KCL在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用

摘要

本发明公开了KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，包括以下步骤：KCl溶液的配制、刺参幼虫的诱导、普通海水中的培养、观察计数以及计算附着变态率和附着变态提高率；前述KCl溶液的浓度为10-50mmol/L，诱导培养的持续时间为8-24h，或者浓度为100-500mmol/L，诱导培养的持续时间为10-30min。本发明的有益之处在于：KCl不仅无毒副作用，不会对刺参幼虫产生不良的影响，而且其价格低廉，大大降低了人工诱导附着变态的成本；刺参樽形幼虫的附着变态提高率最高可达30％，处理效果更加显著，可以更好的增加幼虫变态的同步性，减少刺参幼虫在附着变态中的死亡，提高刺参苗种出苗率，从而增加了刺参育苗收益，对于促进刺参养殖业的健康发展具有重要意义。

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种人工诱导刺参幼虫附着变态的处理方法，具体涉及一种用KCl人工诱导刺参幼虫附着变态的处理方法，属于水产动物育苗和养殖技术领域。 

背景技术

刺参(Apostichopus japonicus Selenka)，属棘皮动物门，刺参纲(Holothuroidea)，刺参科(Stichopodidae)，仿刺参属(Apostichopus)，具有很高的营养保健和医用价值。刺参是我国水产养殖业内产值、利润最高的种类之一。刺参幼虫发育到一定阶段，具有附着变态的能力，遇到合适的附着基，在外界物质的刺激下，完成附着变态。变态过程是其从幼虫向成体转变的一个重要发育阶段。在刺参苗种生产中，幼虫在附着变态阶段对外界环境因子的变化比较敏感，最易引起幼虫大批量死亡。幼虫附着变态的成功与否往往决定着出苗量和育苗的成败。因此，如何提高幼虫的附着变态率，缩短幼虫附着变态时间，减少死亡率成为苗种生产中一个亟待解决的问题。 

对贝类、多毛类、缢虫纲和海胆纲等海洋无脊椎动物的研究表明，动物幼虫的附着变态是可以被诱导的。例如，儿茶酚胺化合物、氨基酸类化合物等可以在一定程度上诱导海洋无脊椎动物幼虫的附着变态；Ca²⁺、Rb⁺和Cs⁺等金属阳离子对海洋无脊椎动物幼虫的附着变态也有一定诱导作用。但是，目前还未见KCl用于诱导刺参幼虫附着变态的报道。 

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可以增加刺参幼虫变态的同步性、减少刺参幼虫在附着变态过程中的死亡、提高附着变态率的用KCl人工诱导刺参幼虫附着变态的方法。 

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案： 

KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，包括以下步骤： 

(一)、KCl溶液的配制：以海水溶解KCl配成1mol/L的母液，母液以海水稀释配成工作液，待用； 

(二)、刺参幼虫的诱导：用200目筛绢取发育到樽形幼虫时期的刺参幼虫，放到步骤(一)中的工作液中充氧培养，以未添加KCl的普通海水为对照； 

(三)、普通海水中的培养：将经步骤(二)诱导后的幼虫用200目筛绢捞出，放到设置有聚乙烯附着板的普通海水中继续培养24h，饵料为鼠尾藻和无菌底泥，每组设计三个平行； 

(四)、观察计数：统计聚乙烯附着板上刺参幼虫摄食后所留空斑的数目； 

(五)、计算附着变态率和附着变态提高率：附着变态率＝(附着变态幼虫数/总幼虫数)×100％；附着变态提高率＝实验组幼虫变态附着率平均值-对照组幼虫附着变态率平均值。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(一)中，工作液的浓度为10-50mmol/L。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(二)中，诱导培养的持续时间为8-24h。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(一)中，工作液的浓度为100-500mmol/L。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(二)中，诱导培养的持续时间为10-30min。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(二)中，幼虫的培养密度为200个/L。 

