法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2015-11-25
授权
授权
2013-05-15
实质审查的生效 IPC(主分类):C07D213/82 申请日:20110429
实质审查的生效
2013-03-13
公开
公开
技术领域
本发明一般地涉及包含N-(4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙 氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶-3-羧酰胺及其盐的药物组合物，和使 用所述药物组合物治疗癌症和/或其它增殖性疾病的方法。还披露了N-(4-(2- 氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1，2-二氢吡 啶-3-羧酰胺的晶体形式和制备N-(4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4- 乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶-3-羧酰胺晶体形式的方法。
背景技术
Met(也称为肝细胞生长因子受体(HGFR))主要表达在上皮细胞中，但也 已在内皮细胞、成肌细胞(myoblast)、造血细胞(hematopoietic cell)和运动神经 元中鉴定出Met。已将肝细胞生长因子的过度表达和Met的激活与多种不同 肿瘤类型的发作和进展及转移性疾病的促进关联起来。
化合物N-(4-(2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯 基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶-3-羧酰胺具有式(I)的结构：
以及本申请称其为“化合物(I)”。化合物(I)、制备化合物(I)的方法和使用化合 物(I)的治疗方法披露在美国专利申请公开文本2008/0114033A1中。该参考 文献已转让给本发明的受让人，以及将其全部内容引入本申请作为参考。WO 2009/094427(PCT/US2009/031665)也披露了制备化合物(I)的方法。
化合物(I)可用于治疗Met相关的癌症。然而，在使用化合物(I)治疗患者 的疾病之前，必须将它配制成可给药于患者的药物组合物；例如，配制成适 于口服、粘膜、肠胃外或透皮给药的剂型。用于口服给药的制剂是优选的， 因为它们比其它制剂更方便和更易于给药。此外，口服给药途径避免肠胃外 给药的疼痛和不舒服。因此，用于口服给药的制剂为患者所优选，以及通常 导致较好的患者对给药方案的依从性。
通常，在制备药物组合物中，寻找具有期望的性质如溶出速度、溶解度、 生物利用度和/或贮存稳定性的平衡的活性成分的形式。例如，寻找具有足够 的稳定性、溶解度和生物利用度的活性成分的形式，以防止足够可溶和可生 物利用的形式在药物组合物的制造、制备和/或贮存期间转化成具有不期望的 溶解度和/或生物利用度特征的其它形式。另外，也可寻找在例如制备过程中 允许分离和/或纯化活性成分的活性成分的形式。
本发明提供至少一种形式的化合物(I)，其意料不到地提供药物组合物中 所追寻的性质的平衡。本发明还涉及其它重要方面。
发明内容
本申请描述了化合物(I)的第一晶体形式：
其包括形式N-1。
本申请描述了化合物(I)的第二晶体形式，其包括形式H1.5-2。
本申请描述了化合物(I)的单盐酸盐的第一晶体形式，其包括形式H-1。
本申请描述了化合物(I)的单盐酸盐的第二晶体形式，其包括形式N-2。
本申请描述了化合物(I)的磷酸盐。
本申请还描述了至少一种药物组合物，其包含至少一种化合物(I)的晶体 形式和至少一种可药用载体和/或稀释剂。
本申请还描述了用于治疗癌症和/或其它增殖性疾病的至少一种方法，其 包括向需要的患者给药一定量的化合物(I)，其中化合物(I)或其盐作为晶体形 式提供。
附图说明
下面参照附图，说明本发明。
图1示出化合物(I)的N-1形式的观察到的粉末x-射线衍射(PXRD)图(在 室温(r.t.))和模拟的粉末x-射线衍射(PXRD)图(在约25℃的温度(T))(CuKα λ＝1.5418)。
图2示出化合物(I)的H1.5-2形式的观察到的PXRD图(在室温)、混合模 拟的PXRD图(在室温)和模拟的PXRD图(在约-30℃)(CuKαλ＝1.5418)。
图3示出化合物(I)的单盐酸盐的H-1形式的观察到的PXRD图(在室温) 和模拟的PXRD图(在约25℃)(CuKαλ＝1.5418)。
图4示出化合物(I)的单盐酸盐的N-2形式的观察到的PXRD图(在室温) (CuKαλ＝1.5418)。
图5示出化合物(I)的磷酸盐的观察到的PXRD图(在室温)(CuKα λ＝1.5418)。
图6示出化合物(I)的N-1形式的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
图7示出化合物(I)的H1.5-2形式的DSC热分析图。
图8示出化合物(I)的盐酸盐的H-1形式的DSC热分析图。
图9示出化合物(I)的盐酸盐的N-2形式的DSC热分析图。
图10示出化合物(I)的磷酸盐的DSC热分析图。
图11示出化合物(I)的N-1形式的热重分析(TGA)热分析图。
图12示出化合物(I)的H1.5-2形式的TGA热分析图。
图13示出化合物(I)的盐酸盐的H-1形式的TGA热分析图。
图14示出化合物(I)的盐酸盐的N-2形式的TGA热分析图。
图15示出化合物(I)的磷酸盐的TGA热分析图。
图16示出化合物(I)的N-1形式的固态核磁共振谱(ssNMR)。
图17示出化合物(I)的HCl盐的N-2形式的ssNMR。
具体实施方式
本领域普通技术人员通过阅读下面详细的描述可更容易地理解本发明 的特征和优点。应理解的是，本发明的某些特征为了清楚起见而描述在上面 和下面的单独实施方案的上下文中，但是这些特征也可组合起来以形成单一 实施方案。相反地，本发明的多个特征为了简要起见而描述在单一实施方案 的上下文中，但是这些特征也可组合起来以形成其亚组合。
本申请用于表征具体形式的名称(例如，“N-1”等)仅为标识符，其应根据 本申请提供的表征信息进行解释，不应被限制以至于排除具有类似或相同物 理和化学特征的任何其它物质。
本申请阐述的定义优先于引入本申请作为参考的任何专利、专利申请和 /或专利申请公开中阐述的定义。
单词“约”后面跟随的表达成分的量、重量百分比、温度等的所有数字 应当理解为仅仅是近似值，因而所述数字上下的轻微变动可以用于获得与所 述数字实质上相同的结果。因此，除非有相反的说明，单词“约”后面跟随 的数字参数是近似值，这些近似值可以根据要求获得的所需性质而变化。最 后，并且并非试图将等同原则的应用限制到权利要求的范围，各数字参数应 当至少根据所报道的有效数字的值以及运用常规的舍入技术(rounding techniques)进行解释。
所有测量均会有试验误差，并且在本发明的范围内。
如本申请所使用的，“多晶型物”是指具有相同化学结构但是形成晶体 的分子和/或离子的空间排列不同的晶体形式。
本申请所使用的“无定形”指非结晶的分子和/或离子的固体形式。无定形 固体不会显示具有尖锐峰值的明确的X射线衍射图。
如本申请所使用的，“基本上纯的”是指所谓的化合物(I)的晶体形式包括 基于化合物(I)重量的至少约90重量％的所述晶体形式，所述晶体形式选自形 式N-1和形式H1.5-2。尽管并非试图将等同原则的应用限制到权利要求的范 围，术语“至少约90wt％”包括但不限于，例如约90、90、约91、91、约 92、92、约93、93、约94、94、约95、95、约96、96、约97、97、约98、 98、约99、99和约100wt％。％是指所谓的晶体形式基于化合物(I)的重量百 分比。化合物(I)的晶体形式的其余部分包括化合物(I)的其它一种或多种形式 和/或源于例如晶体形式制备过程的反应杂质和/或加工杂质。
例如，如果通过目前在本领域中已知和普遍接受的方法来测量，选自形 式N-1和形式H1.5-2的所述晶体形式占至少约90wt.％，以及基于化合物(I) 的重量少于约10wt.％的下述物质：即包括其它形式的化合物(I)和/或反应杂 质和/或加工杂质，则可认为化合物(I)的晶体形式是基本上纯的。
反应杂质和/或加工杂质的存在可通过在本领域中已知的分析技术来确 定，这些技术例如为色谱、核磁共振谱、质谱和/或红外谱。
如本申请所使用的，“分子/不对称单元(molecules/asymmetric unit)”是指 不对称单元中化合物(I)的分子数目。
如本申请所使用的，单胞(unit cell)参数“分子个数/单胞(molecules/unit cell)”指单胞中化合物(I)的分子的数目。
当溶解时，化合物(I)的晶体形式失去其结晶结构，由此称为化合物(I)的 溶液。本申请披露的至少一种化合物(I)的晶体形式可用于制备至少一种液体 制剂，其中溶解有和/或悬浮有至少一种化合物(I)的晶体形式。
“治疗有效量”是指，当单独给予时能有效预防、抑制和/或改善疾病和/ 或病症和/或疾病和/或病症进展的量，或当与其它治疗剂一起给予时能有效 预防、抑制和/或改善疾病和/或病症和/或疾病和/或病症进展的量。例如，有 效的抗癌剂延长患者的存活能力，抑制与肿瘤相关的快速增殖性细胞生长， 或导致肿瘤退行。
本申请使用的短语“基因扩增”表示DNA片段的选择性合成，这产生 Met基因或对Met进行编码的染色体片段的多个拷贝。
本申请使用的短语“激活的Met突变”表示Met的DNA序列中的选择性 变化，这产生组成性(即永久性)磷酸化的Met蛋白。
本申请使用的短语“HGF刺激”表示HGF以使其关联受体(cognate receptor)(Met)激活的方式与其关联受体(Met)结合的能力，这产生表型应答 (phenotypic response)。就Met而言，这可以是细胞增殖、细胞运动性、细胞 分化和/或细胞存活。
本申请使用的术语“患者”涵盖所有哺乳动物物种，包括人类、牛、马、 犬和猫。
化合物(I)和盐的晶体形式在表1中示出。
表1
形式N-1
化合物(I)的第一晶体形式包含在本申请中称为“形式N-1”或“N-1形式” 的洁净晶体形式。
在一个实施方案中，N-1形式通过近似等于以下的单胞参数表征：
晶胞尺度：
a＝14.45
b＝19.21
c＝8.89
