一种从野生茜草里提取茜草色素的新型工艺方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，本发明优点提取方便快捷，原料来源丰富，分离效果明显，提取纯度高。具体体现以下几点：1、应用生物酶解技术，使细胞内有效成分充分溶出。2、采用微波预处理的色素受热时间降低，活性损失少，产品生物活性高。3、超高压提取是在常温下进行的，因此避免了因热效应引起的有效成分结构变化、损失以及生理活性降低，同时超高压技术减少杂质成分溶出的同时，提高了有效成分的收率，可使茜草色素进一步纯化。本发明利用微波辅助提取与超高压藕联技术，先用乙醇做溶剂经过微波预处理，再用流体静压力大于100的超高压提取，泄压后溶剂可带着有效成分溢出；再经过低温真空干燥，将茜草色素色价提高到90。

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生茜草里提取茜草色素的方法，特别是涉及 种利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压技术纯化茜草色素的新方法。

背景技术：

特征：茜草生于山地杂木林下、林缘，灌丛及草甸。产于内蒙呼伦贝尔盟及黑龙江省大兴安岭地区 可栽培。草质攀援藤本；根紫红色或橙红色；小枝有明显的4棱角，棱上有倒生小刺。叶4片轮生，纸质， 卵形至状披针形。长2～9厘米，宽可达4厘米，顶端渐尖，基部圆形至心形，上面粗糙，下面脉上和叶 柄常有倒生小刺，基出脉3或5条：叶柄长短不齐，长的达10厘米，短的仅1厘米，聚伞花序通常排成 打二疏松的圆锥花序状，腋生和顶生；花小，黄白色，5数有短梗；花冠辐状。浆果近球状，直径5～6毫 米，黑色或紫黑色，有1颗。花期7月，果期8～9月。

茜草色素天然存在于茜草科茜草的根茎部组织的细胞内，茜草色素经近代医学研究表明，对金黄色葡 萄球菌有抑制生长作用，能行血、活血、破瘀、通经活络、抗炎，国内对茜草色素研究主要有回流提取法 和超声提取法，其分离纯化效果远远不如利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压纯化技术的效果。

发明内容：

本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种利用生物酶解、微波 辅助提取藕联超高压纯化茜草色素的新方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压纯化茜草色素的新方法，其步骤如下：

(1)酶解：将新鲜茜草根切片2-3cm左右，采用一定料液比，加入内、外切葡聚糖酶和果胶酶，一种 酶比例为1∶1∶0.5，酶浓度为0.5-1‰，在40-50℃左右酶解1-1.5h；

(2)微波预处理：用体积浓度75-95％乙醇做为溶剂，采用微波，在200～500W，加热至一定温度提取 5-10min；

(3)过滤：静置、将初提液初步过滤，进行分离，初步浓缩得茜草色素粗提物；

(4)高压提取：粗提物放入超高压处理袋内，按1∶3料液比加入乙醇溶液，封口包装，以不同压力， 加压20-30min，加压两次；

(5)得膏状物：将提取液抽滤、离心得色素液，回收乙醇，浓缩得膏状物；

(6)柱层析：将所得茜草膏状色素上硅胶层析柱，并以不同溶剂进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收 集茜草色素各阶段洗脱液；

(7)真空干燥：将所收集的茜草色素洗脱液，低温真空干燥得茜草色素，UV检测色价在85以上。

本发明优点：应用生物酶解技术，使细胞内有效成分充分溶出，采用微波预处理的色素受热时间降低， 超高压技术可使茜草色素进一步纯化，本发明提取方便快捷，原料来源丰富，分离效果明显，提取纯度高

具体实施方式：

实施例1：一种利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压纯化茜草色素的新方法，其步骤如下：

(1)将50g鲜茜草根切片至2cm，采用1∶5料液比，加入内、外切葡聚糖酶和果胶酶，一种酶比例为 1∶1∶0.5，酶浓度为0.5‰，调节pH值至45，在40℃左右酶解1h；

(2)微波预处理：用75％乙醇做为溶剂，采用微波提取，在功率200W，加热至50℃提取5min；

(3)过滤：静置、将初提液过滤，分离，初步浓缩得茜草色素粗提物；

(4)高压提取：粗提物放入超高压处理袋内，按1∶3料液比加入60％乙醇溶液，封口包装，以300MPa， 加压20min，加压两次；

(5)得膏状物：将提取液抽滤、离心得色素液，回收乙醇，浓缩得膏状物330g；

(6)柱层析：将所得茜草色素液上硅胶层析柱，并以乙酸乙酯、氯仿体积比3∶1-5∶1进行洗脱，薄层色 谱法跟踪检测，收集茜草色素各阶段洗脱液；

(7)真空干燥：将所收集的茜草色素洗脱液，于50℃低温真空干燥，得茜草色素1.5g，UV检测色 价为88。

实施案例2：一种利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压纯化茜草色素的新方法，其步骤如下：

(1)将50g鲜茜草根切片至3cm，采用1∶7料液比，加入内、外切葡聚糖酶和果胶酶，二种酶比例为 1∶1∶0.5，酶浓度为0.8‰，调节pH值至5.0，在45℃左右酶解1h；

(2)微波预处理：用85％乙醇做为溶剂，采用微波提取，在400W功率，加热至55℃提取8min：

(3)过滤：静置、将初提液过滤，分离，初步浓缩得茜草色素粗提物；

(4)高压提取：粗提物放入超高压处理袋内，按1∶3料液比加入65％乙醇溶液，封口包装，以400MPa 压力，加压25min，加压两次；

(5)得膏状物：将提取液抽滤、离心得色素液，回收乙醇，浓缩得膏状物390g；

(6)柱层析：将所得茜草色素液上硅胶层析柱，并以70％、75％、80％乙醇溶液进行洗脱，薄层色谱 法跟踪检测，收集茜草色素各阶段洗脱液；；

(7)真空干燥：将所收集的茜草色素洗脱液，于50℃低温真空干燥，得茜草色素1-18g、UV检测色 价为90。

实施案例3：一种利用生物酶解、微波辅助提取藕联超高压纯化茜草色素的新方法，其步骤如下：

(1)将50g鲜茜草根切片至3cm，采用1∶8料液比，加入内、外切葡聚糖酶和果胶酶，二种酶比例为 1∶1∶0.5，酶浓度为1‰，调节pH值至5.5，在50℃左右酶解1.5h；

(2)微波预处理：用95％乙醇做为溶剂，采用微波提取，在功率500W，加热至55℃提取10min；

(3)过滤：静置、将初提液过滤，分离，初步浓缩得茜草色素粗提物；

(4)高压提取：粗提物放入超高压处理袋内，按1∶3料液比加入70％乙醇溶液，封口包装，以500MPa， 压力，加压30min，加压两次；

(5)得膏状物：将提取液抽滤、离心得色素液，回收乙醇，浓缩得膏状物430g；

(6)柱层析：将所茜草色素液上硅胶层析柱，并以乙酸乙酯、氯仿体积比5∶1-7∶1进行洗脱，薄层色 谱法跟踪检测，收集茜草色素各阶段洗脱液；

(7)真空干燥：将所收集的茜草色素洗脱液，于60℃低温真空干燥，得茜草色素1-56g，UV检测色 价为87。