去丙二酸单酰基阿扎霉素F及其制备方法和在制备治疗MRSA感染药物中的应用

摘要

本发明公开了去丙二酸单酰基阿扎霉素F及其制备方法和在制备治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染药物中的应用。将阿扎霉素F在碱性甲醇溶液中反应生成去丙二酸阿扎霉素F，然后再经分离制备，得去丙二酸单酰基阿扎霉素F。抗MRSA活性试验证明：所得的去丙二酸单酰基阿扎霉素F对MRSA试验菌株的MIC为0.25~0.50μg/mL，为阿扎霉素F的8~16倍，且稳定性和水溶性增强。显示去丙二酸单酰基阿扎霉素F具有显著的抗MRSA活性，具有良好的开发前景，可用于制备治疗MRSA感染的药物。

说明书

技术领域

本发明涉及去丙二酸单酰基阿扎霉素F及其制备方法和在制备治疗MRSA感染药物中的应用。 

背景技术

近年来，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)感染遍及全球各地，感染率呈持续上升趋势，并对多种结构类型的临床抗生素相继出现耐药，其速度已超过目前新抗生素的研发速度，成为超级广谱耐药菌，严重威胁着人类的生命健康。病原菌的耐药性是天生固有的，人们在抗生素药物的使用过程中，对这些耐药菌起到了富集作用，而使其变为优势病原菌进行广泛传播与感染。长期的临床和科研实践表明：很多抗菌药物对敏感病原菌具有杀灭或抑制作用，但却不能杀灭或抑制耐药菌，即使是从未接触过病原菌的抗菌药物，所以抗耐药菌药物的发现必需通过筛选，而无法根据现有抗生素的抗菌作用进行简单的推断。目前流行最广的耐药菌为MRSA，由于其对多种结构类型的抗生素耐药，已被人们称为“超级病原菌”。故抗MRSA药物的发现和研发显得尤为迫切。 

阿扎霉素F为36元大环内酯，主要包括阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a。先后从Streptomyces hygrpscopicus var. azalomyceticus和Streptomyces sp. 211726 两菌株中分离并鉴定，它们具有抗革兰氏阳性菌、真菌和免疫抑制活性，并在临床上有一定应用。但活性有待进一步提高，且结构不稳定，容易降解，难溶于水，从而限制了其在临床上的广泛应用。2011年我们通过结构修饰得到了17位烷基化的去丙二酸单酰基阿扎霉素F衍生物（申请号：201110314705.7），并证明其抗菌活性有所增强，但未证明其具有抗耐药菌的活性。按照常规的方法，在脱去23位丙二酸单酰基的之前，必需对17位的羟基进行烷基化保护，否则碱性水解脱去丙二酸单酰基的同时，将导致结构中半缩酮环的开环，进而导致抗菌活性的丧失。而对17位羟基保护后，脱保护将会导致化合物的降解，故阿扎霉素F自1959年发现至今，仍未获得去丙二酸单酰基阿扎霉素F，本发明通过改变水解条件，在不保护17位半缩酮羟基的同时制得去丙二酸单酰基阿扎霉素F，并通过试验证明所得化合物具有显著的抗MRSA活性，比修饰前的阿扎霉素F增强8～16倍，为临床阳性对照药利奈唑胺2~8倍。且稳定性和水溶性得到改善，显示良好的应用前景，可用应用于抗多MRSA药物的制备。 