α＝90.0°
β＝95.7°
γ＝90.0°
空间群：P21/c
化合物(I)分子/不对称单胞：1
体积＝636
密度(计算值)＝1.388g/cm3，
其中形式N-1的单胞参数是在约25℃的温度测量的。
在一个实施方案中，N-1形式通过近似等于以下的单胞参数表征：
晶胞尺度：
a＝14.43
b＝19.17
c＝8.83
α＝90.0°
β＝95.4°
γ＝90.0°
空间群：P21/c
化合物(I)分子/不对称单胞：1
体积＝608
密度(计算值)＝1.401g/cm3，
其中形式N-1的单胞参数是在约-30℃的温度测量的。
在另一个实施方案中，N-1形式通过基本上与图1中所示的PXRD图一 致的模拟的PXRD图和/或通过基本上与图1中所示的PXRD图一致的观察 到的PXRD图来表征。
在又一个实施方案中，N-1形式通过包含四个或更多，优选五个或更多 选自以下的2θ值(CuKαλ＝1.5418)的PXRD图(CuKαλ＝1.5418在约25℃ 的温度)表征：6.2±0.2；7.7±0.2；11.0±0.2；12.2±0.2；18.5±0.2；21.6±0.2； 22.2±0.2；和23.0±0.2，其中形式N-1的PXRD图是在约25℃的温度测量的。
在又一实施方案中，N-1形式通过基本上如表2中列出的分数原子坐标 表征。
表2
形式N-1的分数原子坐标 在约25℃的温度计算
在又一实施方案中，N-1形式通过基本上与图6中所示的DSC热分析图 一致的DSC热分析图表征。N-1形式可通过约211℃至约217℃范围的熔 点表征。
在又一实施方案中，N-1形式通过TGA热分析图表征，其中N-1形式在 被加热至约175℃的温度时经历零重量损失或极小重量损失。
在又一实施方案中，N-1形式呈现基本上与图11中所示的TGA热分析 图相同的TGA热分析图。
在另一个实施方案中，N-1形式通过基本上与图16中所示的谱图一致的 固态核磁共振谱(ssNMR)表征。
在又一实施方案中，化合物(I)的第一晶体形式为基本上纯的。
在又一实施方案中，化合物(I)的第一晶体形式基于重量含有至少约90 wt.％，优选至少约95wt.％，并且更优选至少约99wt.％的第一晶体形式即形 式N-1。
在又一实施方案中，基本上纯的第一晶体形式具有基本上纯的相均质性 (phase homogeneity)，其实验测量的PXRD图的总峰面积中的小于约10％， 优选小于约5％，并且更优选小于约2％由模拟的PXRD图所不具有的峰产生。 更优选地，基本上纯的第一晶体形式具有基本上纯的相均质性，其实验测量 的PXRD图的总峰面积中的小于约1％由模拟的PXRD图所不具有的峰产生。
在另一个实施方案中，化合物(I)的第一晶体形式基本上由形式N-1组成。 该实施方案的第一晶体形式基于重量可包含至少约90wt.％，优选至少约95 wt.％，并且更优选至少约99wt.％的第一晶体形式即形式N-1。
在又一个实施方案中，药物组合物包含第一晶体形式；和至少一种可药 用载体和/或稀释剂。
在又一实施方案中，药物组合物包含基本上纯的形式N-1；和至少一种 可药用载体和/或稀释剂。
在又一实施方案中，将治疗有效量的形式N-1与至少一种可药用载体和 /或稀释剂组合起来，以提供至少一种药物组合物。
又一实施方案提供治疗增殖性疾病的方法，其包括向需要的患者给药治 疗有效量的化合物(I)，其中化合物(I)以包含形式N-1的第一晶体形式提供。 优选地，患者为人类。该实施方案的方法可用于治疗选自以下的增殖性疾病： 膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、 胰腺/胆囊癌、前列腺癌、甲状腺癌、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、胶质母细胞瘤/ 星形细胞瘤、黑色素瘤、MFH/纤维肉瘤和间皮瘤；并且优选地，肺癌、头颈 癌、胃癌或膀胱癌。
在又一实施方案中，所述方法包括给药化合物(I)，其中化合物(I)基本上 由形式N-1组成。
形式H1.5-2
化合物(I)的第二晶体形式包含在本申请中称为“形式H1.5-2”或“H1.5-2 形式”的倍半水合物晶体形式。对于化合物(I)的每个分子，倍半水合物形式 H1.5-2包含最多1.5分子的水。
在一个实施方案中，H1.5-2形式通过近似等于以下的单胞参数表征：
晶胞尺度：
a＝11.62
b＝23.86
c＝9.09
α＝90.0°
β＝84.4°
γ＝90.0°
空间群：P21/c
化合物(I)分子/不对称单胞：1
体积＝627
密度(计算值)＝1.430g/cm3，
其中形式H1.5-2的单胞参数是在约-30℃的温度测量的。
在另一个实施方案中，H1.5-2形式通过基本上与图2中所示的图谱一致 的模拟的粉末x-射线衍射(PXRD)图谱和/或通过基本上与图2中所示的图谱 一致的观察到的PXRD图表征。
在又一个实施方案中，H1.5-2形式通过包含四个或更多，优选五个或更 多选自以下的2θ值的PXRD图(CuKαλ＝1.5418在约25℃的温度)表征： 7.4±0.2；10.4±0.2；12.2±0.2；13.4±0.2；18.9±0.2；19.7±0.2；21.5±0.2；和 22.0±0.2，其中形式H1.5-2的PXRD图是在约25℃的温度测量的。
在又一实施方案中，H1.5-2形式通过基本上如表3中列出的分数原子坐 标表征。
表3
形式H1.5-2的分数原子坐标 在约-30℃的温度计算
在又一实施方案中，H1.5-2形式通过基本上与图7中所示的差示扫描量 热法(DSC)热分析图一致的差示扫描量热法(DSC)热分析图表征。
在又一实施方案中，H1.5-2形式通过热重分析(TGA)热分析图表征，在 被加热至约150℃的温度时，基于重量，重量损失为形式H1.5-2的样品的 约2至约5wt.％。
在又一实施方案中，H1.5-2形式呈现基本上与图12中所示的TGA热分 析图相同的TGA热分析图。
在又一实施方案中，化合物(I)的第二晶体形式为基本上纯的。
在又一实施方案中，化合物(I)的第二晶体形式基于重量含有至少约90 wt.％，优选至少约95wt.％，并且更优选至少约99wt.％的第二晶体形式即形 式H1.5-2。
在又一个实施方案中，基本上纯的第二晶体形式具有基本上纯的相均质 性，其实验测量的PXRD图的总峰面积中的小于约10％，优选小于约5％， 并且更优选小于约2％由模拟的PXRD图所不具有的峰产生。更优选地，基 本上纯的第二晶体形式具有基本上纯的相均质性，其实验测量的PXRD图的 总峰面积中的小于约1％由模拟的PXRD图所不具有的峰产生。
在另一个实施方案中，化合物(I)的第二晶体形式基本上由形式H1.5-2 组成。该实施方案的第二晶体形式基于重量可包含至少约90wt.％，优选至 少约95wt.％，并且更优选至少约99wt.％的第二晶体形式即形式H1.5-2。
在又一个实施方案中，药物组合物包含形式H1.5-2；和至少一种可药用 载体和/或稀释剂。
在又一实施方案中，药物组合物包含基本上纯的形式H1.5-2；和至少一 种可药用载体和/或稀释剂。
在又一实施方案中，将治疗有效量的形式H1.5-2与至少一种可药用载体 和/或稀释剂组合起来，以提供至少一种药物组合物。
又一实施方案提供治疗增殖性疾病的方法，其包括向需要的患者给药治 疗有效量的化合物(I)，其中化合物(I)以包含形式H1.5-2的第二晶体形式提供。 优选地，所述患者为人类。该实施方案的方法可用于治疗选自以下的增殖性 疾病：膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵 巢癌、胰腺/胆囊癌、前列腺癌、甲状腺癌、骨肉瘤、横纹肌肉瘤、胶质母细 胞瘤/星形细胞瘤、黑色素瘤、MFH/纤维肉瘤和间皮瘤；并且优选地，肺癌、 头颈癌、胃癌或膀胱癌。
在又一实施方案中，所述方法包括给药化合物(I)，其中化合物(I)基本上 由形式H1.5.2组成。
形式H-1
化合物(I)的单盐酸盐的第一晶体形式包含在本申请中称为“形式H-1”或 “H-1形式”的一水合物晶体形式。对于每摩尔的化合物(I)，化合物(I)的单盐 酸盐的一水合物晶体形式包括一摩尔的HCl和最高一摩尔的水。
在一个实施方案中，H-1形式通过近似等于以下的单胞参数表征：
晶胞尺度：
a＝14.45
b＝25.34
c＝7.09
α＝90.0°
β＝100.2°
γ＝90.0°
空间群：P21/c
化合物(I)分子/不对称单胞：1
体积＝638
密度(计算值)＝1.476g/cm3，
其中形式H-1的单胞参数是在约25℃的温度测量的。
在一个实施方案中，H-1形式通过近似等于以下的单胞参数表征：
晶胞尺度：
a＝14.42
b＝25.38
c＝7.02
α＝90.0°
β＝100.1°
γ＝90.0°
空间群：P21/c
化合物(I)分子/不对称单胞：1
体积＝632
密度(计算值)＝1.443g/cm3，
其中形式H-1的单胞参数在约-50℃的温度测量。
在另一个实施方案中，H-1形式通过基本上与图3中所示的图谱一致的 模拟的PXRD图和/或通过基本上与图3中所示的图谱一致的观察到的PXRD 图表征。
在又一个实施方案中，H-1形式通过包含四个或更多，优选五个或更多 选自以下的2θ值(CuKαλ＝1.5418)的PXRD图(CuKαλ＝1.5418在约25℃ 的温度)表征：6.3±0.2，7.0±0.2，9.4±0.2，15.5±0.2，16.6±0.2，18.7±0.2，20.7±0.2， 和23.9±0.2，其中形式H-1的PXRD图是在约25℃的温度测量的。
在又一实施方案中，H-1形式通过基本上如表4中列出的分数原子坐标 表征。
表4
形式H-1的分数原子坐标 在约25℃的温度计算
在又一实施方案中，H-1形式通过基本上与图8中所示的DSC热分析图 一致的DSC热分析图表征。
在又一实施方案中，H-1形式呈现基本上与图13中所示的TGA热分析 图相同的TGA热分析图。
在又一实施方案中，化合物(I)的H-1形式为基本上纯的。
形式N-2
化合物(I)的单盐酸盐的第二晶体形式包含在本申请中称为“形式N-2”或 “N-2形式”的洁净晶体形式。对于每摩尔的化合物(I)，化合物(I)的单盐酸盐 的第二晶体形式包括一摩尔的HCl。
在另一个实施方案中，N-2形式通过基本上与图4中所示的图谱一致的 模拟的PXRD图和/或通过基本上与图4中所示的图谱一致的观察到的PXRD 图表征。
