，其然后可以以阴 性结果（如果所述数值低于阈值）或阳性结果（如果所述数值高于阈值） 的形式显示给受试者。这种实施方式特别可用于一段时间内监测患者中所 述生物标志物的水平。

可以如在受试者未患给定疾病或病症期间内，利用家用装置来确定参 考值或范围，以给予患者其生物标志物的基线水平的指示。因此，定期使 用家用测试装置将因此使受试者能够注意到所述生物标志物与基线水平 相比的水平的突然变化，这可以使她能够联系医生。

可替换地，可以在患有本文教导的给定疾病或病症的受试者中确定参 考值，于是其表示她个人对于生物标志物的“风险水平”，即生物标志物 的水平表明她患有或即将患有所述疾病或病症。该风险水平可用于监测疾 病进展或用于评估治疗效果。

另外，可以通过将受试者中的测量结果与高度类似疾病状态或表型 （例如，全部均未患有如本文教导的疾病或病症或患有所述疾病或病症） 结合建立参考值或水平。

在本领域中已知的其原理可以用于根据本发明的家用测试装置的这 样的半定量测试的非限制性实例是由Sanitoets出售的HIV/AIDS测试或前 列腺癌测试。家用前列腺测试是快速测试，其用作最初的半定量测试来检 测在全血中高于4ng/ml的PSA血液水平。典型的家用自测试试剂盒包括 以下组件：对其给予血液样品并且当蛋白水平高于一定阈值水平时其产生 信号的测试装置、一定量的稀释剂例如在滴液吸移管中以帮助将分析物 （即，感兴趣的蛋白）从样品施加区转移到信号检测区、可选地，用于血 液样品采集的空吸液管、手指穿刺装置、可选地，用来清洗穿刺区域的无 菌拭子和试剂盒的使用说明书。

对于例如乳腺癌检测和考虑到心脏风险家用测试的CRP-蛋白水平检 测，类似测试也是已知的。后者的测试包括将测试结果发送到实验室，在 那里由技术专家或医疗专家来解释结果。患者病症的上述基于电话或互联 网的诊断当然是可能的并且适用于大多数试剂盒，因为测试结果的解释经 常比进行测试更加重要。当使用如上文提及的给出存在于样品中的蛋白水 平的数值的电子设备时，此数值当然可以容易地通过电话、移动电话、卫 星电话、电子邮件、互联网或其它通信方式传达，以告知医院、医生或急 救队某人处于患有如本文教导的疾病或病症的风险、或患有如本文教导的 疾病或病症。在美国专利6,482,156中披露了这样系统的一个非限制性实 例。

可以通过利用在其上固定有用于所述生物标志物的结合分子的芯片 的表面等离子体共振（SPR）、荧光共振能量转移（FRET）、生物发光共振 能量转移（BRET）、荧光猝灭、荧光偏振测量或本领域中已知的其它方式 测量样品中生物标志物的存在和/或浓度。可以使用描述的任何结合分析来 确定样品中任何生物标志物的存在和/或浓度。要做到这一点，将用于生物 标志物的结合分子与样品反应，并对于所使用的结合分析适当测量生物标 志物的浓度。为了验证和校准某分析，因此可以进行使用不同浓度的标准 生物标志物和/或结合分子的对照反应。当采用固相分析时，在温育之后， 进行洗涤步骤以除去未结合的标志物。将结合的生物标志物测定为适合给 定的标记（例如，闪光计数、荧光、抗体-染料等）。如果希望获得定性结 果，则对照和不同浓度可能是没有必要的。当然，可以转换所述生物标志 物和结合分子的角色；技术人员可以改编上述方法，使得在样品的不同浓 度下将结合分子应用于样品。

通过以下非限制性实施例来进一步说明上述方面和实施方式。

实施例

实施例1：用于HDP/PE预测的测试组

在15+/-1和20+/-1周妊娠时从单胎妊娠的孕妇采集预期的临床样品， 并且在她们的妊娠的接下来过程中被诊断患有先兆子痫（病例）或没有诊 断患有先兆子痫（对照）。全部样品获自SCOPE研究（用于妊娠终点筛查） 的参与者，这是澳大利亚临床试验注册ACTRN12607000551493，未经产 的妇女的预期筛查研究。从每位参与者获得书面同意书。用于研究所应用 的选择标准是未经产、单胎妊娠，孕龄为14周0天至16周6天妊娠之间 和对参与的知情同意书。应用的排除标准是：不确定的末次月经期（LMP） 和在<=20周时不愿进行超声波扫描、>=3次流产、>=3终止妊娠 （terminations）、显著的胎儿异常/异常核型、妊娠前治疗过实质性高血压、 登记>=160/100mmHg的中度-重度高血压、糖尿病、肾病、系统性红斑狼 疮、抗磷脂综合征、镰状细胞病、HIV阳性、显著的子宫异常（major uterine  anomaly）、宫颈缝合、刀锥活检（knife cone biopsy）、即时破裂的膜（ruptured  membranes now），长期的类固醇、治疗低剂量的阿司匹林、治疗钙 （>1g/24h）、治疗二十碳五烯酸（鱼油）、治疗维生素C>=1000mg&Vit  E>=400iu、治疗肝素/低分子量肝素。

