用于医学整形美容的填充物及其制备方法和应用

摘要

本发明提供一种用于医学整形美容的填充物及其制备方法和应用，所述制备方法包括将溶胀后的生物材料进行外包白蛋白，再以甲醛和戊二醛固化所述白蛋白。优选地，所述制备方法包括将生理盐水溶胀后的生物材料依次用人血清白蛋白溶液、甲醛溶液、戊二醛溶液、乙醇溶液进行处理。本发明提供的填充物比现有常用的硅胶、玻尿酸、肉毒素、生理盐水袋、脱细胞组织等都要好，既与肌体有较好相融性，也能持续发挥整形美容效果，而且不会出现液化现象，没有副作用。本发明的制备方法简单，适宜大规模生产。

说明书

技术领域

本发明涉及医学整形美容领域，更具体地，涉及一种用于医学整形美容的填充物及其制备方法和应用。

背景技术

由于爱美心理以及科技的发展，近年来医学整形、美容行业有较快的发展，主要治疗范围包括创伤、疾病、先天性或后天性组织或器官的缺陷与畸形，治疗包括修复与再造两方面，其中必不可少的要用到填充物。

目前，医学整形、美容行业常用硅胶、玻尿酸(Restylane)、肉毒素(Botox)、生理盐水袋、自体填充物、脱细胞组织等产品作为填充物植入体内，这些物质进入体内会出现四种情况：第一种情况是与肌体不相融合，始终处于游离状态，硅胶、聚甲基丙烯酸甲酯(Artecoll)、生理盐水袋就属于这类产品；第二种情况是短时有效，很难长期维持效果，这类产品包括玻尿酸、肉毒素等；第三种情况是自体填充物，如软骨、脂肪组织、皮肤及皮下组织等，这主要利用自体细胞和组织按照拆东墙补西墙模式进行操作，整形美容可以长期有效，但这属于个案治疗，无法进行质量控制和批量生产，难以广泛推广应用；第四种情况是既能与肌体融合，又能维持较长的时间，但一段时间过后，填充物液化，副作用明显，如异体脱细胞组织(Cymetra)、合成羟基磷灰石(Radiesse)、合成胶原蛋白等。

因此，亟待研究开发一种新的填充物，它既有较好的相融性，也能持续发挥整形美容效果，而且不会出现液化现象，没有副作用。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种用于医学整形美容的填充物及其制备方法和应用。

本发明第一目的为提供一种用于医学整形美容的填充物的制备方法，包括：将溶胀后的生物材料进行外包白蛋白，再以甲醛和戊二醛固化所述白蛋白。

本发明将生物材料溶胀可避免生物材料的形变，再外包白蛋白以提高组织相容性，然后用甲醛和戊二醛处理可以固化白蛋白，从而延长材料的有效性，使最终得到的填充物具有较好的相容性且效果保持时间长。

进一步地，所述制备方法具体包括：将生理盐水溶胀后的生物材料依次用人血清白蛋白溶液、甲醛溶液、戊二醛溶液、乙醇溶液进行处理。

本发明将生物材料经生理盐水溶胀以达到生理盐水饱和，避免后续形变；再经人血清白蛋白溶液处理得到外包白蛋白的材料，以提高组织相容性；甲醛溶液进行处理使外包白蛋白固化，以维持材料长效性；戊二醛溶液处理以强化加固外包，延缓液化进程，延长有效性；乙醇溶液处理以降低排异性和副作用。按照该方法制得的填充物生物相容性较好，能持续发挥整形美容效果，不出现液化现象，也没有副作用。

本发明中所述生物材料为天然提取材料或生物合成材料，包括但不限于脱脂除抗原的人或动物的皮、跟腱、脐胎、胎盘组织或软骨组织，合成胶原蛋白支架、胶原-硫酸软骨素支架、糖胺多糖-硫酸软骨素。优选为脱脂除抗原猪皮。

进一步地，所述生物材料为颗粒状或片状，若为颗粒状，则粒径小于0.25mm，若为片状，则厚度小于0.25mm。所述生物材料更优选大小一致的同种均质材料。

进一步地，所述人血清白蛋白溶液的溶剂为生理盐水，人血清白蛋白的质量体积浓度为0.3～0.7％。人血清白蛋白的浓度会影响外包的均匀性和厚度，人血清白蛋白浓度低则包被不全，而浓度过大，后续固化会出现包衣裂隙及脱落，从而影响包衣完整性。