在又一个实施方案中，N-2形式通过包含四个或更多，优选五个或更多 选自以下的2θ值(CuKαλ＝1.5418)的PXRD图(CuKαλ＝1.5418在约25℃ 的温度)表征：6.4±0.2，9.6±0.2，10.4±0.2，11.2±0.2，14.0±0.2，15.2±0.2， 16.5±0.2，19.1±0.2，和22.0±0.2，其中形式N-2的PXRD图是在约25℃的温 度测量的。
在又一实施方案中，N-2形式通过基本上与图9中所示的DSC热分析图 一致的DSC热分析图表征。
在又一实施方案中，N-2形式呈现基本上与图14中所示的TGA热分析 图相同的TGA热分析图。
在另一个实施方案中，N-2形式通过基本上与图17中所示的谱图一致的 固态核磁共振谱(ssNMR)表征。
在又一实施方案中，化合物(I)的N-2晶体形式为基本上纯的。
在又一实施方案中，化合物(I)的单盐酸盐的第二晶体形式基于重量含有 至少约90wt.％，优选至少约95wt.％，并且更优选至少约99wt.％的形式N-2。
在又一个实施方案中，化合物(I)的单盐酸盐的基本上纯的第二晶体形式 具有基本上纯的相均质性，其实验测量的PXRD图的总峰面积中的小于约 10％，优选小于约5％，并且更优选小于约2％由模拟的PXRD图所不具有的 峰产生。更优选地，化合物(I)的单盐酸盐的基本上纯的第二晶体形式具有基 本上纯的相均质性，其实验测量的PXRD图的总峰面积中的小于约1％由模 拟的PXRD图所不具有的峰产生。
磷酸盐
提供化合物(I)的磷酸盐，每摩尔的化合物(I)包括一摩尔的磷酸。化合物 (I)的磷酸盐可为无定形的、结晶的或其混合物。
在一个实施方案中，化合物(I)的磷酸盐通过基本上与图5中所示的图谱 一致的观察到的PXRD图表征。
在又一个实施方案中，化合物(I)的磷酸盐通过包含四个或更多，优选五 个或更多选自以下的2θ值(CuKαλ＝1.5418)的PXRD图(CuKαλ＝1.5418在约25℃的温度)表征：4.8±0.2，6.1±0.2，7.4±0.2，9.2±0.2，9.7±0.2，11.3±0.2， 12.2±0.2，13.3±0.2，16.9±0.2，22.5±0.2，和23.5±0.2，其中所述盐的PXRD 图是在约25℃的温度测量的。
在又一实施方案中，化合物(I)的磷酸盐通过基本上与图10中所示的DSC 热分析图一致的DSC热分析图表征。
在又一实施方案中，化合物(I)的磷酸盐呈现基本上与图15中所示的 TGA热分析图相同的TGA热分析图。
形式N-1意料不到地有利的，这是因为它具有使它适于药物生产和向患 者给药化合物(I)的性质组合。形式N-1具有适合的化学和物理稳定性，例如 在加工成期望的剂型期间的形式稳定性和/或在贮存期间的稳定性。如通过在 数个不同温度和湿度条件测试所表明的，形式N-1显示适合的化学和物理稳 定性。
化合物(I)可通过任何适合的途径给药，优选以适于该途径的药物组合物 的形式，和以对于预期治疗有效的剂量。例如，化合物(I)可按含有常规可药 用载体、辅料和媒介物的剂量单位制剂口服、粘膜、局部、直肠、肺部如通 过吸入喷雾剂，或者肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌内、胸 骨内和输注技术)给药。
在一个实施方案中，提供药物组合物，其包含化合物(I)的晶体形式N-1 和至少一种可药用载体和/或稀释剂。优选地，药物组合物包含治疗有效量的 化合物(I)的形式N-1。
可在本发明药物组合物中使用的可药用载体、稀释剂、辅料和媒介物包 括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物递送系统 (SEDDS)如琥珀酸D-α-生育酚聚乙二醇1000酯(d-alpha-tocopherol polyethyleneglycol 1000 succinate)、在药物剂型中使用的表面活性剂如 TWEEN表面活性剂(ICI Americas，Inc.，Delaware)或其它类似的聚合物递送基 质、血清蛋白质如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山 梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质如硫酸鱼精蛋 白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯基吡 咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、 聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。也可有利地使用环糊精如 α-、β-和γ-环糊精或化学改性衍生物如羟基烷基环糊精(包括2-和3-羟基丙基 -环糊精)或其它可溶性衍生物以促进本申请所述制剂中的化合物递送。
本申请涵盖的任何药物组合物可例如经任何可接受的和适合的口服制 剂口服递送。示例性口服制剂包括但不限于，例如，片剂；糖锭；锭剂；水 性或油性混悬剂；可分散粉末剂或颗粒剂；乳剂；硬胶囊剂或软胶囊剂；糖 浆剂；和酏剂。预期用于口服给药的药物组合物可根据本领域已知的方法制 备，并可含有至少一种选自以下的试剂：增甜剂、矫味剂、着色剂、缓和剂、 抗氧化剂和防腐剂。
示例性赋形剂包括但不限于，例如，惰性稀释剂，例如，碳酸钙、碳酸 钠、乳糖、磷酸钙和磷酸钠；粒化和崩解剂，例如，微晶纤维素、交联羧甲 纤维素钠、玉米淀粉和藻酸；粘合剂，例如，淀粉、明胶、聚乙烯基吡咯烷 酮和阿拉伯胶；和润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。
油性混悬剂可例如通过以下方法制备：将化合物(I)的形式N-1悬浮在植 物油中，例如，花生油；橄榄油；芝麻油；和椰子油；或者悬浮在矿物油中， 例如，液体石蜡。
本申请涵盖的药物组合物也可例如经任何可药用和适合的可注射组合 物静脉内、皮下和/或肌内递送。可将形式N-1溶解和/或分散至包含可接受 的媒介物和溶剂如水、林格溶液和等渗氯化钠溶液的无菌水溶液中；无菌水 包油微乳液中；和水性或油性悬浮液中，以提供可注射组合物。
无菌可注射水包油微乳液可，例如，通过以下方法制备：1)将化合物(I) 的形式N-1溶解在油相中，例如，大豆油和卵磷脂的混合物；2)将含化合物 (I)的油相与水和甘油混合物组合；以及3)加工所述组合以形成微乳液。
本申请涵盖的任何药物组合物也可例如经任何可接受和适合的直肠制 剂给药，包括但不限于，例如，栓剂。栓剂可通过以下方法制备：将化合物 (I)的形式N-1与至少一种适合的非刺激性赋形剂混合，所述非刺激性赋形剂 在直肠温度为液体，但是在低于直肠温度为固体。
本申请涵盖的任何药物组合物可例如经任何可接受和适合的局部制剂 给药，包括但不限于，例如，乳膏剂；软膏剂；凝胶剂；溶液剂；混悬剂， 透皮贴剂；和鼻内吸入剂。对于这种应用，局部制剂包括口腔洗剂和漱口剂。
对于口服给药，药物组合物可为例如片剂、胶囊剂、混悬剂或液剂的形 式。片剂和丸剂可另外用阻挡膜或肠溶衣如乙基纤维素和甲基丙烯酸聚合物 制备。这种组合物也可包含辅料，例如湿润、增甜、矫味和加香剂。可将化 合物(I)的形式N-1与以下物质混合：乳糖、蔗糖、淀粉粉末、烷酸的纤维素 酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐 和钙盐、明胶、阿拉伯胶、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，然后制 片或包囊用于便利地给药。这种胶囊剂或片剂可另外含有可溶胀聚合物如羟 丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和聚维酮，以提供持续释放制剂。
药物组合物优选以含有特定量活性成分的剂量单位的形式制造。这种剂 量单位的实例是片剂或胶囊剂。例如，这些剂量单位可含有约1-200mg， 优选约1-150mg，更优选约5-100mg的化合物(I)的量。取决于患者状况和 其它因素，人或其它哺乳动物的适合的日剂量可宽范围地改变，但是再次地， 可使用常规方法测定。
适于局部给药的制剂包括适于透过皮肤的液体或半液体制剂(例如，搽 剂、洗剂、软膏剂、乳膏剂或糊剂)和适于给药于眼、耳或鼻的滴剂。本发明 化合物活性成分的适合局部剂量为每次0.1mg-150mg，每天给药1-4次， 优选1或2次。对于局部给药，活性成分以重量计可占制剂的0.001％-10％ w/w，例如，1％-2％，不过活性成分可占制剂的高达10％w/w，但是优选不 超过5％w/w，并且更优选为0.1％-1％。
当配制在软膏剂中时，可将形式N-1与石蜡基质或水可混溶性软膏基质 一起使用。可选择地，可将活性成分与水包油乳膏基质一起配制在乳膏剂中。 如果期望，乳膏基质的水相可包含例如至少30％w/w多元醇如丙二醇、丁烷 -1，3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油、聚乙二醇及其混合物。理想地，局部制 剂可包含增强活性成分透过皮肤或其它受影响区域的吸收或渗透的化合物。 这种表皮渗透增强剂的实例包括二甲基亚砜和相关类似物。
化合物(I)也可通过透皮设备给药。优选地，使用贮器和多孔膜型的贴剂 或固体基质变型的贴剂完成透皮给药。在任一情况中，将活性药物从贮器或 微囊通过膜连续递送至活性药物可透过的粘合剂中，所述活性药物可透过的 粘合剂与接受者的皮肤或粘膜接触。如果活性药物通过皮肤吸收，那么将受 控和预定的活性药物流量给药于接受者。在微囊的情况中，包囊剂也可起膜 的作用。
本发明乳液的油相可由已知成分以已知方式构成。尽管油相可仅包含乳 化剂，但是它可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或者与脂肪和油的混合物。 优选地，包含亲水乳化剂以及用作稳定剂的亲脂乳化剂。包含油和脂肪也是 优选的。同时，乳化剂(带有或不带有稳定剂)构成所谓的乳化蜡，且所述蜡 与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，所述乳化软膏基质形成乳膏制剂 的油分散相。适于在本发明制剂中使用的乳化剂和乳剂稳定剂包括TWEEN 60表面活性剂、SPAN 80表面活性剂(ICI Americas Inc.，Delaware)、鲸蜡硬脂 醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯、月桂基硫酸钠或二硬脂酸甘油酯，这些物 质单独使用或与蜡或本领域公知的其它材料一起使用。