将先兆子痫定义为妊娠高血压（在20周妊娠之后但在分娩开始前相 隔4小时的至少2个时刻时收缩压（BP）>=140mmHg和/或舒张压 BP>=90mmHg（Korotkoff V））或在相隔4小时的至少2个时刻时产后收 缩压BP>=140mmHg和/或产后舒张压BP>=90mmHg，伴随有蛋白尿>=300 mg/24h或点（spot）尿蛋白:肌酸酐比值>=30mg/mmol肌酸酐或尿纤维素 试纸蛋白>=2或先兆子痫的任何多系统并发症。多系统并发症包括以下各 项中的任何一种：1.急性肾功能不全，定义为产前>=100umol/L或产 后>130umol/L的血清肌酸酐的新增加；2.肝病，定义为升高的天冬氨酸 转氨酶和/或丙氨酸转氨酶>45IU/L和/或重度右上象限或上腹痛或肝破 裂；3.神经系统问题，定义为子痫或紧迫子痫（重度头痛，并伴有反射亢 进和持续性视觉障碍）或脑充血；4.血液疾病，包括血小板减少（血小板 <100×10⁹/L）、弥散性血管内凝血或溶血，通过在血膜上的特征（例如， 碎裂细胞、盔状细胞）和减少的结合珠蛋白加以诊断。可以在募集后妊娠 直到分娩期间或在分娩以后的最初的2周内的任何阶段诊断先兆子痫。

将自发性早产定义为导致在<37.0周时的早产的自发性早产分娩 （spontaneous preterm labour）或早产胎膜早破（PPROM）。

将早产型先兆子痫定义为导致在<37.0周时分娩的先兆子痫。

将早发型先兆子痫定义为导致在<34.0周时分娩的先兆子痫。

利用定制的百分位数，将小孕龄定义为出生体重<10%，并按照产妇 体重、身高、产次、种族和婴儿性别加以调节。在婴儿出生以后的24小 时内测定体重。

在15+/-1和20+/-1周妊娠时，通过访视和检查妇女采集关于先兆子 痫的已知风险因子的临床数据（Zhong et al,Prenatal Diagnosis,30, p.293-308,2010;Sibai et al,365,p.785-799,2005）。在20周时获得关于胎 儿测量结果、解剖学、子宫动脉和脐动脉多普勒和宫颈长度的超声波数据。 在24周时测量胎儿生长、子宫和脐多普勒。在分娩的48小时内，跟踪妊 娠结果并观察妇女。在分娩的48小时内获得婴儿测量结果。

在表1中给出了病例（n=50）和对照（n=100）的基线特性的概述和 如在15周和20周访视和检查时获得的一些临床参数。进行两次血压测量。 如下计算平均动脉压：（1/3*收缩压+2/3*舒张压）。

表1

进一步评价受试者可以提炼“患者的母亲患有先兆子痫（是/否）”为 是=1，否=99，其是包含在表3中的信息，并且特别依赖于实施例5和6。 进一步评价可以更精确地确定表1中患者的种族为亚洲人=4、高加索人= 38、印度人=3、毛利人=1、太平洋岛民=3，和其他（包括非洲人）=1， 其是包含在表3中的信息。

使用从位于澳大利亚的SCOPE研究的另一参与中心获得的另外50 个病例和100个对照进一步展开了病例-对照研究。在表2中给出了病例 （n=50）和对照（n=100）的基线特性的概述和在15周和20周访视和检 查时获得的一些临床参数。进行两次血压测量。如下计算平均动脉压：（1/3* 收缩压+2/3*舒张压）。

表2

对比表1和表2中描述的两组研究人群中基线特性表明，人群表现显 著不同。表3描述了将表1和表2中捕获的病例和对照作为单一人群的病 例（n=100）和对照（n=200）的基线特性和临床参数。

表3

标题表1、2和3：包括关于疾病的家族史信息的产妇特征、在妊娠 的15周和20周访视期间获得的临床参数和在妊娠结果下采集的一些产妇 和胎儿的特性。结果是N、患者的数量、或平均值（标准偏差）。

实施例2：靶蛋白定量

以下描述在样品中靶蛋白定量的一种示例性且优选的方法，特别地将 其用在本实施例中和全部实施例中。

MASSTERCLASS实验装置

分析使用以稳定同位素稀释的靶向串联质谱作为末期 肽定量系统（还称为多反应监测（MRM）和单反应监测（SRM））。对感 兴趣的特定蛋白质，靶向肽是特异的（即，蛋白型的），即测得的肽的量 与原始样品中蛋白质的量直接相关。在复合样品中为了达到对于生物标志 物定量所需的特异性和敏感性，在末期定量步骤之前进行肽分级。

对于引用的蛋白，组建设基于如在MASSterclass中定量的在下面列 出的蛋白型肽的相关读数。对于PRDX1，将两种不同的肽用于计量。另 外，以下需要注意的是是否将另外的肽分离分级步骤用于产生测试组内使 用的读数：

蛋白质 蛋白型肽序列 另外的肽分级（是/否） ENG LPDTPQGLLGEAR 是 FLT4 GPILEATAGDELVK 是 GPR126 VILPQTSDAYQVSVAK 否 LNPEP YISIGSEAEK 是 ICAM3 IALETSLSK 否 PRDX1 ATAVVDGAFK 否 PRDX1 ADEGISFR 是 PRDX2 EGGLGPLNIPLLADVTR 否 TNXB TVTVEDLEPGK 是 CRP GYSIFSYATK 否 MST1 SPLNDFQVLR 否 PRCP YYGESLPFGDNSFK 是 COL6A3 SLDEISQPAQELK 是 SPINT1 YTSGFDELQR 是 HSPG2 GSIQVDGEELVSGR 是 SEPP1 LPTDSELAPR 否 QSOX1 LAGAPSEDPQFPK 是 IGFALS LAELPADALGPLQR 是 MCAM GATLALTQVTPQDER 是 GPLD1 IADVTSGLIGGEDGR 是

对于如针对表3的组合数据集获得的蛋白质读数，通过MASSterclass 量化下列肽。在这种情况下，总是应用另外的分级步骤，对于ADAM12、 ECM1、LCAT、SPINT1、和IGFALS，测得多于一种的肽。