进一步地，所述人血清白蛋白溶液与溶胀后的生物材料的体积比为2～4:1，优选为3:1。体积比会影响外包的均匀性和厚度。

进一步地，所述人血清白蛋白溶液进行处理的时间为2～4小时。

进一步地，所述甲醛溶液的溶剂为生理盐水，甲醛的质量浓度为0.6～0.9％。甲醛的浓度会影响固化效果。浓度太低则起不到固化效果，太高则出现包衣过度收缩，且韧性降低。

进一步地，所述甲醛溶液与经所述人血清白蛋白溶液处理后的生物材料的体积比为2～4:1，优选为3:1。体积比会影响固化质量。

进一步地，所述甲醛溶液进行处理的时间为40～80min。

进一步地，所述戊二醛溶液的溶剂为生理盐水，戊二醛的质量浓度为0.8～1.2％。

进一步地，所述戊二醛溶液与经所述甲醛溶液处理后的生物材料的体积比为2～4:1，优选为3:1。

进一步地，所述戊二醛溶液进行处理的时间为30～40min。

进一步地，所述乙醇溶液的体积浓度为75～85％，优选为80％。

进一步地，所述乙醇溶液与经所述戊二醛溶液处理后的生物材料的体积比为8～10:1，优选为9:1。

进一步地，所述乙醇溶液进行处理的时间为5～15min。

在本发明的优选实施方式中，所述填充物的制备方法具体包括以下步骤：

(1)将所述生物材料用生理盐水溶胀至不能再吸收生理盐水为止，沥干得到溶胀材料；

(2)将所述溶胀材料转入质量体积浓度为0.3～0.7％的人血清白蛋白溶液中混匀反应2～4小时，所述人血清白蛋白溶液与所述溶胀材料的体积比为3:1，沥干得到包衣材料；

(3)将所述包衣材料转入质量浓度为0.6～0.9％的甲醛溶液中混匀反应40～80min，所述甲醛溶液与所述包衣材料的体积比为3:1，沥干得到材料A；

(4)将所述材料A转入质量浓度为0.8～1.2％的戊二醛溶液中混匀反应30～40min，所述戊二醛溶液与所述材料A的体积比为3:1，沥干得到材料B；

(5)将体积浓度为80％的乙醇溶液加入所述材料B中，混匀反应5～15min，所述乙醇溶液与所述材料B的体积比为9:1，沥去液体，于-30～-10℃冷冻10小时以上，得到钝化材料；

(6)取出所述钝化材料，经生理盐水漂洗、包装、消毒，得到所述填充物。

本发明第二目的为提供一种用于医学整形美容的填充物，其由上述任一制备方法制备得到。本发明提供的填充物比现有常用的硅胶、玻尿酸、肉毒素、生理盐水袋、脱细胞组织等都要好，既与肌体有较好相融性，也能持续发挥整形美容效果，而且不会出现液化现象，没有副作用。

本发明第三目的为提供上述填充物在制备整形材料中的应用。本发明的填充物可直接移植到所需填充位置，也可制备成赋有一定形状的整形材料后再移植，使用方便。

本发明提供的填充物比现有常用的硅胶、玻尿酸、肉毒素、生理盐水袋、脱细胞组织等都要好，既与肌体有较好相融性，也能持续发挥整形美容效果，而且不会出现液化现象，没有副作用。本发明的制备方法简单，适宜大规模生产。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

以下实施例中，若无特殊说明，所用原料均为市售获得。

实施例1

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法具体包括以下步骤：

(1)取50g粒径小于0.25mm的脱脂除抗原猪皮颗粒放于500ml烧杯中，加400ml生理盐水，室温(本发明实施例中所述室温指23～26℃，下同)下磁力搅拌器不断搅拌，直至不能再吸收生理盐水为止，大约需要4小时，用砂芯漏斗过滤，得到溶胀材料，并测量体积，记为1体积；