发明内容

本发明的目的是提供一种新化合物去丙二酸单酰基阿扎霉素F及其制备方法和在制备抗MRSA药物中的应用。 

本发明的去丙二酸单酰基阿扎霉素F，其分子结构如式Ⅰ所示： 

式Ⅰ

其中，R₁为甲基或氢；R₂为甲基或氢。

当R₁和R₂均为甲基时，式Ⅰ为去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）； 

当R₁为甲基，R₂为氢时，式Ⅰ为去丙二酸单酰基阿扎霉素F_4a（2）；

当R₁和R₂均为氢时，式Ⅰ为去丙二酸单酰基阿扎霉素F_3a（3）；

本发明的去丙二酸单酰基阿扎霉素F衍生物的制备方法是：取一定量的氢化钠溶于甲醇中，搅拌下加入一定量的阿扎霉素F，在-5~5℃下搅棒反应8~18 h，反应混合物用盐酸水溶液中和，减压浓缩，浓缩物经反相高效液相色谱（HPLC）分离，用一定比例的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F的洗脱液，减压浓缩、干燥得去丙二酸单酰基阿扎霉素F。

所述去丙二酸单酰基阿扎霉素F制备方法中所用原料阿扎霉素F的分子结构如式Ⅱ所示： 

式Ⅱ

其中，R₁为甲基或氢，R₂为甲基或氢；当R₁，R₂均为甲基时，即为阿扎霉素F_5a；R₁为甲基，R₂为氢时，即为阿扎霉素F_4a；R₁，R₂均为氢时，即为阿扎霉素F_3a，以上化合物均可由商业购买获得，也可由商业可获得的链霉菌Streptomyces hygrpscopicus var. azalomyceticus按照已知的方法和技术，经发酵、分离制备获得，还可通过链霉菌Streptomyces sp. 211726按照文献(Yuan Ganjun, et al. Magn Reson Chem, 2011, 49 (1): 30-37.）方法经发酵、分离制备获得。

所述去丙二酸单酰基阿扎霉素F制备方法中所用的原料阿扎霉素F可选用阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a中的任意一个，也可为任意二个或三个化合物的混合物。 

所述去丙二酸单酰基阿扎霉素F制备方法中水解丙二酸单酰基所用的碱为氢化钠。 

本发明的去丙二酸单酰基阿扎霉素F衍生物制备的合成路线如下： 

。

本发明是在氢化钠的甲醇溶液中，水解阿扎霉素F分子结构中23位的丙二酸单酰基，制得去丙二酸单酰基阿扎霉素F。一方面克服了直接用NaOH或KOH碱水解导致分子结构中半缩酮环的开环；另一方面，避免了因水解丙二酸单酰基需先保护17位羟基而带来29位羟基易烷基化的缺点。所得去丙二酸单酰基阿扎霉素F分子结构的稳定性增强，同时水溶性显著增加。经实验证明：去丙二酸单酰基阿扎霉素F对MRSA具有显著的抑制和杀灭作用，其最低抑菌浓度（MIC）为0.25～0.50 μg/mL，且活性为阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a的8～16倍，为临床阳性对照药利奈唑胺2~8倍。显示其作为抗MRSA药物开发的良好前景，可用于制备治疗MRSA感染的药物。 

具体实施方式

实施例 1 ：

取100 mg氢化钠溶于100 ml甲醇中，搅拌下加入1.1 g（1 mmol）阿扎霉素F_5a，在0℃下搅棒反应12 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，用体积比为80:20的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a的洗脱液，37℃下减压浓缩、冷冻干燥，得0.83 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）。

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）：分子式为C₅₄H₉₅N₃O₁₄，溶于水，易溶于甲醇、乙醇，m.p. 126.0~128.0℃，ESI-MS (m/z): 1010.7 [M+H]⁺。¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：169.2(s), 157.4(s), 145.0(d), 139.3(s), 137.0(s), 135.3(d), 132.0(d), 129.4(d), 128.6(d), 127.4(d), 127.0(d), 126.3(d), 99.7(s), 80.3(d), 77.2(d), 75.3(d), 74.8(d), 74.2(d), 72.3(d), 71.5(d), 69.7(d), 67.4(d), 66.3(d), 65.8(d), 65.4(d), 47.7, 46.7, 46.0, 44.8, 44.2, 44.1, 42.7, 41.7, 41.2, 41.0, 40.6, 39.3, 35.0, 34.5, 33.5, 33.2, 30.3, 30.1, 29.7, 28.2, 28.2, 27.8, 17.6, 16.9, 14.8, 14.0, 13.3, 12.8, 10.7。 