合适的测定可以包括以下步骤：

-制备血浆或血清样品

-使用ProteoPrep离心柱（Sigma Aldrich）使用与抗白蛋白和抗lgG 抗体的亲和捕获并去除人类白蛋白和IgG（在蛋白水平上的复杂性降低）

-添加已知量的同位素标记肽。该肽具有与感兴趣的蛋白典型肽相同 的氨基酸序列，通常具有内置的一个同位素标记的氨基酸以产生质量差 异。在整个过程中，除了在基于分子质量的末期定量步骤中，标记的肽具 有与内源肽相同的化学和色谱行为。

-胰蛋白酶消化。使用胰蛋白酶将在耗尽的血清/血浆样品中的蛋白 质消化成肽。该酶从赖氨酸和精氨酸中的C端切割蛋白质，除了当脯氨酸 存在于赖氨酸或精氨酸C端时。在消化以前，通过煮沸使蛋白质变性，这 使得在37℃下16h温育期间蛋白质分子对胰蛋白酶的活性更加敏感。

-基于肽的分级分离：dPC^TM分馏器（CellBiosciences，现在是 ProteinSimple）使用平行等电点聚焦能够基于复合肽样品的等电点以高的 精密度快速并且可重复地将复合肽样品分级。将肽捕获到存在于数字式 ProteomeChip^TM中（Westburg,Leusden,The Netherlands）的暴露于高电场 的控制pH的凝胶栓里。芯片将样品运行室分隔成阳极室和阴极室。阳极 缓冲液是更酸性的，阴极缓冲液比所使用的芯片的任何PI捕获碱性更高。 应用的电场维持缩肽通过栓的循环。当通过其pH等于或非常接近于其PI 的pH栓时，肽被捕获。

-基于LC-MS/MS的定量，包括在反相（C18）纳米LC（PepMap C18; Dionex）和MS/MS上的进一步分离：使用MRM（4000QTRAP；ABI） /SRM（Vantage TSQ；Thermo Scientific）模式的串联质谱法。将LC柱连 接到连接在质谱仪的源头（source head）上的电喷射针。当材料从柱中洗 脱时，分子被离子化并以气相进入质谱仪。基于其质荷比（m/z），被监测 的肽被特异性地选择通过第一四极（Q1）。然后在用作碰撞池的第二四极 （Q2）中被选择的肽被片段化。然后所得到的片段进入第三四极（Q3）。 依靠仪器设置（在测试开发阶段确定的），仅选择特定的肽片段（或所谓 的转换物）用于检测。

-将被监测的肽的m/z和该肽的被监测片段的m/z的组合称为转换。 在一个实验中，可以对多种转换进行该过程。在相同的保留时间下洗脱内 源性肽（分析物）和其相应的同位素标记的合成肽（内标）两者，并在相 同的LC-MS/MS实验中测量。

-由分析物特异峰下的面积与合成的同位素标记类似物（内标）的特 异性峰下的面积之间的比值限定值读数。读数与样品中蛋白质的最初浓度直接相关。因此，在不同样品和样品组之 间的可以比较读数。

下文给出在本研究中遵循的适当的方案：

-按照制造商的方案，使25μL血浆耗尽人类白蛋白和IgG（ProteoPrep 离心柱；Sigma Aldrich），不同的是将20mM NH₄HCO₃用作结合/平衡缓冲 液。

-在95℃下变性耗尽后的样品（225μL）15min并在冰上立即冷却。

-在样品中搀入2000fmol的同位素标记肽。

-将20μg胰蛋白酶加到样品中并允许在37℃下消化16小时。该阶 段下每个样品的最终容积是270μL。

-对于未断裂的肽的LC-MS/MS分析：首先在溶剂A（0.1%蚁酸） 以1/15稀释10μL消化的样品，然后再含有250amol/μL感兴趣的全部同 位素标记肽（定制的'Heavy AQUA'肽；Thermo Scientific）的相同溶剂中 以1/10稀释。

-对于断裂的肽的LC-MS/MS分析：使用具有生成pH范围为3.5-4.5 的数字式ProteomeChip的dPC^TM分级器将120μL消化的样品分级。由 CellBiosciences提供缓冲液和芯片和使用的分离方案。分离后，收获凝胶 栓并在37℃下在200μL在50%的乙腈中的0.2%的蚁酸中将其浸泡1h以 回收肽。除去栓并在真空下干燥溶剂。在100μL的0.1%蚁酸中再次溶解 肽。

-利用反相纳米LC，借助于以MRM/SRM模式的在线MS/MS分离 20μL的最终稀释物（未分级或分级后的肽段池）：

-柱：PepMap C18，75μm I.D.×25cm L，孔径，5μm粒径

-溶剂A：0.1%蚁酸

-溶剂B：80%乙腈，0.1%蚁酸

-梯度：30min；2%-55%的溶剂B

-MRM模式的MS/MS：方法包括分析物和合成的、标记的肽的 转换。

-在蛋白质分析研发期间实验地确定和选择所使用的转换

-对于开始以前3分钟和在感兴趣的肽的确定的保留时间结束以 后3分钟测量每个感兴趣的转换，确保每个峰具有至少15个数据点。

-使用LCQuan软件（Thermo Scientific）分析并量化原始数据：在相 同C18保留时间下，通过自动峰值检测确定分析物峰下和内标物（标记的 合成肽）峰下的面积。手动检查这些分析。由分析物峰面积和内标物峰面 积的比值限定读数。

实施例3：统计分析

使用逻辑回归来限定预测结果（先兆子痫/没有先兆子痫）的多变量 分类器模型[Royston et al.2009,Prognosis and prognostic research: Developing a prognostic model,BMJ2009:338:b604]。

