长柄山姜化合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种长柄山姜化合物及其制备方法和应用。本发明提供了从长柄山姜中分离得到的化合物的化学结构式，所述化合物从长柄山姜根部制备得到，具有杀线虫活性，可广泛应用于制备杀线虫剂。本发明制备方法简单，制备成本低，应用前景广阔。

说明书

技术领域

本发明涉及农药和植物化学技术领域，具体涉及从植物长柄山姜中制备得到 化合物及其制备方法和应用。

背景技术

植物病原线虫主要寄生在蔬菜、粮食作物、经济作物、果树等多种寄主植物 上，严重影响其产量和品质，还加重了枯萎病、根腐病等土传性真菌病害和部分 细菌病害的发生。化学防治是当今防治植物病原线虫最普遍的方法，目前常用的 杀线虫剂主要有溴甲烷、克百威、噻唑磷、阿维菌素，但其中一些种类使用成本 高、毒性大、对环境污染严重。因此，研究、开发新型高效生物杀线虫剂是植物 病原线虫防治发展的趋势。

长柄山姜（Alpinia kwangsiensis）是姜科山姜属多年生草本植物，主要分 布在我国的广东、广西、贵州、云南等地区，植物资源丰富。该植物生于山谷中 林下阴湿处，海拔580～680处。其根茎可治脘腹冷痛、胃寒呕吐。到目前为止， 仅国内学者纳智等对长柄山姜根茎挥发油成分进行了研究，尚未见到从长柄山姜 （Alpinia kwangsiensis）分离到5,6-dehydrokawain（5,6-去氢卡瓦胡椒素）的 报道。5,6-dehydrokawain有多种药理活性，如抗氧化、肿瘤细胞毒、抑菌、抑 制血小板凝聚等活性，但未见其作为植物源农药进行线虫毒杀剂的报道。

发明内容

本发明目的是克服现有技术的不足，提供一种从植物长柄山姜中制备得到的 化合物。

本发明的另一目的是提供所述化合物的制备方法。具体是提供一种从长柄山 姜中制备化合物5,6-dehydrokawain的方法。

本发明还有一个目的就是提供所述化合物的应用。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

1、一种长柄山姜化合物，其化学结构式如式I所示：

式I。

本发明同时提供了上述化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）采集长柄山姜根部，阴干后粉碎，过40目筛作为原材料；

（2）用有机溶剂提取粉碎后的长柄山姜根部，提取物减压浓缩制得膏状提取物；

（3）将膏状提取物溶解后用有机溶剂萃取，得到萃取产物；

（4）萃取产物经常压硅胶柱层析后收集馏分X，馏分X再经硅胶常压柱层析得到 纯化合物。

步骤（2）所述有机溶剂为分析纯的甲醇；所述提取是冷浸提取3次，每次1 天。

步骤（3）所述有机溶剂为乙酸乙酯。

步骤（4）所述硅胶为100－200目，所述常压柱层析采用石油醚:丙酮的体积 比＝9:1～1:1梯度洗脱；其中馏分X为石油醚:丙酮的体积比＝7:3洗脱获得，所 述纯化合物为馏分X再经丙酮过滤得到。

本发明同时提供了上述化合物在制备杀线虫剂方面的应用。

本发明的有益效果是：

本发明首次从长柄山姜中分离得到化合物5,6-dehydrokawain，首次研究出 该化合物对线虫具有良好的毒杀活性，为进一步研究长柄山姜植物作为杀线虫剂 植物资源提供重要的启示。

本发明制备方法简单，制备成本较低，将增加长柄山姜的经济和社会效益， 应用前景广阔。

具体实施方式

以下实施例可以使本领域技术人员更全面理解本发明，但并不构成对本发明 的限制。以下各实施例无特别说明，为常规方法。

实施例1

本发明所述长柄山姜化合物（5,6-dehydrokawain），其化学结构式如式I 所示：

式I。

本发明所述长柄山姜化合物5,6-dehydrokawain的制备

（1）采集长柄山姜根部，阴干后粉碎，过40目筛作为原材料；

（2）用有机溶剂分析纯的甲醇提取粉碎后的长柄山姜根部，所述提取是冷 浸提取3次，每次1天，提取物减压浓缩制得膏状提取物；

（3）将膏状提取物溶解后用有机溶剂乙酸乙酯萃取，得到萃取产物；

（4）萃取产物经常压硅胶柱层析后收集馏分X，馏分X再经常压硅胶柱层析 得到纯化合物；所述硅胶为100目，所述常压柱层析采用石油醚:丙酮的体积比＝ 9:1～1:1梯度洗脱；其中馏分X为石油醚:丙酮的体积比＝7:3洗脱获得，纯化合 物为馏分X再经丙酮过滤得到。

本发明所述长柄山姜化合物可以通过上述方法制备得到。

本发明所述的长柄山姜化合物的结构鉴定的波谱数据见表1。

表1长柄山姜化合物的¹H和¹³C核磁共振数据[DMSO]

实施例3本发明长柄山姜化合物对根结线虫的毒杀活性

使用药液浸渍法进行活性测定，先对各种玻璃器皿及器具灭菌，取长柄山姜 化合物10mg，以蒸馏水(含5%甲醇)，配制成药剂母液，将配制好的线虫悬液7ml(50 条)，加入到培养皿中，加入相应量的药剂母液，使每个处理的药液浓度分别为 200μg/ml，100μg/ml，50μg/ml，四次重复，然后将做好的培养皿放入到25 ℃，RH60%黑暗的培养箱中培养，于72h用体式显微镜观察，用针刺法确定线虫死 亡条数，计算线虫死亡率和校正死亡率，并参照杀线虫活性强弱五级标准进行分 级。具体分级标准为：“-”表示无活性，校正死亡率≤10%；“+”表示弱活性， 校正死亡率为10%～30%；“++”表示中等活性，校正死亡率为30%～50%；“+++”表 示较强活性，校正死亡率为50%～80%；“++++”表示强活性，校正死亡率＞80%。

表2长柄山姜化合物对根结线虫的毒杀活性测定结果

以试验浓度处理时，供试药液对根结线虫二龄幼虫的毒杀活性如表2。处理 后72h，线虫校正死亡率分别为82.5%、63.8%、52.1%。其中，200μg/ml药液对 根结线虫表现出强毒杀活性。