实施例 2 ：

取100 mg氢化钠溶于100 ml甲醇中，搅拌下加入1.1 g（1 mmol）阿扎霉素F_4a，在5℃下搅棒反应8 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，用体积比为78:22的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_4a的洗脱液，37℃下减压浓缩、冷冻干燥，得0.79 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_4a（2）。

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_4a（2）：分子式为C₅₃H₉₃N₃O₁₄，溶于水，易溶于甲醇、乙醇，m.p. 126.5~127.7℃，ESI-MS (m/z): 996.7 [M+H]⁺。¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：169.1(s)、158.3(s)、145.1(d)、139.3(s)、137.0(s)、135.2(d)、132.0(d)、129.4(d)、128.5(d)、127.4(d)、127.0(d)、126.3(d)、99.8(s)、80.3(d)、77.1(d)、75.3(d)、74.9(d)、74.1(d)、72.3(d)、71.5(d)、69.7(d)、67.4(d)、66.3(d)、65.8(d)、65.3(d)、47.7、46.7、46.0、44.7、44.2、44.1、42.6、41.7、41.2、41.0、40.6、39.3、35.0、34.5、33.5、33.2、30.3、30.1、29.7、28.2、27.9、17.6、16.9、14.8、14.0、13.3、12.8、10.7。 

实施例 3 ：

取200 mg氢化钠溶于250 ml甲醇中，搅拌下加入2.1 g（2 mmol）阿扎霉素F_3a，在-5℃下搅棒反应18 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，用体积比为78:22的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_3a的洗脱液，37℃下减压浓缩、冷冻干燥，得1.5 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_3a（3）。

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_3a（3）：分子式为C₅₂H₉₁N₃O₁₄，溶于水，易溶于甲醇、乙醇，m.p. 126.3~127.5℃，ESI-MS (m/z): 982.6 [M+H]⁺。¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：169.1(s)、158.7(s)、145.1(d)、139.3(s)、137.0(s)、135.2(d)、132.0(d)、129.4(d)、128.5(d)、127.4(d)、127.0(d)、126.3(d)、99.9(s)、80.3(d)、77.2(d)、75.3(d)、74.9(d)、74.1(d)、72.3(d)、71.5(d)、69.8(d)、67.4(d)、66.3(d)、65.8(d)、65.3(d)、47.7、46.7、46.0、44.7、44.2、44.1、42.6、41.6、41.2、41.0、40.6、39.3、35.0、34.5、33.5、33.2、30.3、30.1、29.7、27.9、17.6、16.9、14.8、14.0、13.3、12.8、10.7。 

实施例 4 ：

取链霉菌Streptomyces hygrpscopicus var. azalomyceticus菌株适量，接种到ISP2平板培养基上，培养4d，取活化的菌株适量，接种到装有50 mL ISP2培养液的500 mL锥形瓶中，28℃、200 rpm条件下摇床培养72 h，获得菌株的种子培养液。将该种子培养液按10%接种量分别接种于装有500 mL生产培养液[培养基组成（g/L）：甘油5 g，葡萄糖5 g，酵母粉15 g，黄豆粉5 g，琥珀酸铵2 g,氯化钠3 g，去离子水1L，pH 7.1～7.3]的3000 mL三角烧瓶中，28℃、225 rpm的条件下摇床培养7 d。重复上述操作至获得发酵混合物100 L。用离心方法将菌丝体和发酵液分离。菌丝体用甲醇浸提3次，得甲醇提取液，减压浓缩至不含甲醇，冻干，得冻干粉末282.3 g。按文献（Yuan Ganjun, et al. Magn Reson Chem, 2011, 49 (1): 30-37）方法分别制得阿扎霉素F_5a（12.1 g）、阿扎霉素F_4a（7.3 g）和阿扎霉素F_3a（3.6 g）。