为所述制剂选择合适的油或脂肪是基于实现所期望的化妆品性质 (cosmetic property)来进行的，这是因为所述活性化合物在可能用于药物乳剂 的大多数油中的溶解度是非常低的。因此，所述乳膏剂应该优选为非油腻的、 非沾污的且可洗涤的产品，并具有合适的稠度以避免从管或其它容器中泄漏。 可使用直链或支链的且一元或二元的烷基酯，例如二异己二酸酯 (di-isoadipate)、硬脂酸异鲸蜡酯、椰油脂肪酸丙二醇二酯、肉豆蔻酸异丙酯、 油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、棕榈酸2-乙基己酯或支链酯的共混 物。基于所需要的性质，这些物质可单独使用或组合使用。可选择地，可使 用高熔点的脂质如白软石蜡和/或液体石蜡或其它矿物油。
用于肠胃外给药的制剂可呈含水或非含水等渗无菌注射溶液剂或混悬 剂的形式。这些溶液剂和混悬剂可由无菌粉末或颗粒使用就用于口服给药制 剂所述的一种或多种载体或稀释剂或使用其它合适的分散剂或湿润剂和助悬 剂来制备。可将化合物(I)的形式N-1溶解在水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、 玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲 液中。其它辅料和给药模式在药物领域中是充分且广泛已知的。所述活性成 分也可按与合适的载体(包括盐水、右旋糖或水)或与环糊精(即)、 共溶剂增溶物质(即丙二醇)或胶束增溶物质(即，TWEEN 80表面活性剂)在一 起的组合物形式通过注射来给药。
所述无菌注射剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的 无菌注射溶液剂或混悬剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液剂。所述可接受的可 使用的媒介物和溶剂是水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥 发油通常用作溶剂或混悬介质。就该目的而言，可使用任何温和的不挥发油， 包括合成的甘油一酯或甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可用于制备注射剂。
药物的用于直肠给药的栓剂可通过以下方法制备：使药物与适合的非刺 激性赋形剂如可可脂和聚乙二醇混合，所述适合的非刺激性赋形剂在常温为 固体，但是在直肠温度为液体，因此在直肠中将熔融并释放药物。
本发明药物组合物可根据常规药学方法制备。药物组合物可经历常规药 物操作如灭菌和/或可含有常规辅料，例如防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、 缓冲剂等。
本发明药物组合物包含化合物(I)；且任选包含其它物质，所述其它物质 选自激酶抑制剂(小分子、多肽、抗体等)、免疫抑制剂、抗癌剂、抗病毒剂、 抗炎剂、抗真菌剂、抗生素或抗血管过度增生化合物；且包含任何可药用载 体、辅料或媒介物。可选择地，本发明组合物包含具有本申请所述化学式的 化合物或其可药用盐；且包含可药用载体、辅料或媒介物。所述组合物可任 选包括一种或多种其它治疗剂，所述其它治疗剂包括例如激酶抑制剂(小分 子、多肽、抗体等)、免疫抑制剂、抗癌剂、抗病毒剂、抗炎剂、抗真菌剂、 抗生素或抗血管过度增生化合物。
包含化合物(I)的形式N-1的药物组合物
提供药物组合物，其包含(i)呈形式N-1的化合物(I)的粒子；(ii)稳定剂； 和(iii)至少一种可药用载体和/或稀释剂；其中所述粒子的直径(D90)为1-50 微米并且所述稳定剂布置在所述粒子上。本申请使用的术语“布置”表明稳定 剂与化合物(I)的形式N-1粒子具有足够的接触，以最小化或防止形式N-1粒 子向其它形式的转化，包括在暴露于湿气或水后转化成倍半水合物形式 H1.5-1。稳定剂可提供粒子表面的部分或全部覆盖，或者可选择地，可部分 或全部地吸附至粒子表面上和/或粒子中。
包含化合物(I)的形式N-1的微混悬剂药物组合物
化合物(I)的洁净N-1形式在pH 7.4和室温具有约0.25μg/ml的水溶解度。 然而，在含水介质的存在下，洁净晶体形式N-1可转化成结晶倍半水合物形 式H1.5-2。与形式N-1相比，倍半水合物形式1.5-2具有较低水溶解度，并 且相应地，具有较低溶出速度和较低生物利用度。在混悬剂中提高化合物生 物利用度的一个方法是提高粒子与含水介质接触的表面积，其可通过降低粒 度来实现。然而，粒度降至约1微米直径以下需要专门的研磨和分散技术以 制备、稳定和消毒亚微米混悬剂。需要呈形式N-1的化合物(I)的水混悬剂， 其对于转化成倍半水合物形式H1.5-2具有足够的耐性，以允许口服给药。
申请人已经意料不到地发现适于向化合物(I)提供足够的生物利用度以 允许口服给药的含水药物组合物。所述药物组合物为包含分散在含水介质中 的化合物(I)的粒子的含水微混悬剂。化合物(I)的粒子为无水晶体形式N-1并 对于水合具有足够的耐性，以防止和/或阻碍在给药之前在含水介质中转化成 倍半水合物晶体形式H1.5-2。通过将粒子维持为无水形式N-1，化合物(I)在 含水微混悬剂中可具有足够的溶解度、溶出速度和/或生物利用度，以允许口 服给药化合物(I)。此外，微混悬剂可通过以下方法制备：将化合物(I)形式N-1 的干燥粒子混合至含水媒介物中以提供化合物(I)形式N-1的稳定含水微混悬 剂，并由此不需要专门的研磨和制备技术。
微混悬剂包含呈形式N-1的化合物(I)的粒子，其中所述粒子的通过D90值表征的粒度为1-50微米，优选为1-30微米，并且更优选为1-20微米。 测定D90值的粒度分析可通过本领域已知的各种技术实施，例如，基于光散 射和图像分析的技术。微混悬剂的呈形式N-1的化合物(I)的粒子的浓度可为 0.1-50mg/mL，优选地，1-40mg/mL，并且更优选地，2-30mg/mL。实例 包括浓度为2mg/mL、5mg/mL、10mg/mL和20mg/mL的微混悬剂。
微混悬剂的含水介质包括水和任选的其它水可混溶的溶剂。通常，含水 介质包含至少90重量％，优选至少95重量％，并且更优选地，至少99重量 ％水，基于含水介质的重量。在一个实施方案中，含水介质基本上不含其它 水可混溶的溶剂，以及包含，例如，至少99.8重量％，优选地，至少99.9重 量％，并且更优选99.95重量％的水，基于含水介质的重量。
微混悬剂还包含稳定剂以最小化或防止N-1形式在含水介质中转化成倍 半水合物形式H1.5-2。将稳定剂溶解在用于制备化合物(I)的微混悬剂的含水 介质中。适合的稳定剂的实例包括纤维素醚聚合物，例如，羟丙基甲基纤维 素(HPMC)、甲基纤维素(MC)和羟丙基纤维素(HPC)。在微混悬剂中稳定剂的 适合的量包括0.01％-5％w/v；0.05％-5％w/v；和0.1％-4％w/v。在一个实 施方案中，将稳定剂部分或全部地布置在化合物(I)的粒子上。
在一个实施方案中，微混悬剂包含分散在含水介质中的呈形式N-1的化 合物(I)的粒子；所述粒子的直径(D90)为1-30微米；和选自纤维素醚聚合物 的稳定剂；其中所述稳定剂布置在粒子上。纤维素醚聚合物的实例包括羟丙 基纤维素、羟丙基甲基纤维素和/或甲基纤维素。
微混悬剂可任选包含表面活性剂以增强固体粒子在微混悬剂重建期间 的湿润。适合的表面活性剂包括阳离子、阴离子和非离子表面活性剂。在微 混悬剂中可使用一种表面活性剂或表面活性剂的适合混合物。适合的表面活 性剂的具体实例包括但不限于脱水山梨醇酯如脱水山梨醇聚氧乙烯(20)醚单 油酸酯、烷基硫酸钠如月桂基硫酸钠和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯三嵌 段共聚物如表面活性剂(ICI Americas，Delaware)。微混悬剂可 包含0.01-2％w/v表面活性剂，优选0.05-2％w/v表面活性剂，并且更优选 地，0.1-2％w/v表面活性剂，基于微混悬剂的体积。
微混悬剂可任选包含助悬剂以最小化或防止化合物(I)的粒子的聚结和/ 或沉淀。适合的助悬剂包括微晶纤维素，例如，PH 101、PH 103、 PH 105和PH 200微晶纤维素(FMC Corporation，Delaware)。在微混悬剂中可 使用一种或多种助悬剂。微混悬剂可包含的助悬剂的量为0.1-5％w/v，优选 0.2-4％w/v，并且更优选地，0.2-3％，基于微混悬剂的体积。
微混悬剂可任选包含其它添加剂和/或制剂辅料。实例包括矫味剂和增甜 剂如山梨醇、甘露醇、阿司帕坦、蔗糖和其它可商购增甜剂。一种增甜剂为 单糖浆，在药物制剂中使用的蔗糖在水中的溶液。其它添加剂包括缓冲剂如 可药用弱酸、弱碱或其混合物。优选的缓冲剂为水可溶性材料如磷酸、乙酸、 它们的盐，或其混合物，其可用于在微混悬剂中维持5-7的pH。此外，可添 加防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯，或其混合物。
微混悬剂可用药物媒介物通过添加化合物(I)形式N-1的粒子制备，所述 药物媒介物包含含水介质、一种或多种稳定剂、一种或多种表面活性剂、一 种或多种助悬剂和任选的其它添加剂。可使用各种技术如摇晃、混合、涡旋 和/或超声处理将化合物(I)形式N-1的粒子分散至媒介物中。
在一个实施方案中，提供微混悬剂，其包含：
a)0.1-5％(w/v)稳定剂；
b)0.1-5％(w/v)微晶纤维素；
c)0.01-2％(w/v)脱水山梨醇酯、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸盐(dodecyl sulfate)和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物；和
d)1-40％(w/v)增甜剂。
例如，在本实施方案中，稳定剂可选自羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维 素和/或甲基纤维素。
包含化合物(I)的形式N-1的片剂药物组合物
化合物(I)的洁净N-1形式在水溶液中或在高湿度条件下具有转化成倍半 水合物形式H1.5-2的潜力。包含化合物(I)的形式N-1的固体药物组合物需要 足够的物理稳定性以抵抗晶体形式在贮存期间的改变，尤其是在高湿度贮存 条件下。此外，固体药物组合物在口服给药后必须经历快速崩解和/或溶出。