将预测物（生物标志物和参数）标准化。将二元变量编码为0/1，将 分析物浓度和相对浓度（MasterClass测量结果）对数转换。对于特征选择， 将全部参数标准化（Z-标准化）。

使用损耗和选择方法Lasso进行特征选择（Tibshirani1996,Regression  shrinkage and selection via the lasso,J.Royal.Statist.Soc B.58(1):267-288）。 使用接收器操作曲线下的可见面积（AUC）评估模型（测试组）的性能。 使用交叉验证评估对分离器的预测误差。基于分离器的性能和预测误差排 列分离器。

简要说明，也评估测试板对于“rule-in”测试（即，使用PPV标准） 的性能。为了该目的，在没有确定太多假阳性的情况下，评定这些组充分 预测先兆子痫的能力。在低发病率的疾病的背景下，如PE，临床期望地 建立高于或等于0.2的阳性预测值（PPV）。PPV=#真阳性/（#真阳性+假 阳性）。

为了能够定量评估以上PPV标准，对1000个妊娠的群计算了PPV 数值，并考虑了与研究的群有关的发病率。对于全部的先兆子痫，之前在 文献中（BMJ2011,vol.342,d1875,doi:10.1136/bmj.d1875）报道了5.3% 的发病率并且其可以用于该计算。然后将PPV数据转换成敏感性与特异 性数值以使得能够在接收-操作曲线上（ROC）PPV描绘阀值。图1中示 出了对于发病率5.3%的示例性计算。

在临床实践中，认为肥胖的女性（在妊娠前或在前三个月BMI≥30） 处于若干妊娠并发症的风险中，包括例如妊娠糖尿病、先兆子痫等，并且 从而已经经受增加的产前护理（NHS National Institute for Health and  Clinical Excellence(NICE)clinical guideline62:Antenatal Care-Routine  Care for the Healthy Pregnant woman,March2008）。因此，关注于考虑为处 在PE的低风险的受试者，即非肥胖的女性、更特别地是未生育过的非肥 胖的女性的先兆子痫预测组被特别地考虑是临床相关的。因此，也开发了 在该亚群中预测先兆子痫的组。还再次研究了“rule-in”测试；如上文所 述，考虑了非肥胖的受试者的发病率。对于非肥胖的受试者中的先兆子痫， 之前在文献中（BMJ2011,vol.342,d1875,supra）已经报道了4.3%的发病 率。图1中还示出了对于发病率4.3%的ROC曲线上的示例性计算PPV阀 值。

图1示出了在全部受试者、非肥胖的受试者和肥胖的受试者中，基于 在这些群中之前所报导的发病率，分别为5.3%、4.3%和10.3%（BMJ2011, vol.342,d1875,上文）对先兆子痫计算的PPV-值阈曲线的示例性曲线。

此外，由于新生儿的额外风险，例如，早产，和母亲经常严重的并发 症，准确预测早产型先兆子痫，特别是在妊娠37周之前保证分娩的先兆 子痫被认为是高临床相关的。因此，也检查了对于全部受试者（有和没有 PPV标准）和对于非肥胖受试者（有和没有PPV标准）的先兆子痫预测 组对于预测早产型先兆子痫的能力。

实施例4：使用表1的病例-对照集合的结果

使用如表1中捕获的病例-对照集合已经获得了在本实施例中的数据 和分析。

对于如本文中描述的优选的测试组E、F、G和H实现了出乎意料有 利的结果。将这些组的各个生物标志物和参数用于开发利用逻辑回归估计 发生先兆子痫的可能性的模型。注意该模型对定量平台是特异性的（本文 中，使用MASSterclass^TM相对定量）。当然，由于它们各自的灵敏度和偏 置，不同的定量方法可以对相同蛋白质浓度产生不同的估计值。然而，如 果平台具有相同地低的技术变异性，从不同平台获得的对准定量的模型的 性能将是相似的。

特别地，20+/-1周时，在该实验中评估的组F的实施方式由以下生 物标志物和参数组成：IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、 血压的测量结果（具体地是2nd_vst_map_1st）、血糖水平的测量结果（具 体地是2nd_vst_random_glucose）、SEPP1水平的测量结果、和ENG水平 的测量结果。该模型具有以下格式：

风险得分=0.0618*2nd_vst_map_1st+0.736*2nd_vst_random_glucose +2.41*fh_petxcardio+13.1*log₁₀(ENG)-20.8*log₁₀(SEPP1)+14.5* log₁₀(IGFALS)-11.4

其中，log₁₀是底数10的常用对数，并且ENG、SEPP1和IGFALS是 如使用MASSterClass^TM测定的蛋白质的相对血浆浓度。

发展先兆子痫的预测概率是：

p=1/(1+e^{-风险_得分})

模型显示发展先兆子痫的女性和未发展该病症的女性的差别为0.91 （95%的置信区间：0.86-0.96）的AUC。

为了对比，还计算了模型的个体组成的接收-操作特征曲线下的表观 面积，即它们的个体特性（MedCalc package,MedCalc Software bvba, Belgium）：

生物标志物/参数 AUC 95%CI 2nd_vst_map_1st 0.69 0.61至0.77 2nd_vst_random_glucose 0.67 0.59至0.75 fh_petxcardio 0.67 0.59至0.75 ENG 0.65 0.57至0.73 SEPP1 0.62 0.54至0.70 IGFALS 0.75 0.68至0.82

进一步地，在20+/-1周时，如在该实验中评价的组E的实施方式， 由以下生物标志物和参数组成：IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio 的得分、血压的测量结果（具体地是2nd_vst_map_1st）、血糖水平的测量 结果（具体地是2nd_vst_random_glucose）、和SEPP1水平的测量结果。 该模型具有以下格式：

