无荧光染料标记外泌体及其制备方法

摘要

本发明公开了一种无荧光染料标记外泌体的制备方法，包括，步骤1：构建融合表达绿色荧光蛋白EGFP和外泌体标记蛋白LAMP的重组质粒；步骤2：将重组质粒和转染试剂按比例混合后，转染HEK293细胞，筛选获得稳定表达EGFP标记外泌体的HEK293细胞株；步骤3：从成功标记转染的HEK293细胞株中分离提取含有EGFP标记的外泌体。本发明利用基因工程化的HEK293细胞株，从其培养的上清液中提取含EGFP标记的外泌体，方法简便且外泌体不含荧光染料，利用外泌体的独特功能和EGFP在体内体外示踪的优越性，可避免常规荧光染料标记外泌体因染料扩散干扰荧光观察的弊端，为研究细胞间物质转移机制提供有力工具。