申请人已经意料不到地找到包含呈晶体形式N-1的化合物(I)的片剂药物 组合物，其具有足够的物理稳定性以及在给药于患者后具有足够的崩解和溶 出。所述片剂包含呈形式N-1的化合物(I)的微粉化粒子；稳定剂；崩解剂、 填料和任选的其它辅料，例如助流剂和/或润滑剂。稳定剂也可将片剂组分粘 合在一起。
制备片剂的适合方法包括湿制粒法。所述湿制粒法包括将稳定剂结合至 含水粒化流体的步骤，其在加工过程中帮助将化合物(I)维持为无水形式N-1。 可将稳定剂作为溶液或泡沫体添加。将稳定剂结合至制剂中改善无水N-1形 式在片剂中的稳定性，包括在加速贮存条件下贮存片剂。
片剂包含呈形式N-1的化合物(I)的粒子，其中所述粒子的通过D90值表 征的颗粒直径为1-50微米，优选为1-30微米，并且更优选地，1-20微米。 化合物(I)的微粉化粒子可通过本领域已知的各种技术制备，包括，例如，气 流粉碎和冲击粉碎。
在一个实施方案中，所述片剂包含呈形式N-1的化合物(I)的粒子，其中 所述粒子的通过D90值表征的粒子直径为1-50微米，优选为1-30微米，并 且更优选地，1-20微米；并且稳定剂布置在粒子上。也可将片剂粘合在一 起的适合的稳定剂的实例包括羟丙基甲基纤维素(HPMC)、甲基纤维素(MC) 和羟丙基纤维素(HPC)。稳定剂布置在粒子上，以防止形式N-1转化成其它 形式或者向形式N-1转化成其它形式提供阻力，所述其它形式包括倍半水合 物形式H1.5-1。
在一个实施方案中，所述片剂包含：(i)10-50重量％，优选15-25重量 ％的呈形式N-1的化合物(I)；(ii)2-12重量％，优选5-9重量％崩解剂；(iii)1 -7重量％，优选3-5重量％稳定剂；(iv)28-87重量％，优选地，59-77重 量％填料；(v)0.1-1.5重量％，优选0.3-0.9重量％润滑剂；和(vi)0.1-1.5重 量％，优选地，0.2-0.6重量％助流剂，基于片剂的总重量，其中呈形式N-1 的化合物(I)作为粒子提供，所述粒子的通过D90值表征的粒子直径为5-50 微米，优选为1-30微米，并且更优选地，1-20微米；并且所述稳定剂布置 在所述呈形式N-1的粒子上。也将片剂粘合在一起的适合的稳定剂包括羟丙 基甲基纤维素(HPMC)、甲基纤维素(MC)和羟丙基纤维素(HPC)。适合的填料 包括微晶纤维素、甘露醇、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、磷酸二钙、硫酸钙、 硅酸钙和山梨醇。适合的崩解剂包括交联羧甲纤维素钠、淀粉、甲基纤维素、 交聚维酮和淀粉羟乙酸钠。适合的助流剂包括硅胶、沉淀二氧化硅、硅石和 滑石。适合的润滑剂包括硬脂酸镁、油酸钠、硬脂酸钠、富马酸钠、苯甲酸 钠和乙酸钠。片剂可按不同的强度配制；例如，25mg、50mg和100mg呈 形式N-1的化合物(I)。
在另一实施方案中，所述片剂包含：(i)20重量％呈形式N-1的化合物(I)； (ii)7重量％交联羧甲纤维素钠；(iii)4重量％羟丙基纤维素；(iv)68重量％微晶 纤维素；(v)0.6重量％硬脂酸镁；和(vi)0.4重量％二氧化硅；基于片剂的总重 量。
肝细胞生长因子(HGF)(由于其能够破坏体外集落形成(colony formation) 而还称为分散因子(scatter factor，SF))是已知在正常细胞和肿瘤细胞 (neoplastic cell)中诱导多重多效应答(pleiotropic response)的源于间充质细胞 的细胞因子(mesenchymally derived cytokine)(Sonnenberg等人，J.Cell Biol.， 123：223-235(1993)；Matsumato等人，Crit.Rev.Oncog.，3：27-54(1992)；和Stoker 等人，Nature，327：239-242(1987))。已知这些应答包括上皮细胞和内皮细胞的 增殖、上皮集落向单个细胞的解离(dissociation)、对上皮细胞运动性(运动形 成(motogenesis))的刺激、细胞存活、对细胞形态发生(morphogenesis)的诱导 (Montesano等人，Cell，67：901-908(1991))和对侵入的促进(Stella等人，Int.J. Biochem.Cell Biol.，12：1357-1362(1999)和Stuart等人，Int.J.Exp.Path.， 81：17-30(2000))即作为转移基础的所有关键过程。也已报道HGF促进血管发 生(Bussolino等人，J.Cell Biol.，119：629-641(1992))。另外，HGF在组织再生、 伤口愈合和正常胚胎过程中发挥关键作用，所有这些过程都取决于细胞运动 性和增殖。
HGF通过与其关联受体即Met蛋白质酪氨酸激酶受体(一种经证实的原 癌基因)以高亲和力结合而启动这些生理过程(Park等人，Proc.Natl.Acad.Sci. USA，84：6379-6383(1987)和Bottaro等人，Science，251：802-804(1991))。Met的 成熟形式由以下结构组成：具有大的细胞外结构域的高度糖基化的外部α-亚 单位和β-亚单位、跨膜片段和细胞质酪氨酸激酶结构域。配体的接合诱导 Met的二聚化，这产生自磷酸化的激活受体。Met的激活促进信号的转导级 联，所述转导级联通过负责募集多效应蛋白(multiple effector protein)的关键的 细胞质酪氨酸残基的转磷酸化来定义(Furge等人，Oncogene， 19：5582-5589(2000))。这些包括PI3激酶的p85亚单位、磷脂酶Cγ(Gaul等人， Oncogene，19：1509-1518(2000))、Grb2和Shc衔接蛋白、蛋白质磷脂酶SHP2 和Gab1。后一衔接蛋白以主要的下游停泊分子(docking molecule)的形式出现， 所述下游停泊分子在对配体占领的应答中变成经磷酸化的酪氨酸(Schaeper 等人，J.Cell Biol.，149：1419-1432(2000)；Bardelli等人，Oncogene， 18：1139-1146(1999)；和Sachs等人，J.Cell Biol.，150：1375-1384(2000))。就受 HGF刺激的细胞而言已报道其它信号传导分子的激活，最显著的是Ras、MAP 激酶、STATs、ERK-1、ERK-2和FAK(Tanimura等人，Oncogene 17：57-65(1998)； Lai等人，J.Biol.Chem.，275：7474-7480(2000)；和Furge等人，Oncogene， 19：5582-5589(2000))。多种上述信号传导分子在细胞增殖中的作用已得以充 分确定。
Met(也称为肝细胞生长因子受体(HGFR))主要表达在上皮细胞中，但也 已在内皮细胞、成肌细胞、造血细胞和运动神经元中鉴定出Met。已将HGF 的过度表达和Met的激活与多种不同肿瘤类型的发作和进展及转移性疾病的 促进关联起来。将Met与癌症联系起来的最初证据已如下得以支持：鉴定出 激酶结构域的错义突变(missense mutation)，所述错义突变使个体易患乳头状 肾癌(papillary renal carcinomas，PRC)和肝细胞癌(hepatocellular carcinomas， HCC)(Lubensky等人，Amer.J.Pathology，155：517-526(1999))。也已在以下疾病 中鉴定出Met的突变形式：卵巢癌(ovarian cancer)、儿童HCC、胃癌、头颈 鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma)、非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma)和结肠直肠转移(colorectal metastasis)(Christensen等人， Cancer Res.，63：7345-7355(2003)；Lee等人，Oncogene，19：4947-4953(2000)； 和Direnzo等人，Clin.Cancer Res.，1：147-154(1995))。另外，支持Met在癌症 中的作用的进一步证据基于HGF和Met受体在各种肿瘤中的过度表达，这 些肿瘤包括甲状腺癌、卵巢癌和胰腺癌。已显示HGF和Met受体的过度表 达在结肠直肠癌的肝转移中是扩增的(Rong等人，Cancer Res.， 55：1963-1970(1995)；Rong等人，Cancer Res.，53：5355-5360(1993)；Kenworthy 等人，Br.J.Cancer，66：243-247(1992)；和Scarpino等人，J.Pathology， 189：570-575(1999))。已在人胃癌中描述和鉴定了TPR-Met(一种与CML中的 BCR/Abl相似的激活形式)(Proc.Natl.Acad.Sci.，88：4892-4896(1991))。在患有 浸润性乳腺癌(invasive breast carcinoma)的患者中及在对非小细胞肺癌患者进 行的最新研究中，所述受体或配体的表达是存活降低的预测因子，这进一步 将Met与肿瘤进展联系起来(Camp等人，Cancer，86：2259-2265(1999)和 Masuya等人，Br.J.Cancer，90：1555-1562(2004))。一般而言，源于间充质细胞 的大多数人肿瘤和肿瘤细胞系不适当地表达HGFR和/或HGF。
许多实验数据支持HGF和Met在以下过程中的作用：肿瘤浸润、肿瘤 生长、肿瘤存活和最终导致转移的肿瘤进展。在临床前，HGF的转基因表达 (transgenic expression)导致转移表型(Takayama等人，Proc.Natl.Acad.Sci.， 94：701-706(1997))，且扩增的/过度表达的Met自发性地对NIH-3T3细胞进行 转化(Cooper等人，EMBO J.，5：2623-2628(1986))。