风险得分=0.0435*2nd_vst_map_1st+0.716*2nd_vst_random_glucose +1.88*fh_petxcardio-15.9*log₁₀(SEPP1)+15.4*log₁₀(IGFALS)-24.8

该模型具有0.87的AUC（95%的置信区间：0.81-0.92）。

为了对比，还计算了模型个体组成的接收-操作特征曲线下的表观面 积，即它们的个体特性（MedCalc package,MedCalc Software bvba, Belgium）：

生物标志物/参数 AUC 95%CI 2nd_vst_map_1st 0.69 0.61至0.77 2nd_vst_random_glucose 0.67 0.59至0.75 fh_petxcardio 0.67 0.59至0.75 SEPP1 0.62 0.54至0.70 IGFALS 0.75 0.68至0.82

进一步地，在15+/-1周时，在该实验中评价的组G的实施方式由以 下生物标志物和参数组成：IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得 分、血压的测量结果（具体地是1st_vst_map_2nd）、SEPP1水平的测量结 果、PRDX2水平的测量结果、和QSOX1水平的测量结果。该模型具有以 下格式：

风险得分=0.0745*1st_vst_map_2nd+1.61*fh_petxcardio-1.83* log₁₀(PRDX2)-6.97*log₁₀(SEPP1)-4.97*log₁₀(QSOX1)+10.9* log₁₀(IGFALS)-22.8

该模型具有0.84的AUC（95%的置信区间：0.77-0.90）。

为了对比，还计算了模型个体组成的接收-操作特征曲线下的表观面 积，即它们的个体特性（MedCalc package,MedCalc Software bvba, Belgium）：

生物标志物/参数 AUC 95%CI 1st_vst_map_2nd 0.73 0.65至0.8 fh_petxcardio 0.67 0.59至0.75 PRDX2 0.59 0.51至0.67 SEPP1 0.56 0.48至0.64 QSOX1 0.60 0.51至0.68 IGFALS 0.69 0.61至0.77

在15+/-1周时，在该实验中评价的组H的实施方式由以下生物标志 物和参数组成：IGFALS水平的测量结果、fh_petxcardio的得分、血压（尤 其是1st_vst_map_2nd）的测量结果、ENG水平的测量结果、和QSOX1 水平的测量结果。该模型具有以下格式：

风险得分=0.0887*1st_vst_map_2nd+1.89*fh_petxcardio+8.74* log₁₀(ENG)-9.12*log₁₀(QSOX1)+6.62*log₁₀(IGFALS)-6.71

该模型具有0.85（95%的可靠区间：0.78-0.92）的AUC。

为了对比，还计算了模型个体组成的接受-操作特征曲线下的表观面 积，即它们的个体特性（MedCalc package,MedCalc Software bvba, Belgium）：

生物标志物/参数 AUC 95%CI 1st_vst_map_2nd 0.73 0.65至0.8 fh_petxcardio 0.67 0.59至0.75 ENG 0.61 0.53至0.69

生物标志物/参数 AUC 95%CI QSOX1 0.60 0.51至0.68 IGFALS 0.69 0.61至0.77

数据还显示如在上述实施例中和更一般地在整个申请中教导的测试 组中可以包含任何血压参数的测量结果（例如，第一次或第二次测量的舒 张压、收缩压或平均动脉压）。在15+/-2或1周的测试组中可以优选 1st_vst_map_2nd（即在15周访视时，由第二次测量的血压计算的平均动 脉压），并且在20+/-2或1周的测试组中可以优选2nd_vst_map_1st（即在 20周访视时，由第一次测量的血压计算的平均动脉压）。

实施例5：使用表3的病例-对照集合的结果

如注意到的，在表1和表2中描述的两组研究群中的基线特性的对比 表明这些群在某些方面表现出不同。因为其可以优选使用越过几个或者甚 至许多不同的人群仍保持可比较的相关性的先兆子痫预测组，显示这些组 在如表3中捕获的组合群中充分预测先兆子痫。因此，使用如在表3中捕 获的组合病例-对照群获得了该实施例中的数据和分析。该实施例进一步 特别地关注于预测妊娠约20周时先兆子痫。

在该实施例中，应用下列非限制性标准以将认为或归类成功的先兆子 痫预测模型：

1.对于一般组：

-AUC≥0.75，组由3、4、5或6个成员（生物标志物、临床参数）组 成，全部的成员必须显著的加到组中。

2.对于“rule-in”组：

a.AUC≥0.75，组由3、4、5或6个成员（生物标志物、临床参数） 组成，全部的成员必须显著的加到组中；和

b.PPV标准：ROC曲线需要在具有敏感度≥0.5（≥50%的检测率） 的PPV≥0.2区域中有点，

i.对于在0.5的敏感性下的最大PPV对组排序

ii.对于在0.2PPV下的最高敏感度对组排序。

3.对于早产型先兆子痫的预测：

-在对于组成员（生物标志物、参数）的权重因子没有改变的情况下， 将如在上述条款1和2下选定的组应用于预测亚群早产型先兆子痫（即， 分为早产型先兆子痫与全部的非先兆子痫对照）。与对于全部先兆子痫预 测的AUC值（p-值AUC差别≤0.05）相比，对于早产型先兆子痫预测， 具有明显好的AUC值的组被认为是成功的。

