多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中的应用

摘要

本发明涉及多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中的应用，属于多肽技术领域。本发明的所用的山羊的天然免疫多肽DM29采用常规的化学合成的方法获得，山羊的天然免疫多肽DM29的分子量为3489.16Da，等电点为9.51，氨基酸序列为YWERLLAKEC RLYYLRNGER ISVSAASKL。该多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中的应用。本发明的效果在于：用多肽DM29制备的增加山羊天然免疫功能药物，抑菌效果明显。

说明书

技术领域：

本发明涉及多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中的应用，属 于多肽技术领域。

背景技术：

抗生素的广泛应用,耐药菌株和多重耐药菌株日益增加,临床抗感染治 疗已面临严峻挑战,寻找广谱高效的抗细菌、抗病毒药物,仍然是一个 十分艰巨的任务。抗菌肽是动物体内极为重要的先天免疫物质，是一 种具有高效抗菌、抗病毒、免疫功能的生物活性因子。抗菌肽是宿主 非特异性免疫防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类活性物质 ，是天然免疫的效应分子。研究表明，抗菌肽有着与传统抗生素完全 不同的作用机制，不易诱导耐药菌株的产生；抗菌谱广，对细菌、真 菌、病毒、原虫及癌细胞均有作用。在家禽上，已经发现了3个家族的 抗菌肽包括cathelicidin, liver-expressed antimicrobial pep tide (LEAP), and β-defensin。 这些抗菌肽对于家禽抵抗细菌 性、病毒性疾病具有至关重要的作用。相关这些基因的突变或者缺失 对于家禽抗微生物感染的能力将有显著的影响。这些些抗菌肽除了具 有广谱抗菌活性，同时还有高效的抗真菌、抗病毒、抗原虫和（或） 抗肿瘤活性，如Bat5和IMc7能杀灭钩端螺旋体，对白色念珠菌、隐球 菌和包膜病毒和寄生虫都有较好的杀灭作用；一些抗菌肽对疱疹病毒 、流感病毒、艾滋病病毒等有囊膜病毒有明显的杀伤力。此外，有些 抗菌肽同时还具有多种其他的调控功能，如Cathelicidin还具有促进 伤口愈合、组织损伤修复、化学趋化作用、促血管生成和抗寄生虫等 功能，在调节动物机体免疫上有着重要生物学活性。

发明内容：

本发明的目的在于提供多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中 的应用。

本发明的所用的山羊的天然免疫多肽DM29采用常规的化学合成的方法 获得，山羊的天然免疫多肽DM29的分子量为3489.16 Da,等电点为  9.51，氨基酸序列为YWERLLAKEC RLYYLRNGER ISVSAASKL。该多肽D M29在制备增加山羊 天然免疫功能药物中的应用。

多肽DM29的抗菌试验，其试验方案为常规方法，具体如下：

将已制备好的高柱肉汤琼脂培养基加热熔化后,待冷却至50℃左右时, 加入肉汤培养基菌液1mL(经过恒温37℃培养18小时的菌液),轻轻摇动 ,使之均匀.然后倒入无菌的平皿内,轻轻晃动平皿,以使培养基均匀地 平铺在平皿上,待冷却凝固后,用消毒过的镊子将青霉素干纸片、链霉 素干纸片、四环素干纸片、磺胺嘧啶干纸片整齐有顺序的放入平血内 ,盖上陶瓦盖,标好记号置37℃恒温培养箱内培养24小时.24小时后取出 培养基,用卡尺量取抑菌圈大小并记录之,并比较不同抗菌药物对不同 细菌的作用强度。

本发明的效果在于：用多肽DM29制备的增加山羊天然免疫功能药物， 抑菌效果明显。

附图说明：

图1是山羊的天然免疫多肽DM29对枯草杆菌的抑制效果。

具体实施方式：

下面结合附图对本发明作进一步的详细说明。

实施例所用的山羊的天然免疫多肽DM29采用常规的化学合成的方法获 得，山羊的天然免疫多肽DM29的分子量为3489.16 Da,等电点为 9. 51，氨基酸序列为YWERLLAKEC RLYYLRNGER ISVSAASKL。

多肽DM29的抗菌试验的具体步骤同发明内容部分的描述。

实施例1 ：

多肽DM29对枯草杆菌的抑制作用。

取8μg/ml、以及15μg/ml山羊的天然免疫多肽DM29进行抑菌试验。结 果为：8ug/ml山羊的天然免疫多肽DM29仅有较弱的抑菌效果（图1-A） ，15ug/ml山羊的天然免疫多肽DM29抑菌效果很明显（图1-B）,图1-C 为山羊的天然免疫多肽DM29抑菌效果试验对照。

实施例2 ：

多肽DM29对不同细菌的最低抑菌浓度。

取不同浓度的山羊的天然免疫多肽DM29分别抑制大肠杆菌、绿脓杆菌 、金 色葡萄球菌，枯草杆菌以及白色念珠菌。其中表1为该多肽对大肠杆菌 、绿脓杆菌、金色葡萄球菌，枯草杆菌以及白色念珠菌的最低抑制浓 度分别为：15.62μg/ml, 27.11μg/ml,

13.53μg/ml, 6.03μg/ml, 39.13μg/ml。

表1

SEQUENCE LISTING

 

<110>  中国科学院昆明动物研究所

 

<120>  多肽DM29在制备增加山羊天然免疫功能药物中的应用

 

<130>  1

 

<160>  1    

 

<170>  PatentIn version 3.3

 

<210>  1

<211>  29

<212>  PRT

<213>  Capra ibex

 

<400>  1

 

Tyr Trp Glu Arg Leu Leu Ala Lys Glu Cys Arg Leu Tyr Tyr Leu Arg

1               5                   10                  15     

 

 

Asn Gly Glu Arg Ile Ser Val Ser Ala Ala Ser Lys Leu

            20                  25