已显示生物试剂如靶向于HGF或Met的核酶、抗体和反义RNA可抑制 肿瘤发生(Stabile等人，Gene Therapy，11：325-335(2004)；Jiang等人，Clin. Cancer Res.，9：4274-4281(2003)；和Genentech美国专利6,214,344(2001))。因 此，预期靶向于Met的选择性小分子激酶调节剂就治疗下述癌症而言具有治 疗潜力，在所述癌症中Met受体的激活在原发性肿瘤和继发性转移的发育和 进展中发挥关键作用。也已知HGF调节血管发生即肿瘤生长和散布 (dissemination)中的关键过程。因此，这类调节剂也潜在地对依赖于血管发生 的疾病具有作用，所述依赖于血管发生的疾病可包括糖尿病性视网膜病、黄 斑变性(macular degeneration)、肥胖症等及炎性疾病如类风湿性关节炎。
化合物(I)可用于治疗癌症，例如，依赖于Met激活的癌症。Met激活通 过基因扩增、激活的Met突变和/或HGF刺激来调节。因此，所述治疗包括 向患者给药化合物(I)或可药用盐。已经发现，因为相对于已知Met激酶抑制 剂提高的潜力，化合物(I)对于治疗癌症特别有用。
在一个实施方案中，提供了治疗癌症的方法，其包括向需要的哺乳动物 给药化合物(I)，其中化合物(I)为晶体形式N-1。该实施方案的方法可用于治 疗多种癌症，包括但不限于，膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、头颈癌、 肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺/胆囊癌、前列腺癌、甲状腺癌、骨肉瘤、 横纹肌肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、纤维肉瘤、胶质母细胞瘤/星形细 胞瘤、黑色素瘤和间皮瘤。优选地，使用该实施方案的方法治疗肺癌、头颈 癌、胃癌或膀胱癌。优选地，给药治疗有效量的化合物(I)，其中化合物(I)为 晶体形式N-1。
在一个实施方案中，提供治疗患者中的癌症的方法，其中所述癌症依赖 于Met激活，其中所述Met激活通过基因扩增、激活的Met突变和/或HGF 刺激来调节，所述方法包括向需要的患者给药治疗有效量的化合物(I)，其中 化合物(I)为晶体形式N-1。
在另一个实施方案中，治疗至少癌症的方法涉及提供给药形式N-1的化 合物(I)，其中形式N-1为基本上纯的。
给药的化合物(I)的量和治疗具体癌症的剂量方案取决于许多因素，包括 受试者的年龄、体重、性别和医疗状况，疾病类型，疾病严重性，给药的途 径和频率，和所用的具体化合物。因此，所述给药方案可变化很大，但可使 用标准方法来常规确定。约0.01至500mg/kg体重、优选为约0.5至约50mg/kg 体重且最优选为约0.1至20mg/kg体重的日剂量可以是合适的。所述日剂量 可按1-4次/日来给药。
在治疗癌症中，化学治疗药物和/或其它治疗(例如，辐射疗法)的组合经 常是有利的。第二(或第三)药物可具有与主治疗药物相同或不同的作用机理。 使用细胞毒性药物组合可以是尤其有效的，其中所给药的两种或更多种药物 以不同的方式或在细胞周期的不同阶段发挥作用，和/或其中所述两种或更多 种药物具有重叠的毒性或副作用，和/或其中所组合的药物在治疗患者所表现 出的具体病症中各自具有经证实的功效。
因此，化合物(I)可与在治疗癌症或其它增殖性疾病中有用的其它抗癌治 疗组合给药。本发明在本申请中还包括化合物(I)的形式N-1在制备用于治疗 癌症的药物中的用途，和/或本发明包括本申请的化合物(I)的形式N-1与使用 说明书在一起的包装，所述使用说明书指示所述化合物可与用于治疗癌症的 其它抗癌剂或细胞毒性剂和抗癌治疗或细胞毒性治疗联用。本发明还包括化 合物(I)的形式N-1和一种或多种另外的药物以试剂盒形式的组合，例如，例 如其中将它们包装在一起或置于以试剂盒形式一起销售的分开包装中，或其 中将它们包装起来用于配制在一起。
化合物(I)可与以下其它治疗剂一起配制或共同给药，选择所述其它治疗 剂是因为它们在解决与前述病症相关的副作用中是特别有用的。例如，可将 化合物(I)与预防恶心、超敏反应和胃刺激的物质(例如止吐药及H1和H2抗组 胺药)配制在一起。
短语“抗癌治疗”包括但不限于，例如，辐射疗法和外科手术。
其它抗癌剂可选自以下中的任何一种或多种：烷化剂(包括氮芥、烷基磺 酸盐(alkyl sulfonate)、亚硝基脲、乙撑亚胺衍生物和三氮烯)；抗血管生成药(包 括基质金属蛋白酶抑制剂)；抗代谢药(包括腺苷脱氨酶抑制剂、叶酸拮抗剂、 嘌呤类似物和嘧啶类似物)；抗生素或抗体(包括单克隆抗体、CTLA-4抗体、 蒽环类物质)；芳香酶抑制剂；细胞周期应答调节剂；酶；法尼基-蛋白质转 移酶抑制剂；激素和抗激素物质及甾类(包括合成类似物、糖皮质激素、雌激 素/抗雌激素物质[例如SERMs]、雄激素/抗雄激素物质、孕激素、孕酮受体 激动剂及黄体素释放[LHRH]激动剂和拮抗剂)；胰岛素样生长因子(IGF)/胰岛 素样生长因子受体(IGFR)系统调节剂(包括IGFR1抑制剂)；整联蛋白信号传 导抑制剂；激酶抑制剂，包括多激酶抑制剂和/或Src激酶或Src/abl抑制剂、 细胞周期蛋白依赖性激酶[CDK]抑制剂、panHer、Her-1和Her-2抗体、VEGF 抑制剂(包括抗VEGF抗体)、EGFR抑制剂、促分裂原激活蛋白[MAP]抑制剂、 MEK抑制剂、Aurora激酶抑制剂、PDGF抑制剂和其它酪氨酸激酶抑制剂或 丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂；微管断裂剂，例如海鞘素或其类似物和衍生物； 微管稳定剂，例如紫杉烷和天然存在的epothilone及它们的合成和半合成类 似物；微管结合去稳定剂(包括长春花生物碱)；拓扑异构酶抑制剂；异戊二 烯基-蛋白质转移酶抑制剂；铂配位络合物；信号转导抑制剂；和用作抗癌剂 和细胞毒性剂的其它物质，例如生物应答调节剂、生长因子和免疫调节剂。
在与化合物(I)组合使用时，上面的其它治疗药物可例如以Physicians’ Desk Reference(PDR)中指示的量或由本领域普通技术人员以其它方式测定的 量使用。
在另一个实施方案中，使用化合物(I)的形式N-1治疗肺癌、头颈癌、胃 癌和/或膀胱癌。
在一个实施方案中，所述患者为动物。
在另一个实施方案中，所述患者为哺乳动物物种，包括但不限于，例如， 人和家畜，例如，狗、猫和马。
在一个实施方案中，本发明提供在治疗中使用的化合物(I)的形式N-1。
在一个实施方案中，本发明提供化合物(I)的形式N-1在制造用于治疗癌 症的药物中的用途。优选地，所述癌症为膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、 头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺/胆囊癌、前列腺癌、甲状腺癌、 骨肉瘤、横纹肌肉瘤、黑色素瘤、胶质母细胞瘤/星形细胞瘤、MFH/纤维肉 瘤或间皮瘤。
在一个实施方案中，本发明提供化合物(I)的形式N-1在制造用于治疗癌 症的药物中的用途。优选地，所述癌症为膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、 头颈癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺/胆囊癌、前列腺癌、甲状腺癌、 骨肉瘤、横纹肌肉瘤、黑色素瘤、胶质母细胞瘤/星形细胞瘤、MFH/纤维肉 瘤或间皮瘤。
制备和表征的方法
晶体形式可通过多种方法来制备，这些方法包括但不限于，例如从合适 的溶剂混合物中结晶或重结晶、升华、从熔体中生长、从另一相进行固态转 变(solid state transformation)、从超临界流体中结晶和喷射喷雾(jet spraying)。 用于使晶体形式从溶剂混合物结晶或重结晶出来的技术包括但不限于，例如 蒸发溶剂、降低溶剂混合物的温度、用晶体对分子和/或盐的过饱和溶剂混合 物进行种晶、将溶剂混合物冷冻干燥和将抗溶剂(反萃溶剂(countersolvent))加 至溶剂混合物。可使用高通量(high throughput)结晶技术来制备包括多晶型物 的晶体形式。
在Byrn，S.R.等人，Solid-State Chemistry of Drugs，2nd Edition，SSCI，West Lafayette，Indiana(1999)中，讨论了药物的晶体(包括多晶型物)、药物晶体的制 备和表征方法。
就使用溶剂的结晶技术而言，一种或多种溶剂的选择通常取决于一个或 多个因素，包括但不限于，例如化合物的溶解度、结晶技术和溶剂的蒸气压。 可使用多种溶剂的组合。例如可将化合物溶解在第一溶剂中，得到溶液，接 着添加抗溶剂，以降低化合物在溶液中的溶解度，从而引起晶体的形成。抗 溶剂为化合物在其中具有低溶解度的溶剂。
在制备晶体的一种方法中，在合适的溶剂中，将化合物混悬和/或搅拌， 得到浆液，可加热所述浆液，以促进溶解。本申请所使用的术语“浆液”指化 合物的饱和溶液，所述饱和溶液在给定温度也可包含额外量的化合物，以得 到化合物和溶剂的非均质混合物。
可将晶种加至任意结晶混合物，以促进结晶。可通过添加晶种来控制特 定多晶型物的生长和/或控制结晶产物的粒度分布。因此，如例如在Mullin， J.W.等人，“Programmed Cooling of Batch Crystallizers，”Chemical Engineering Science，26：369-377(1971)中所描述，对所需晶种的量的计算取决于可得到的 晶种的尺度和所期望的平均产物粒子的尺度。通常，为了有效控制批次中晶 体的生长而需要小尺度的晶种。小尺度的晶种可通过以下方法来生成：对大 的晶体进行筛分、碾磨或微粒化，或使溶液微结晶(microcrystallization)。应该 小心地对晶体进行碾磨或微粒化，这不会导致结晶性偏离所期望的晶体形式 而出现任意变化(即变成无定形或变成另一种多晶型物)。
可将冷却的结晶混合物真空过滤，所分离的固体可用合适的溶剂例如冷 的重结晶溶剂洗涤。在洗涤后，可使产物在氮气吹扫条件下干燥，得到所期 望的晶体形式。可通过合适的光谱技术或分析技术包括但不限于，例如固态 核磁共振(solid state nuclear magnetic resonance)、差示扫描量热法(DSC)、粉 末X射线衍射(PXRD)等来分析产物，以确保形成化合物的优选的晶体形式。 基于在结晶操作中初始使用的化合物的重量，所得到的晶体形式可按大于约 70重量％分离产率、优选大于90重量％分离产率来制备。任选地，可将产物 共碾磨，或使之通过筛，以去团块。