4.对于全部受试者和对非肥胖的受试者：

-在全部受试者中和非肥胖的受试者中，将条款1、2或3下解释的 标准应用于先兆子痫预测。

得到的数据概括在下面的表4至表11中，其中：

-字段“亚组”是指对其进行预测的受试者，即对于全部受试者（“全 部”）或对于非肥胖的受试者（“非肥胖”）；

-字段“PPV过滤”是指对它们是（“有”）否（“无”）适合作为“rule-in” 组评估组；

-字段“适于早产”是指组是否适于预测早产型先兆子痫（“是”）或适 于全部先兆子痫（“否”）；

-字段“#组成”表示组成组的组成或成员（生物标志物、临床参数） 的数量；

-字段“组的数量”表示根据在应用上面阐明的领域中限定的参数之 时的上述标准认为成功的组的数量，如每个表中所说明的；

-在每个表格的随后区域列出了出现在组中的成员（标志物、临床参 数），并指出在其中存在各个标志物或参数的成功组的数量；在其中存在 给定标志物或参数的组的数量越多，越优选该标志物或参数可以包含到体 现本发明原理的成功组中。

以下每个表指定了几个示例性但非限制性的组，其根据该表在测试中 具有最好的性能。

该实施例中的全部组都包括胰岛素样生长因子结合蛋白复合酸不稳 定亚单位（IGFALS）水平的测量结果、孕产妇历史参数‘父亲患有（即， 受试者的父亲患有）缺血性心脏病’（father_any_ihd）的得分、和血压的 测量结果。

表4.在全部受试者中的先兆子痫的预测；无PPV标准

亚组 全部       PPV过滤 无       应用于早产 否                 #组成 n=3 n=4 n=5 n=6           组的数量 4 29 115 103           bb_hdl 0 6 24 24 bb_total_hdl_ratio 0 0 13 4 bmi 0 0 15 51 代谢_综合征 0 6 24 24 father_any_ihd 4 29 115 103 fh_pet 0 0 0 0 1st_vst_dbp_2nd 1 6 29 23 1st_vst_sbp_2nd 1 10 30 34 1st_vst_map_2nd 1 8 32 33 2nd_vst_map_2nd 1 5 24 13 ADAM12 0 11 78 50 s-ENG 0 5 37 78 LCAT 0 0 0 2 SPINT1 0 0 5 10 HSPG2 0 0 0 8 SEPP1 0 0 11 10 IGFALS 4 29 115 103 MUC18 0 1 23 32 ROBO4 0 0 0 11 ENPP2 0 0 0 3 S10A9 0 0 0 2

表4中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T4.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、father_any_ihd 的得分和1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.75。

按下式计算组T4.1的示例性风险得分：风险得分=1.2* father_any_ihd+3.1*1st_vst_map_2nd+2.8*log₁₀MC004–22。MC004表 示对于IGFALS的LAELPADALGPLQR肽的MASSterclass示值读数。

如前所述，在该类风险得分中使用的权重因子可能取决于用于量化生 物标志物和测量或对参数评分的方法学，并且当后者提供关于一种或多种 标志物和参数的期望的组的组成的信息时，可以由技术人员确定对每个具 体的实验设置和数据设定。因此，以下将不需要且不列出计算风险得分的 特定的公式。

T4.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.77。

T4.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 MUC18水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.80。

T4.4：以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 MUC18水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。AUC=0.81。

表5.在全部受试者中的先兆子痫的预测；使用PPV标准

表5中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T5.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、father_any_ihd 的得分和1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.75，在50%的敏感性下PPV=23%， 在20%的PPV下敏感性=50%。

T5.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.77，在50% 的敏感性下PPV=23%。

T5.3：由以下各项的测量结果组成的4个成员的组：IGFALS水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。在20%的 PPV下敏感性=56%。。

T5.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 MUC18水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.80。

T5.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_dbp_2nd的值。在50% 的敏感性下PPV=26%。

T5.6：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_dbp_2nd的值。在20% 的PPV下敏感性=66%。

T5.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 MUC18水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。AUC=0.81。

T5.8：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 MUC18水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd 的值。在50%的敏感性下PPV=28%。

T5.9：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd 的值。在20%的PPV下敏感性=70%。

表6.在全部受试者中的先兆子痫的预测；无PPV标准；应用于早产型先 兆子痫。

亚组 全部       PPV过滤 无       用于早产 是                 #组成 n=3 n=4 n=5 n=6           组的数量 0 0 15 16           bb_hdl     0 0 bb_total_hdl_ratio     1 0 代谢_综合征     9 8 father_any_ihd     15 16 fh_pet     0 0 1st_vst_dbp_2nd     4 1 1st_vst_sbp_2nd     1 6 1st_vst_map_2nd     3 2 2nd_vst_map_2nd     7 7 ADAM12     7 13 s-ENG     8 16 SPINT1     3 8 HSPG2     0 0 SEPP1     1 1 IGFALS     15 16 MUC18     1 1 ROBO4     0 1

表6中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T6.1：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产 型PE的AUC=0.89，全部PE的AUC=0.79。

T6.2：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd 的值。早产型PE的AUC=0.90，全部PE的AUC=0.80。

表7.在全部受试者中的先兆子痫的预测；有PPV标准；应用于早产型先 兆子痫。

表7中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T7.1：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产 型PE的AUC=0.89，全部PE的AUC=0.79，在50%的敏感性下的 PPV=25%，在20%的PPV下的敏感性=66%。

T7.2：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、 1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的AUC=0.90，全部PE放热AUC=0.81。

T7.3：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 SEPP1水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、2nd_vst_map_2nd 的值。在50%敏感性下PPV=24%。

T7.4：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、代谢综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd 的值。在20%的PPV下敏感性=70%。

表8.在非肥胖者中的先兆子痫的预测；无PPV标准

表8中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T8.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、father_any_ihd 的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.77。

T8.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.82。

T8.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.84。

T8.4：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd 的值。AUC=0.91。

表9.在非肥胖者中的先兆子痫的预测；有PPV标准

表9中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包含：

T9.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、father_any_ihd 的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.77，在50%的敏感性下PPV=21%， 在20%的PPV下敏感性=52%。

T9.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.82。

T9.3：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。在50%的敏感性下PPV= 32%。

T9.4：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。在20%的PPV下敏感性= 61%。

T9.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.84。

T9.6：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。在50%敏 感性下的PPV=34%。

T9.7：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。在20%PPV 下的敏感性=64%。

T9.8：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd 的值。AUC=0.86。

T9.9：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的 值。在50%敏感性下的PPV=48%.