(2)取一装有3体积的浓度为0.5％(w/v)人血清白蛋白溶液(生理盐水溶解人血清白蛋白)的烧杯，在磁力搅拌器不断搅拌下，缓慢加入1体积的溶胀材料，室温继续搅拌2小时，砂芯漏斗过滤得到包衣材料；

(3)将包衣材料放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的甲醛溶液，所述甲醛溶液为生理盐水稀释甲醛，浓度为0.7％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温孵育40～80min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料A；

(4)将材料A放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的戊二醛溶液，所述戊二醛溶液为生理盐水溶解戊二醛，浓度为0.9％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温反应30～40min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料B；

(5)将材料B放入1000ml烧杯中，缓慢加入9体积的乙醇，乙醇的浓度为80％(v/v)，并缓慢搅拌，室温作用10min，砂芯漏斗过滤，将滤渣于-20℃冰箱冷冻10小时以上，得到钝化材料；

(6)将钝化材料经生理盐水充分漂洗、定量包装、钴60辐照消毒，即得用于医学整形美容的填充物。

实施例2

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法具体包括以下步骤：

(1)取50g粒径约为0.35mm的脱脂除抗原猪皮颗粒放于500ml烧杯中，加400ml生理盐水，室温下磁力搅拌器不断搅拌，直至不能再吸收生理盐水为止，大约需要4小时，用砂芯漏斗过滤，得到溶胀材料，并测量体积，记为1体积；

(2)取一装有3体积的浓度为0.5％(w/v)人血清白蛋白溶液(生理盐水溶解人血清白蛋白)的烧杯，在磁力搅拌器不断搅拌下，缓慢加入1体积的溶胀材料，室温继续搅拌2小时，砂芯漏斗过滤得到包衣材料；

(3)将包衣材料放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的甲醛溶液，所述甲醛溶液为生理盐水稀释甲醛，浓度为0.7％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温孵育40～80min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料A；

(4)将材料A放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的戊二醛溶液，所述戊二醛溶液为生理盐水溶解戊二醛，浓度为0.9％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温反应30～40min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料B；

(5)将材料B放入1000ml烧杯中，缓慢加入9体积的乙醇，乙醇的浓度为80％(v/v)，并缓慢搅拌，室温作用10min，砂芯漏斗过滤，将滤渣于-20℃冰箱冷冻10小时以上，得到钝化材料；

(6)将钝化材料经生理盐水充分漂洗、定量包装、钴60辐照消毒，即得用于医学整形美容的填充物。

实施例3

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法具体包括以下步骤：

(1)取50g粒径小于0.25mm的脱脂除抗原猪皮颗粒放于500ml烧杯中，加400ml生理盐水，室温下磁力搅拌器不断搅拌，直至不能再吸收生理盐水为止，大约需要4小时，用砂芯漏斗过滤，得到溶胀材料，并测量体积，记为1体积；

(2)取一装有3体积的浓度为0.2％(w/v)人血清白蛋白溶液(生理盐水溶解人血清白蛋白)的烧杯，在磁力搅拌器不断搅拌下，缓慢加入1体积的溶胀材料，室温继续搅拌2小时，砂芯漏斗过滤得到包衣材料；

(3)将包衣材料放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的甲醛溶液，所述甲醛溶液为生理盐水稀释甲醛，浓度为0.7％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温孵育40～80min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料A；

(4)将材料A放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的戊二醛溶液，所述戊二醛溶液为生理盐水溶解戊二醛，浓度为0.9％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温反应30～40min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料B；

(5)将材料B放入1000ml烧杯中，缓慢加入9体积的乙醇，乙醇的浓度为80％(v/v)，并缓慢搅拌，室温作用10min，砂芯漏斗过滤，将滤渣于-20℃冰箱冷冻10小时以上，得到钝化材料；

(6)将钝化材料经生理盐水充分漂洗、定量包装、钴60辐照消毒，即得用于医学整形美容的填充物。

实施例4

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法具体包括以下步骤：

(1)取50g粒径小于0.25mm的脱脂除抗原猪皮颗粒放于500ml烧杯中，加400ml生理盐水，室温下磁力搅拌器不断搅拌，直至不能再吸收生理盐水为止，大约需要4小时，用砂芯漏斗过滤，得到溶胀材料，并测量体积，记为1体积；

