一种以RNA为模板的RNA聚合酶制备方法及该聚合酶的应用

摘要

本发明公开一种以RNA为模板的RNA聚合酶制备方法及该聚合酶的应用，该制备方法以alpha坏死病毒属病毒作为原料，利用含聚合酶结构域且无N‑末端的跨膜区或跨膜区突变的病毒复制蛋白为基础制备重组蛋白，获得具有RNA依赖的RNA聚合酶，具体为首先选取番茄丛矮病毒科的alpha坏死病毒属病毒作为原料；然后利用截短或突变除去病毒RNA的N‑末端的跨膜区，得到模板RNA；最后通过原核表达或真核表达在细胞内或细胞外进行RNA聚合酶的合成；采用本发明的方法获得重组蛋白，其RNA产量大于1毫克/毫升，适合工业化RNA的合成与生产。