T9.10：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd 的值。在20%PPV下的敏感性=69%。

表10.在非肥胖者中的先兆子痫的预测；无PPV标准；应用于早产型先 兆子痫

亚组 非肥胖       PPV过滤 无       用于早产 是                 #组成 n=3 n=4 n=5 n=6           组的数量 1 12 25 26           代谢_综合征 0 0 2 8 father_any_ihd 1 12 25 26 fh_pet 0 0 0 0 1st_vst_dbp_2nd 0 3 8 10 1st_vst_sbp_2nd 1 4 8 6 1st_vst_map_2nd 0 3 6 5 2nd_vst_map_2nd 0 2 3 5 ADAM12 0 4 9 22 s-ENG 0 8 24 26 SEPP1 0 0 1 3 IGFALS 1 12 25 26 MUC18 0 0 7 11 ROBO4 0 0 7 8

表10中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包含：

T10.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、father_any_ihd 的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产型PE的AUC=0.86，全部PE的AUC= 0.76。

T10.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产型PE的AUC=0.92， 全部PE的AUC=0.80。

T10.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产型 PE的AUC=0.95，全部PE的AUC=0.84。

T10.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd 的值。早产型PE的AUC=0.96，全部PE的AUC=0.86。

表11.在非肥胖者中的先兆子痫的预测；有PPV标准；应用于早产型先 兆子痫。

亚组 非肥胖       PPV过滤 有       用于早产 是                 #组成 n=3 n=4 n=5 n=6           组的数量   8 21 25           代谢_综合征   0 1 8 father_any_ihd   8 21 25 fh_pet   0 0 0 1st_vst_dbp_2nd   3 7 10 1st_vst_sbp_2nd   3 7 6 1st_vst_map_2nd   2 6 5 2nd_vst_map_2nd   0 1 4 ADAM12   4 7 21 s-ENG   4 21 25 SEPP1   0 1 3 IGFALS   8 21 25 MUC18   0 6 10 ROBO4   0 6 8

表11中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T11.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产型PE的AUC=0.92， 全部PE的AUC=0.80，在20%PPV下的敏感性=61%.

T11.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ADAM12 水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。在50%敏感性下的 PPV=32%。

T11.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18 水平、s-ENG水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。早产 型PE的AUC=0.95，全部PE的AUC=0.84。

T11.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。在50%敏 感性下的PPV=34%。

T11.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水平、 ROBO4水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd的值。在20%PPV 下的敏感性=63%.

T11.6：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_map_2nd 的值。早产型PE的AUC=0.96，全部PE的AUC=0.86，在20%PPV下 的敏感性=69%。

T11.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SEPP1水平、 s-ENG水平、ADAM12水平、father_any_ihd的得分、1st_vst_sbp_2nd的 值。在50%敏感性下的PPV=48%。

实施例6：使用表3的病例-对照集合的进一步的结果

使用表3中捕获的组合的病例-对照群也已经获得该实施例中的数据 和分析。该实施例进一步特别地关注于在妊娠约20周时预测先兆子痫。

在该实施例中，将下列非限制性标准应用于考虑或归类成功的先兆子 痫预测模型：

1.对于一般组：

-AUC≥0.75，组由3、4、5或6个成员（生物标志物、临床参数）组 成，全部的成员必须显著的加到组中。

2.对于“rule-in”组：

a.AUC≥0.75，组由3、4、5或6个成员（生物标志物、临床参数） 组成，全部的成员必须显著的加到组中；和

b.PPV标准：ROC曲线需要在敏感度≥0.5（≥50%的检测率）的PPV ≥0.2的区域中有点，

i.在0.5的敏感性下对于最大PPV对组排序

ii.在0.2PPV下对于最高敏感度对组排序。

3.对于早产型先兆子痫的预测：

-在对于组成员（生物标志物、参数）的权重因子没有改变的情况下， 将如在上述条款1和2下选定的组应用于预测亚群早产型先兆子痫（即， 分为早产型先兆子痫与全部的非先兆子痫对照）。与对于全部先兆子痫预 测的AUC值（p-值AUC差别≤0.05）相比，对于早产型先兆子痫预测， 具有明显好的AUC值的组被认为是成功的。

4.对全部受试者和对非肥胖的受试者：

-在全部受试者中和非肥胖的受试者中，将在条款1、2或3下解释 的标准应用于先兆子痫预测。

得到的数据概括在下面的表12至表19中，其中：

-字段“亚组”是指对其进行预测的受试者，即对与全部受试者（“全 部”）或对于非肥胖的受试者（“非肥胖”）；

-字段“PPV过滤”是指对它们（“有”）否（“无”）适合作为“rule-in” 组评估组；

-字段“适于早产”是指组是否适于早产型先兆子痫（“是”）或适于 全部先兆子痫（“否”）；

-字段“#组成”表示组成组的组成或成员（生物标志物、临床参数） 的数量；

-字段“组的数量”表示根据在应用上面阐明的领域中限定的参数之 时的上述标准认为成功的组的数量，如每个表中所说明的；

-在每个表格的随后区域列出了出现在组中的成员（标志物、临床参 数），并指出在其中存在各个标志物或参数的成功组的数量；在其中存在 给定标志物或参数的组的数量越多，越优选该标志物或参数可以包含到体 现本发明原理的成功组中。