(2)取一装有3体积的浓度为0.5％(w/v)人血清白蛋白溶液(生理盐水溶解人血清白蛋白)的烧杯，在磁力搅拌器不断搅拌下，缓慢加入1体积的溶胀材料，室温继续搅拌2小时，砂芯漏斗过滤得到包衣材料；

(3)将包衣材料放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的戊二醛溶液，所述戊二醛溶液为生理盐水溶解戊二醛，浓度为0.9％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温反应30～40min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料C；

(4)将材料C放入500ml烧瓶中，在磁力搅拌器不断搅拌下，逐渐加入3体积的甲醛溶液，所述甲醛溶液为生理盐水溶解甲醛，浓度为0.7％(w/w)，每隔5min缓慢搅拌一次，室温反应40～80min，砂芯漏斗过滤，生理盐水冲洗2次，沥干，将所得材料记为材料D；

(5)将材料D放入1000ml烧杯中，缓慢加入9体积的乙醇，乙醇的浓度为80％(v/v)，并缓慢搅拌，室温作用10min，砂芯漏斗过滤，将滤渣于-20℃冰箱冷冻10小时以上，得到钝化材料；

(6)将钝化材料经生理盐水充分漂洗、定量包装、钴60辐照消毒，即得用于医学整形美容的填充物。

实施例5

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法其余同实施例1，区别在于步骤(5)中乙醇体积为4体积。

实施例6

本实施例提供一种用于医学整形美容的填充物，其制备方法其余同实施例1，区别在于步骤(1)中生物材料原料为合成胶原蛋白支架。

应用例1——皮颗粒体外催化实验

用脱脂除抗原猪皮颗粒填充于猕猴皮下，并机械刺激移植部位皮肤，收集填充物周围的渗出液，这种真皮组织新鲜渗出液用猕猴血清稀释(新鲜渗出液体积浓度为10％)，再加抗生素即为体外催化试验消解液，消解液中含硫酸庆大霉素5ug/ml和硫酸卡那霉素40ug/ml。取5支带编号的试管，每管加入5ml消解液，分别加入0.1g实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5的产品，在37℃、5％CO₂、饱和湿度培养箱中孵育45天，每天上午十点实体显微镜下观察后轻摇，并记录。

说明：第一天填充物体积大小计为10，其后依次计9、8、7、6、5、4、3、2、1、0，其中5为体积减少一半，2为还有少量残留块，1为无残留块但有残痕，0为无残痕。结果如下：

在为期45天的验证试验中，各例产品消解速度从慢到快的顺序为：

实施例1、实施例2、实施例5、实施例4、实施例3，其中实施例1、2产品消解的最慢，特别是实施例1更为突出；实施例5、实施例4次之，实施例3消解最快。这说明实施例1方案能有效的延长生物填充物整形美容效果，其产品具有很好的长效填充物的特性。

应用例2——合成胶原体外催化实验

合成胶原蛋白支架填充物与皮颗粒属于不同类型，无法比较。只能与合成胶原比较，比较方法与应用例1相同。结果显示实施例6所得填充物与合成胶原比较，消解时间延长30～50％。

应用例3——体内验证实验

选2只雄性、1岁大小，体重接近、健康一致的猕猴(平行试验)，再根据应用例1的结果，选用实施例1、实施例2、实施例4、实施例5的产品，按照常规整形美容填充物的使用方法，移植入1只猕猴耳边沿内侧皮下，每个产品一个点，4个产品分四个不同的位点；另外1只猴用同样方法进行同步重复试验；猴子移植部位要加防护抓挠设施，避免术部被刺激。移植后，猕猴自然饲养，长期透视观察，测量体温并记录。

说明：体积一开始计为Ⅴ，其后依次为Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ。其中，Ⅲ表示填充物体积减少50％，Ⅰ表示只能看到痕迹。

长期观察结果表明：尽管试验开始时各组都有局部轻度的炎症，但体温没有升高，局部炎症经过一段时间(1-2月)就会消失，而使用填充物期间，实施例1、实施例2、实施例5、实施例4方案制备的填充物体积减少50％的时间分别是11、9、6、5年，这意味着实施例1方案所获得的产品使用可以维持11年整形美容效果，为最佳方案，其它方案也可延长填充物的效率，但效果次之。

最后，本发明的实施例仅为较佳的实施方案，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。