化合物(I)的晶体形式(包括但不限于，本申请描述的晶体形式)可直接从 用于制备化合物(I)的最终步骤的反应介质来制备。例如，化合物(I)的晶体形 式可如下制备：使用制备化合物(I)的最终处理步骤中的溶剂或溶剂混合物来 制备。可选择地，化合物(I)的晶体形式可通过蒸馏技术或溶剂添加技术来得 到。用于这个目的的合适溶剂包括但不限于，例如上述的非极性溶剂和极性 溶剂(包括但不限于，质子性极性溶剂例如醇类和非质子性极性溶剂例如酮 类)。
在试样中存在多于一种的晶体形式和/或多晶型物，这可通过以下技术来 确定，包括但不限于，例如PXRD或固态核磁共振谱。例如，在比较实验测 量的PXRD图与模拟的PXRD图时存在额外的峰，这可表明试样中存在不止 一种晶体形式和/或多晶型物。模拟的PXRD可从单晶X射线数据来计算。 参见Smith，D.K.，“A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns”，Lawrence Radiation Laboratory，Livermore，California， UCRL-7196(April 1963)。
本发明的化合物(I)的晶体形式(包括但不限于，本申请描述的晶体形式) 可使用多种技术来表征，这些技术的实施对于本领域普通技术人员是众所周 知的。例如，可使用在标准操作条件和温度下进行的单晶X射线衍射来表征 和区分化合物(I)的晶体形式。所述表征，例如基于在固定的分析温度对期望 形式的单晶进行的单胞测量。可例如在25℃的试样温度(sample temperature)， 测量大概的单胞尺度(单位为埃)及晶胞体积、空间群(spatial grouping)、每 晶胞的分子个数和晶体密度。在Stout等人，Chapter 3，X-Ray Structure Determination：APractical Guide，Macmillan Co.，New York(1968)中，详细描述 了单胞，在此将这篇文献引入作为参考。
可选择地，晶格(crystalline lattice)中原子在空间关系中的独特排列可根 据观察到的原子分数坐标来表征。
表征结晶结构的另一种方法是通过粉末X射线衍射分析，其中比较所得 到的衍射分布与表示纯粉末物质的模拟分布。优选地，二者都在相同的分析 温度进行，并且所表征的受试形式的测量值被表达成一系列2θ值(通常为四 个或五个)。
可使用表征晶体形式的其它方法，包括但不限于例如固态核磁共振 (NMR)、DSC热分析图和对结晶体形式态或无定形形态进行粗略检查，或者 上述方法的组合。
使用至少一种下述测试方法来分析至少一种化合物(I)的晶体形式。
单晶X射线测量
采用Bruker-Nonius CAD4系列衍射仪(Bruker Axs，Inc.，Madison WI)收集 数据。通过对25次高角度反射的实验衍射仪设置进行最小二乘法分析，得到 了单胞参数。在恒定的温度，凭借θ-2θ可变扫描技术，利用CuKα辐射 来测量强度，并且只就洛伦兹极化因子(Lorentz-polarization factor) 进行了校正。在扫描末端采集了背景计数，历时扫描时间的一半。可供选择 地，用Bruker-Nonius Kappa CCD 2000系统(使用CuKα辐射收 集单晶数据。Collect程序包中的(Collect：数据采集软件，R.Hooft，Nonius B. V.，1998)中的HKL2000软件包(Otwinowski，Z.等人，Macromolecular Crystallography，Carter，W.C.，Jr.等人，eds.，Academic Press，NY(1997))对测量 到的强度数据进行了索引和处理。当指出时，在数据采集期间使晶体在Oxford Cryosystems Cryostream Cooler(Oxford Cryosystems，Inc.，Devens，MA)的冷流 中冷却。
通过直接方法解析了结构，并且基于观察到的反射，使用较小局部修改 的SDP软件包(SDP，Structure Determination Package，Enraf-Nonius，Bohemia， N.Y.)或结晶学软件包MAXUS(maXus Solution and Refinement Software Suit：S. Mackay，C.J.Gilmore，C.Edwards，M.Tremayne，N.Stewart，and K. Shankland)，对结构进行细化。
通过全矩阵最小二乘法(full matrix least-square)，细化衍生的原子参数(坐 标和温度因子)。在细化过程中最小化的函数为∑w(|Fo|-|Fc|)2。将R定义为 ∑||F|-|F||/∑|Fo|，而Rw[∑w(|Fo|-|Fc|)2/∑w|Fo|2]1/2，其中w为取决于所观察强度误差 的合适的权重函数。在细化过程的各个阶段都检查了差异图(difference map)。 将氢原子引入带有各向同性温度因子的理想化位置，但没有任何氢参数出现 变化。
模拟的PXRD图是在数据采集温度从单晶原子参数生成的，除非另有指 出。(Yin，S.等人，American Pharmaceutical Review，6(2)：80(2003)).
粉末X射线衍射(PXRD)测量-方法A
通过后载法(backloading)，将约200mg的试样填充至Philips PXRD-试样 容器(sample holder)中。将试样容器转移至Philips MPD单元(45KV，40mA，Cu Kα)中，接着在室温在2-32θ范围内采集数据(连续扫描模式，扫描速率0.03 度/秒，自动发散和抗散射狭缝，接收狭缝：0.2mm，试样旋转器：ON)。
粉末X射线衍射测量-方法B
采用Bruker C2GADDS，采集PXRD数据。辐射为Cu Kα(40KV，50mA)。 试样-检测器距离为15厘米。将粉末试样放置在直径小于或等于1mm的玻璃 毛细管中，在数据采集的过程中，使毛细管旋转。在试样暴露时间至少为约 1000秒的情况下，对3≤2θ≤35°收集数据。对所生成的二维衍射弧进行积分， 在3至35°2θ内采用0.02°2θ的步长生成传统的一维PXRD图。
差示扫描量热法(DSC)(敞开盘)
使用Q1000型实施每种晶体形式的差示扫描量热 法(DSC)。对于每个分析，用100ml/min超高纯度氮气吹扫DSC单元/样品室。 用高纯度铟校准仪器。加热速率为10℃/分钟，温度范围为25-300℃。将 热流量(其通过样品重量标准化)相对于测量的样品温度做图。以单位瓦特/克 (“W/g”)报告数据。以吸热峰向下的方式制图。
热重分析(TGA)(敞开盘)
热重分析(TGA)实验在Q500或2950型中实施。将 样品(约10-30mg)置于先前去皮的铂盘中。通过仪器将样品重量准确测量并 记录至千分之一毫克。用氮气以100mL/min吹扫炉。收集以10℃/min加热 速率在室温至300℃之间数据。
固态核磁共振谱(ssNMR)
全部固态C-13NMR测量用Bruker DSX-400，400MHz NMR光谱仪进 行。使用高功率质子去耦和TPPM脉冲序列和倾斜振幅交叉极化(RAMP-CP) 得到高分辨图谱，魔角旋转(MAS)约为12kHz(Bennett，A.E.等人，J.Chem. Phys.，103：6951(1995)；Metz，G.等人，J.Magn.Reson.A，110：219-227(1994))。 将填充至罐式设计的氧化锆转子(canister-design zirconia rotor)中的约70mg样 品用于每个实验。化学位移(δ)参照高频共振被设设为38.56ppm的外部金刚 烷(Earl，W.L.等人，J.Magn.Reson.，48：35-54(1982))。
实施例
实施例1
洁净形式N-1
溶液通过以下方法制备：将35g化合物(I)混合至368mL THF和245mL 乙醇(200标准酒精度)中并将所得浆液加热至65℃，直到化合物(I)完全溶解。 将溶液在55-65℃范围内的温度进行精滤。将滤液温热至60℃并历时25 分钟添加至350mL正庚烷中。将所得浆液在60℃陈化1小时。将浆液历时 1小时冷却至5℃。过滤冷浆液并用2x 100mL乙醇∶正庚烷(60∶40v/v)溶液 洗涤结晶灰白色固体。在真空烘箱中于50-60℃的温度干燥湿滤饼，得到35 g呈形式N-1的化合物(I)(99.7％纯度)。PXRD：方法B.
实施例2
倍半水合物形式H1.5-2
在搅拌下，在氮气下，将化合物(I)悬浮在水(200mL)中并加热至96℃， 并保持2小时。当搅动停止时，固体留在底部。将固体物质在室温陈化5小 时。过滤收集固体，用水(2x 10mL)洗涤，并空气抽吸干燥4小时，得到2.66 g(78％，＞98AP)。PXRD：方法B.
实施例3
一水合物盐酸盐形式H-1
制备溶液：在足量的二甲基乙酰胺中含有约30mg化合物(I)，以充分溶 解化合物。接着，添加约0.5ml 1N盐酸水溶液。将溶液混合，并滴加乙酸异 丙酯，直到溶液变得浑浊。将溶液放置过夜。过滤所得浆液，并用乙酸异丙 酯洗涤结晶固体。PXRD：方法B.
实施例4
洁净盐酸盐形式N-2
溶液通过以下方法制备：在40℃将100mg化合物(I)添加至5.6mL二 氯甲烷。接着，添加16.4μL 37％HCl溶液。将溶液在40℃搅拌1小时，然 后历时1小时从40℃冷却至20℃。过滤所得浆液。将湿滤饼用0.5mL二 氯甲烷洗涤，并在真空烘箱中于50℃干燥过夜。将干滤饼添加至0.5mL乙 酸异丙酯以形成浆液。将浆液在50℃搅拌15小时，历时1小时冷却至20℃， 并搅拌过夜。过滤浆液，并将所得湿滤饼在真空烘箱中于50℃干燥过夜， 得到盐酸盐形式N-2的种晶。
溶液通过以下方法制备：在40℃将1g化合物(I)混合至56mL二氯甲 烷中。接着，添加100μL 37％HCl溶液。向溶液添加5mg化合物(I)的洁净 盐酸盐的种晶。溶液变得浑浊。接着，将63.5μL 37％HCl溶液添加至浑浊 溶液。将浑浊溶液在40℃搅拌20分钟，然后历时40分钟从40℃冷却至 20℃。将所得浆液搅拌4小时，然后过滤。将湿滤饼用3mL二氯甲烷洗涤， 然后在真空烘箱中于50℃干燥过夜。干滤饼重0.83g。将干滤饼在8.3mL 乙酸异丙酯中重新浆化。将浆液在50℃搅拌15小时，历时1小时冷却至 20℃，并继续搅拌过夜。过滤浆液。将湿滤饼用2.4mL乙酸异丙酯洗涤， 然后在真空烘箱中于50℃干燥过夜。干滤饼重0.74g。PXRD：方法A.