以下每个表指定了几个示例性但非限制性的组，其根据该表在测试中 具有最好的性能。

与使用表1的病例-对照群的实验相比，在表3的群中，孕产妇历史 参数‘患有早期PE的母亲或姐妹和/或患有缺血性心脏病的父亲’的相对 重要性已经略微降低，这使得能够定义不含有该参数得分的组。

因此，该实施例中的全部组都包括胰岛素样生长因子结合蛋白复合酸 不稳定亚单位（IGFALS）水平的测量结果和血压的测量结果。

表12.全部受试者中先兆子痫的预测；无PPV标准

表12中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T12.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、代谢_综合 征的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.75。

T12.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.78。

T12.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.80。

T12.4：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的 值。AUC=0.81。

表13.全部受试者中先兆子痫的预测；有PPV标准

表13中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T13.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.77，在50%敏 感性下的PPV=23%。

T13.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、代谢_综合征的得分、1st_vst_dbp_2nd的值。在20%PPV下的敏感性 =61%。

T13.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、代谢综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.80。

T13.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。在50%敏 感性下的PPV=24%。

T13.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。在20%PPV 下的敏感性=61%。

T13.6：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的 值。AUC=0.81。

T13.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、ADAM12水平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。在50%敏感性下的PPV=27%。

T13.8：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。在20%PPV下的敏感性=63%。

表14.全部受试者中先兆子痫的预测；无PPV标准；用于早产型先兆子痫

表14中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T14.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的AUC=0.88， 全部PE的AUC=0.77。

T14.2：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、2nd_vst_map_2nd的值。早产型PE的 AUC=0.89，全部PE的AUC=0.75。

T14.3：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。早产型PE的AUC=0.91,全部PE的AUC=0.80.

表15.全部受试者中先兆子痫的预测；有PPV标准；用于早产型先兆子痫

表15中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T15.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的AUC=0.88, 全部PE的AUC=0.77，在50%敏感性下的PPV=23%，在20%PPV下的 敏感性=66%。

T15.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、代谢_综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd的值。在20%PPV下的敏感性 =61%.

T15.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s-ENG水平、代谢综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE 的AUC=0.89，全部PE的AUC=0.79，在20%PPV下的敏感性=61%。

T15.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s-ENG水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd的值。在50%敏 感性下的PPV=24%。

T15.5：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值早产型PE的AUC=0.91，全部PE的AUC=0.80。

T15.6：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_sbp_2nd 的值。在50%敏感性下的PPV=25%。

T15.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s_ENG水平、ADAM12水平、代谢_综合征的得分、1st_vst_map_2nd 的值。在20%PPV下的敏感性=60%。

表16.非肥胖的受试者中的先兆子痫的预测；无PPV标准

表16中确定的这些中代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T16.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、ADAM12 水平、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.79。

T16.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、1st_vst_map_2nd的值AUC=0.81。

T16.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.83。

T16.4：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、s_ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。 AUC=0.85。

表17.非肥胖的受试者中的先兆子痫的预测；有PPV标准

表17中确定的这些中的代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T17.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、ADAM12水平、1st_vst_sbp_2nd的值。AUC=0.81。

T17.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s-ENG水平、1st_vst_map_2nd的值。在50%敏感性下的PPV=29%， 在20%PPV下的敏感性=58%。

T17.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s_ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。AUC=0.84。

T17.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。在50%敏感性 下的PPV=32%。

T17.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SPINT1水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。在20%PPV下 的敏感性=63%。

T17.6：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、ADAM12水平、s-ENG水平、1st_vst_map_2nd的值。 AUC=0.85。

T17.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、SEPP1水平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。 在50%敏感性下的PPV=38%。

T17.8：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_dbp_2nd的 值。在20%PPV下的敏感性=66%。

表18.非肥胖的受试者中的先兆子痫的预测；无PPV标准；用于早产型 先兆子痫

表18中确定的这些中的代表性但非限制性的特别成功的组包括：

T18.1：由以下各项组成的3个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、1st_vst_sbp_2nd的值。早产型PE的AUC=0.90，全部PE的AUC=0.78。

T18.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的AUC=0.93，全部 PE的AUC=0.81。

T18.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的 AUC=0.95，全部PE的AUC=0.84。

T18.4：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SPINT1水平、ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_dbp_2nd的值。早 产型PE的AUC=0.96，全部PE的AUC=0.84。

表19.非肥胖的受试者中的先兆子痫的预测；有PPV标准；用于早产型先兆子痫

表19中确定的这些中的代表性但非限制性特别成功的组包括：

T19.1：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、s-ENG水 平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的AUC=0.91， 全部PE的AUC=0.80。

T19.2：由以下各项组成的4个成员的组：IGFALS水平、ROBO4水 平、s_ENG水平、1st_vst_map_2nd的值。在50%的敏感性下PPV=29%， 在20%的PPV下敏感性=58%。

T19.3：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。早产型PE的 AUC=0.95，AUC全部PE=0.84。

T19.4：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS level水平、SPINT 水平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。在50%的敏 感性下PPV=32%。

T19.5：由以下各项组成的5个成员的组：IGFALS水平、SPINT水 平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_map_2nd的值。20%的PPV下 敏感性=63%。

T19.6：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SPINT1水平、s_ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_sbp_2nd的值。 早产型PE的AUC=0.96，全部PE的AUC=0.84，50%的敏感性下PPV= 34%。

T19.7：由以下各项组成的6个成员的组：IGFALS水平、MUC18水 平、SEPP1水平、s-ENG水平、ADAM12水平、1st_vst_dbp_2nd的值。 20%的PPV下敏感性=66%。