阿扎霉素F_5a：分子式为C₅₇H₉₇N₃O₁₇，白色无定形粉末易溶于甲醇，溶于DMSO，微溶于水，不溶于氯仿、乙酸乙酯；m.p. 130~132℃（Dec.）；UVnm（lg ε）：240（4.6），269（4.4）；IR（cm^-1）：3385, 2964, 2936, 1701, 1636, 1597, 1378, 1243, 1089, 1056, 969；ESI-MS：1096.7 [M+H]⁺；¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：174.0、171.6、170.1、157.3、146.2、140.3、140.2、136.2、132.5、130.3、128.6、127.6、126.7、125.1、99.7、80.7、77.2、75.7、74.8、74.2、72.3、72.3、70.7、69.7、66.0、65.5、65.4、46.6、46.1、44.6、44.5、44.4、44.2、42.1、41.8、41.7、41.2、41.1、40.8、39.3、35.1、34.5、33.6、33.6、30.7、30.7、29.8、28.4、28.4、27.9、17.6、17.2、14.8、14.3、13.3、12.9、10.4。 

阿扎霉素F_4a：分子式为C₅₆H₉₅N₃O₁₇，白色无定形粉末，易溶于甲醇，溶于DMSO，微溶于水，不溶于氯仿、乙酸乙酯；m.p. 130~132℃（Dec.）；UVnm（lgε）：240（4.6），269（4.4）；IR（cm^-1）：3385, 2964, 2936, 1701, 1638, 1597, 1378, 1243, 1089, 1056, 969；ESI-MS：1082.7 [M+H]⁺；¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：173.9、171.6、170.1、158.3、146.1、140.2、140.1、136.2、132.5、130.3、128.6、127.6、126.8、125.2、99.8、80.7、77.1、75.7、75.0、74.2、72.3、72.2、70.7、69.7、66.1、65.5、65.4、46.5、46.1、44.6、44.6、44.5、44.1、42.1、42.0、41.7、41.2、41.0、40.5、39.2、35.1、34.6、33.6、33.6、30.8、30.8、29.8、28.4、27.9、17.6、17.1、14.8、14.3、13.3、12.9、10.5。 

阿扎霉素F_3a：分子式为C₅₅H₉₃N₃O₁₇，白色无定形粉末，易溶于甲醇，溶于DMSO，微溶于水，不溶于氯仿、乙酸乙酯；m.p. 132~133℃（Dec.）；UVnm（lgε）：240（4.6），269（4.4）；IR（cm^-1）：3385, 2964, 2936, 1701, 1638, 1597, 1378, 1243, 1089, 1056, 969；ESI-MS：1068.6 [M+H]⁺；¹³C NMR（MeOH-d₄, 100 MHz）δppm：174.0、171.8、170.1、158.7、146.2、140.3、140.1、136.2、132.6、130.3、128.5、127.6、126.8、125.2、99.9、81.2、77.2、75.7、75.0、73.9、72.3、72.2、70.8、69.8、66.2、65.5、65.4、46.2、45.8、44.6、44.6、44.5、44.1、42.1、41.9、41.7、41.2、40.7、40.5、39.3、35.2、34.6、33.6、33.6、30.7、30.7、29.9、27.9、17.7、17.0、14.8、14.4、13.3、12.8、10.5。 

取300 mg氢化钠溶于400 ml甲醇中，搅拌下加入3.3 g（3 mmol）阿扎霉素F_5a，在0℃下搅棒反应12 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，用体积比为80:20的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a的洗脱液，37℃下减压浓缩、冷冻干燥，得2.4 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）。 