前述的KCl在人工诱导刺参幼虫附着变态中的应用，其特征在于，在步骤(三)中，幼虫的培养密度为200个/L。 

本发明的有益之处在于：KCl不仅无毒副作用，不会对刺参幼虫产生不良的影响，而且其价格低廉，大大降低了人工诱导附着变态的成本；刺参樽形幼虫的附着变态提高率最高可达30％，处理效果更加显著，可以更好的增加幼虫变态的同步性，减少刺参幼虫在附着变态中的死亡，提高刺参苗种出苗率，从而增加了刺参育苗收益，对于促进刺参养殖业的健康发展具有重要意义。 

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。 

实施例1-9 

一、KCl溶液的配制：以海水溶解KCl配成1mol/L的母液，母液以海水稀释配成工作液，工作液的浓度依次为10mmol/L、30mmol/L、50mmol/L，取1L工作液放置于2L烧杯中待用。 

二、刺参幼虫的诱导：用200目筛绢取发育到樽形幼虫时期的刺参幼虫，放到步骤一中的工作液中充氧培养，每个烧杯中放置200个幼虫，诱导培养的持续时间为8-24h，以未添加KCl的普通海水为对照。 

三、普通海水中的培养：将经步骤二诱导后的幼虫用200目筛绢捞出，放到设置有聚乙烯附着板的普通海水中继续培养24h，幼虫的培养密度仍为200个/L，饵料为鼠尾藻和无菌底泥，每组设计三个平行。 

四、观察计数：统计聚乙烯附着板上刺参幼虫摄食后所留空斑的数目。 

五、计算附着变态率和附着变态提高率：附着变态率＝(附着变态幼虫数/总幼虫数)×100％；附着变态提高率＝实验组幼虫变态附着率平均值对照组幼虫附着变态率平均值。 

低浓度KCl在不同诱导时间对刺参樽形幼虫附着变态提高率的影响详见表1。 

表1低浓度KCl在不同诱导时间对刺参樽形幼虫附着变态提高率的影响 

实施例10-15 

一、KCl溶液的配制：以海水溶解KCl配成1mol/L的母液，母液以海水稀释配成工作液，工作液的浓度依次为100mmol/L、300mmol/L、500mmol/L，取1L工作液放置于2L烧杯中待用。 

二、刺参幼虫的诱导：用200目筛绢取发育到樽形幼虫时期的刺参幼虫，放到步骤一中的工作液中充氧培养，每个烧杯中放置200个幼虫，诱导培养的持续时间为10-30min，以未添加KCl的普通海水为对照。 

三、普通海水中的培养：将经步骤二诱导后的幼虫用200目筛绢捞出，放到设置有聚乙烯附着板的普通海水中继续培养24h，幼虫的培养密度仍为200个/L，饵料为鼠尾藻和无菌底泥，每组设计三个平行。 

四、观察计数：统计聚乙烯附着板上刺参幼虫摄食后所留空斑的数目。 

五、计算附着变态率和附着变态提高率：附着变态率＝(附着变态幼虫数/总幼虫数)×100％；附着变态提高率＝实验组幼虫变态附着率 平均值-对照组幼虫附着变态率平均值。 

高浓度KCl在不同诱导时间对刺参樽形幼虫附着变态提高率的影响详见表2。 

表2高浓度KCl在不同诱导时间对刺参樽形幼虫附着变态提高率的影响 

由实施例1-15的统计数据可知，以不同浓度的KCl诱导刺参樽形幼虫，幼虫的附着变态率有了显著的提高，尤其是用浓度为30mmol/L的KCl诱导刺参樽形幼虫24h，附着变态提高率可高达30％以上，其对刺参樽形幼虫附着变态的诱导效果最好。 

本发明采用KCl作为诱导剂，其不仅无毒副作用，不会对刺参幼虫产生不良的影响，而且其价格低廉，大大降低了人工诱导附着变态的成本；刺参樽形幼虫的附着变态提高率最高可达30％，处理效果更加显著，可以更好的增加幼虫变态的同步性，减少刺参幼虫在附着变态中的死亡，提高刺参苗种出苗率，从而增加了刺参育苗收益，对于 促进刺参养殖业的健康发展具有重要意义。 

需要说明的是，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。