纤溶酶抑制剂rPI-T1的分离纯化方法

摘要

本发明涉及一种纤溶酶抑制剂rPI‑T1的分离纯化方法，其包括发酵分泌表达rPI‑T1的毕赤酵母，将包含rPI‑T1的发酵液的上清液经Capto‑MMC层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液I；将获得的洗脱液I经Qhp层析柱洗脱，收集得到包含rPI‑T1的洗脱液II。该方法是一种毕赤酵母分泌表达蛋白rPI‑T1的简单、快速、稳定、高效的分离纯化方法。涉及以毕赤酵母菌无机盐培养基发酵高效表达目标蛋白rPI‑T1，并将发酵液上清经离心、微滤、层析等步骤进行纯化的方法。本方法纯化收率高，热原检测批间稳定合格，活性蛋白收率达到90％以上，C18HPLC分析纯度达到97％以上；具有对以重组毕赤酵母菌分泌表达蛋白的通用性，整体步骤少、效率高、收率高、工艺过程时间短、蛋白纯度高及易于产业化放大等显著特点。