实施例 5 ：

取链霉菌Streptomyces hygrpscopicus var. azalomyceticus菌株适量，接种到ISP2平板培养基上，培养4d，取活化的菌株适量，接种到装有50 mL ISP2培养液的500 mL锥形瓶中，按实施例4所述方法，制备种子液、发酵，至获得发酵液50 L。用离心方法将菌丝体和发酵液分离。菌丝体用甲醇浸提3次，得甲醇提取液，减压浓缩至不含甲醇，冻干，得冻干粉末135.9 g。然后用氯仿-甲醇（1:1）混合溶剂溶解，过滤去不溶解物后，挥干溶剂，干法上样，进行硅胶柱层析（硅胶200~300目），用氯仿-甲醇（5:1，2:1）为溶剂进行梯度洗脱，收集富含阿扎霉素F的部分（阿扎霉素F_5a、阿扎霉素F_4a和阿扎霉素F_3a），37℃下减压浓缩，40%甲醇溶解，过滤，4℃下结晶24 h，得15.3 g阿扎霉素F（含57.2%阿扎霉素F_5a、25.7%阿扎霉素F_4a和13.6%阿扎霉素F_3a）

取500 mg氢化钠溶于700 ml甲醇中，搅拌下加入5.4 g上述制备的阿扎霉素F，在0℃下搅棒反应12 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，依次用体积比为75:25、80:20的甲醇-水溶液洗脱，分别收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_3a、F_4a和F_3a的洗脱液，37℃下分别减压浓缩、冷冻干燥，得1.42 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）、0.56 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_4a（2）和0.34 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（3）。

实施例 6 ：

按实施例5方法，用链霉菌Streptomyces hygrpscopicus var. azalomyceticus菌株制备种子液、发酵，至获得发酵液30 L。然后按实例5方法制得9.2 g阿扎霉素F（含60.5%阿扎霉素F_5a、23.1%阿扎霉素F_4a和12.8%阿扎霉素F_3a）

取100 mg氢化钠溶于100 ml甲醇中，搅拌下加入1.1 g阿扎霉素F，在0℃下搅棒反应12 h。反应混合物用5 M的盐酸水溶液中和，40℃下减压浓缩，浓缩物经C-18反相高效液相色谱分离，依次用体积比为80:20的甲醇-水溶液洗脱，收集富含去丙二酸单酰基阿扎霉素F（包含1、2和3）的洗脱液，37℃下分别减压浓缩、冷冻干燥，得0.77 g去丙二酸单酰基阿扎霉素F（1的含量为60.2%、2的含量为21.7%和3的含量为15.1%）。

实施例 7：

去丙二酸单酰基阿扎霉素F的抗MRSA活性试验

1、实验材料及方法

试验菌株：

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌标准菌株：MRSA ATCC 33592（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus ATCC 33592）；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床菌株：MRSA 01；MRSA 02和MRSA 03。

牛肉膏蛋白胨培养基： 

牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，氯化钠5 g，纯水1000 mL，pH 7.4。

阳性对照药：利奈唑胺（Linezolid）。 

测试样品溶液的配制：分别准确称取利奈唑胺、1、2、3、阿扎霉素F_5a、阿扎霉素F_4a和阿扎霉素F_3a适量，加入少量DMSO溶解，然后用纯水配制成终浓度为256 μg/mL的测试用对照品溶液和样品溶液（DMSO浓度小于5%）。 

上述化合物的抗MRSA活性均采用微量肉汤稀释法进行测试，过程如下：将牛肉膏蛋白胨培养基加到灭菌好的96孔聚苯乙烯板中，每孔加100 μL，然后在同一板上分别将100 μL对照品溶液和样品溶液加入对应行的第1孔，最后1行做溶剂空白对照，混匀，然后按倍比稀释法进行稀释，使第1孔至第11孔化合物的浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和 0.13 μg/mL，第12孔做生长对照，不加任何样品和对照品溶液。最后于每孔中加入经牛肉膏蛋白胨培养基稀释成孢子浓度为1.0×107 CFU/mL的试验菌悬液，每孔加100 μL，即得到化合物浓度分别为64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.13和0.06 μg/mL的菌样混合物。盖封后置温度37℃、转速150 rpm的恒温摇床中，孵育20 h判断结果。当生长对照孔和溶剂对照孔内试验菌株明显生长时，以小孔内完全抑制试验菌株生长的最低化合物浓度为该化合物对试验菌株的最低抑菌浓度（MIC）。 