实施例5
磷酸盐形式
溶液通过以下方法制备：在70℃将100mg化合物(I)添加至1mL乙酸 异丙酯和0.5mL N-甲基吡咯烷酮的混合物。单独地，在室温将13.5μL(1.0 当量)85％H3PO4溶解在0.5mL异丙醇中。将H3PO4溶液历时30分钟分份添 加至化合物(I)溶液。将所得溶液历时60分钟从50℃冷却至20℃，并搅拌 4天。过滤所得浆液，将湿滤饼用0.5mL乙酸异丙酯洗涤并在真空烘箱中于 50℃干燥过夜，得到化合物(I)的磷酸盐的种晶。
溶液通过以下方法制备：在50℃将5g化合物(I)混合至12mL二甲基 乙酰胺和5mL乙酸异丙酯的混合物中。在单独的容器中，通过以下方法制 备磷酸溶液：在室温将663μL(1.0当量)85％H3PO4混合至12.5mL异丙醇中。 接着，将2mL磷酸溶液添加至化合物(I)的溶液，接着添加50mg化合物(I) 的磷酸盐的种晶。化合物(I)的溶液变为浆液。接着，使用注射泵，历时1小 时添加剩余的磷酸溶液。然后，使用注射泵，历时1小时添加62.5mL乙酸 异丙酯。将浆液在50℃搅拌10分钟，历时60分钟从50℃冷却至20℃。 继续搅拌2小时。过滤浆液。用20mL乙酸异丙酯洗涤湿滤饼。将湿滤饼在 真空烘箱中于50℃干燥过夜。所得干燥粉末重5.75g。PXRD：方法B.
表5
在室温的特征衍射峰位置(°2θ±0.2)，基于用具有旋转毛细管的衍射仪 (CuKα)收集的高质量图谱，用NIST其它适合的标准校准2θ
实施例6
制备含有10mg化合物(I)、1％w/v羟丙基纤维素、1％w/vPH101微晶纤维素、0.1％w/v TWEEN 80表面活性剂和25％v/v单糖浆NF 的微混悬剂
在第一容器中，将1g羟丙基纤维素添加至50mL水中，并将所得混合 物使用磁搅拌子搅拌约2-3小时，得到澄清溶液。在第二容器中，将25mL 水添加至0.1g TWEEN 80表面活性剂，并将所得混合物搅拌15分钟，直到 表面活性剂溶解。然后将TWEEN 80表面活性剂溶液添加至第一容器的内容 物。接着，将25mL单糖浆NF添加至第一容器中。将第一容器的内容物搅 拌15-20分钟，形成均匀溶液。接着，添加PH 101微晶纤维素 (FMC Corporation，Philadelphia，PA)并搅拌10分钟，得到均匀分散体。所得 的媒介物溶液包含1％w/v羟丙基纤维素、1％w/vPH101微晶纤维 素、0.1％w/v TWEEN 80表面活性剂和25％v/v单糖浆NF。
化合物(I)的微混悬剂通过以下方法制备：将2mL所述媒介物溶液添加 至10mg化合物(I)，同时连续搅拌。将所得混合物手工涡旋以确保化合物(I) 粒子的湿润，然后超声处理约20分钟，得到化合物(I)粒子的微混悬剂。
TWEEN 80表面活性剂：脱水山梨醇聚氧乙烯(20)醚单油酸酯(ICI Americas Inc.，Delaware)。PH101：微晶纤维素(FMC Corporation， Delaware)。单糖浆：850g蔗糖在水中，1000mL总体积。％w/v是指以克 计添加剂的重量/以mL计微混悬剂的体积。
实施例7
制备含有100mg化合物(I)、1％w/v羟丙基纤维素、1％w/vPH101微晶纤维素、0.1％w/v TWEEN 80表面活性剂和25％v/v单糖浆NF 的微混悬剂
化合物(I)的微混悬剂通过以下方法制备：将5mL实施例6的媒介物添 加至100mg化合物(I)中，同时连续搅拌。将所得混合物手工涡旋以确保化合 物(I)粒子的湿润，然后超声处理约20分钟，得到化合物(I)粒子的微混悬剂。
实施例8
制备包含呈形式N-1的化合物(I)和微晶纤维素的片剂
使用顶置式混合器制备3.0％(w/w)羟丙基纤维素(HPC)稳定剂-粘合剂溶 液。使用泡沫产生器将所得羟丙基纤维素溶液流与空气流混合，得到HPC泡 沫体。在6L容量的高剪切混合器中混合表6中列出的固体粒内成分。接着， 在相同的混合器中使用所述HPC泡沫体将混合的粒内成分粒化。使颗粒通过 #4目筛并盘式干燥至＜3重量％的湿含量。使用配有～1mm开口筛的磨碎干燥的颗粒。使用翻滚混合器将粒外硅胶、交联羧甲纤维素钠和硬脂酸 镁共混至磨碎的颗粒，得到用于制片的储备颗粒。使用用于制片的储备颗粒 制备25mg和100mg强度的片剂(表7)。
表6
表7
实施例9
制备包含呈形式N-1的化合物(I)和微晶纤维素/甘露醇的片剂
所述片剂根据实施例8中描述的一般操作使用表8中的成分制备。
表8
表9
实施例10
制备经湿制粒法制造的包含呈形式N-1的化合物(I)的片剂
粒化水溶液通过以下方法制备：使用顶置式混合器将2.5％w/w羟丙基 纤维素和10％w/w泊洛沙姆-188表面活性剂溶解在水中。在1L容量高剪切 混合器中混合表10中列出的固体粒内成分。接着，在相同的混合器中使用所 述粒化溶液粒化混合的粒内成分。使颗粒盘式干燥至＜3重量％的湿含量。将 干燥的颗粒通过#20目筛手筛。使用翻滚混合器将粒外硅胶、交联羧甲纤维 素钠和硬脂酸镁共混至磨碎的颗粒，以提供用于制片的储备颗粒。使用用于 制片的储备颗粒制备100mg强度片剂。
表10
对比例11
制备经干制粒法制造的包含呈形式N-1的化合物(I)的片剂
在1L容量高剪切混合器中混合表11中列出的固体粒内成分。接着，将 混合的粒内成分使用配有3/4英寸平面击块工具的F-压机击块。将预压块先后 通过#4目筛和#20目筛手筛。使用翻滚混合器将粒外硅胶、交联羧甲纤维素 钠和硬脂酸镁共混至磨碎的颗粒，以提供用于制片的储备颗粒。使用用于制 片的储备颗粒制备100mg强度片剂。
表11
实施例12
微混悬剂的稳定性
使用各种聚合物，用呈形式N-1的化合物(I)(无水)的微粉化粒子制备微 混悬剂，聚合物浓度基于微混悬剂为20mg/mL。在18-24小时后使用PXRD 评价晶体形式的稳定性。
表12
结果显示，纤维素醚聚合物如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和甲基 纤维素的使用延缓或防止分散在含水介质中的化合物(I)的形式N-1的微粉化 粒子转化成倍半水合物形式H1.5-2。相反，聚乙烯基吡咯烷酮的使用没有延 缓或防止分散在含水介质中的化合物(I)的形式N-1的微粉化粒子转化成倍半 水合物形式H1.5-2。
实施例13
片剂的稳定性研究
在各种温度和湿度条件加速贮存至多1个月后，评价实施例9的25mg 片剂的化学稳定性。
表13
RT：室温；RH：相对湿度
表13中的结果显示，片剂具有可接受的化学稳定性。
将在100mg实施例8的片剂中化合物(I)的晶体N-1形式的物理稳定性 在加速贮存条件(40℃/75％RH敞开)下评价6周。粉末X-射线衍射(PXRD) 分析显示化合物(I)仍为N-1形式，由此表明，片剂在加速贮存条件下对形式 转化具有耐性。
将实施例10和11的片剂通过PXRD在加速贮存条件(40℃/75％RH敞 开)下评价至多3个月。经湿制粒法制造的片剂(实施例10)在24小时和3个 月的时间点主要含有N-1形式。相反，经干制粒法制造的片剂(实施例11)显 示在24小时内形式转化至H1.5-2的迹象，并且经过3个月几乎完全形式转 化至H1.5-2。数据表明，在片剂基质内稳定剂的布置对于在贮存期间维持N-1 形式是重要的。
表14
在各种条件贮存一个月之前和之后，评价100mg实施例9的片剂的溶 出时间。溶出介质为0.1N HCl溶液。表15报告了3种片剂在每种贮存条件 的平均溶出时间。
表15
表15中的结果显示，片剂在加速条件下贮存之后具有可接受的溶出时 间。
实施例14
药代动力学研究
将含有化合物(I)的磷酸盐的实施例7的微混悬剂、片剂和硬明胶胶囊剂 在用五肽胃泌素(pentagastrin)预处理的狗中以10mg/kg口服给药。将所得暴 露量与通过与相同动物中的静脉内剂量对比而计算的绝对生物利用度进行对 比。
表16
*含有50％w/w(游离碱当量)的化合物(I)载荷、乳糖(15％w/w)、微晶纤 维素PH 101(24％w/w)和泊洛沙姆188(2％w/w)的胶囊剂。
#实施例10的片剂。
##片剂含有40％w/w的化合物(I)载荷、羟丙基纤维素(4.0％w/w)、微晶 纤维素(48.1％w/w)、交联羧甲纤维素钠(7.0％w/w)、硅胶(0.4％w/w)和硬脂 酸镁(0.5％w/w)并且根据实施例8中所述的一般操作制备。
结果显示，包含呈形式N-1的化合物(I)的粒子的微混悬剂的AUCt和Cmax的平均药代动力学参数值分别为117.0μM*h和23.8μMolar。相反，包含呈 倍半水合物形式H1.5-1的化合物(I)的粒子的微混悬剂的AUCt和Cmax的平均 药代动力学参数值分别为42μM*h和9.5μMolar。结果表明，形式N-1的粒 子与倍半水合物形式H1.5-1的粒子相比具有较高生物利用度，即使倍半水合 物形式H1.5-1粒子比形式N-1粒子小。此外，包含D90粒度为12μm的形式 N-1的片剂的平均药代动力学参数值大于包含形式H1.5-1的微混悬剂的值， 表明具有较高生物利用度。
制备了包含具有两种不同粒度的化合物(I)的形式N-1的胶囊剂。粒度对 生物利用度的影响在下表17中示出。
表17
*与静脉内数据相比。
结果显示，呈形式N-1的化合物(I)提供为D90粒子直径为10微米的粒子 的绝对生物利用度约为32％；相比之下，D90粒子直径为70微米的粒子的绝 对生物利用度为12％。
机译： 包含N-（4-（2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基）-3-氟苯基）-4-乙氧基-1-（4-氟苯基）-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3的药物组合物-羧酰胺
机译： 包含N-（4-（2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基）-3-氟苯基）-4-乙氧基-1-（4-氟苯基）-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3的药物组合物-羧酰胺
机译： N-（4-（2-氨基-3-氯吡啶-4-基氧基）-3-氟苯基）-4-乙氧基-1-（4-氟苯基）-2-氧代1,2-二氢吡啶-3-药物组合物含有羧酰胺
