生物电催化系统促进P450催化甾体羟基化反应的方法

摘要

本发明公开了一种生物电催化系统促进P450催化甾体羟基化反应的方法，包括下列步骤：（一）DNA合成及重组菌构建；（二）生物电催化系统电池装置的预处理；（三）P450酶生物电催化系统的组装；（四）样品的提取、处理及检测方法；（五）生物量的测定；（六）胞内NAD(H/+)、NADP(H/+)比值测定。本发明向P450酶全细胞催化系统中引入体外电子传递途径（EET途径）驱动NAD(P)H再生，结合了电化学和P450酶全细胞催化系统，实现了碳源电子供体和电极电子供体对P450介导的单加氧反应的协同驱动作用，即为细胞色素P450酶生物电催化系统。本发明以CYP7B1的全细胞转化系统为基础，DHEA（I）、7α‑OH‑DHEA（II）分别为该羟化反应的底物和产物，为P450介导的单加氧反应在甾体工业上的发展提供良好的借鉴。