2、实验结果 

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a（1）、F_4a（2）、F_3a（3）、阿扎霉素F_5a、F_4a、F_3a和利奈唑胺的抗MRSA活性（以最低抑菌浓度表示）试验结果见表1。

表1  去丙二酸单酰基阿扎霉素F抗MRSA的活性

。

3 、结论 

由表1可知，化合物1、2 和3对上述MRSA试验菌株生长的抑制作用明显强于阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a，为阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a的8～16倍；且活性为临床阳性对照药利奈唑胺的2~8倍。因此，本发明的式Ⅰ所示的去丙二酸单酰基阿扎霉素F具有显著的抗MRSA作用，且活性明显强于修饰前的阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a，优于临床用阳性对照药利奈唑胺，故可用于制备治疗MRSA感染的药物。另外，化合物1、2和3的结构和理化性质很相似，且表1显示三个化合物的抗MRSA活性无明显差别。故可选用其中的任意一个，也可选用二个或三个的混合物来制备抗MRSA药物，用于治疗MRSA感染的疾病。

实施例 7 ：

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a片剂的制备

1．处方                     每片用量      300片用量

去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a     0.0500g         15g

淀粉            0.0200g         6g

10％淀粉浆                     适量

滑石粉                         适量。

2．制法： 

（1）10％淀粉浆的制备：将2g淀粉加入约20ml纯化水中，加热糊化，制成10％的淀粉浆。

（2）制粒：取处方量去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a与淀粉混合均匀，加适量10％淀粉浆制软材，过16目筛制粒，将湿粒于40~50℃干燥，用16目筛整粒并与滑石粉混匀。 

（3）压片：将上述去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a颗粒在压片机上压片，得去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a片。 

3．片剂质量测定 

（1）检查项目及方法：分别按照现行版《中华人民共和国药典》附录ⅠA和ⅩA 测定上述片剂的重量差异和崩解时限。

（2）结果：上述制备片剂的含量差异和崩解时限结果见表2， 

表2  制备片剂的重量差异和崩解时限

实施例 8 ：

去丙二酸单酰基阿扎霉素F片剂的制备

1．处方                     每片用量      300片用量

去丙二酸单酰基阿扎霉素F       0.0500g         15g

淀粉            0.0200g         6g

10％淀粉浆                     适量

滑石粉                         适量

注：处方中去丙二酸单酰基阿扎霉素F为按实施例6方法制备的去丙二酸单酰基阿扎霉素F，包含去丙二酸单酰基阿扎霉素F_5a、F_4a和F_3a。

2．制法： 

（1）10％淀粉浆的制备：将2g淀粉加入约20ml纯化水中，加热糊化，制成10％的淀粉浆。

（2）制粒：取处方量去丙二酸单酰基阿扎霉素F与淀粉混合均匀，加适量10％淀粉浆制软材，过16目筛制粒，将湿粒于40~50℃干燥，用16目筛整粒并与滑石粉混匀。 

（3）压片：将上述去丙二酸单酰基阿扎霉素F颗粒在压片机上压片，得去丙二酸单酰基阿扎霉素F片。 

3．片剂质量测定 

（1）检查项目及方法：分别按照现行版《中华人民共和国药典》附录ⅠA和ⅩA 测定上述片剂的重量差异和崩解时限。

（2）结果：上述制备片剂的含量差异和崩解时限结果见表3， 

表3  制备片剂的重量差异和崩解时限