利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼asap1a基因敲除突变体的方法

摘要

本发明公开了利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼asap1a基因敲除突变体的方法。具体包括以下步骤：确定asap1a基因敲除的靶点位置即asap1a‑gRNA靶位点，体外转录获得asap1a‑gRNA，将asap1a‑gRNA与Cas9mRNA导入斑马鱼受精卵中，筛选培养获得稳定遗传的asap1a基因敲除突变体。本发明根据选择的asap1a基因的一段独特的高效率打靶区，利用CRISPR/Cas9技术使得斑马鱼中的asap1a基因被敲除并产生可遗传的asap1a基因敲除的斑马鱼，且本发明共获得了3种突变类型的asap1a基因敲除突变体斑马鱼品系，对研究asap1a基因的功能奠定动物模型基础。