一种农杆菌介导的以黄曲霉菌丝为受体的遗传转化方法

摘要

本发明公开了一种农杆菌介导的以黄曲霉菌丝为受体的遗传转化方法，属于微生物学领域。该方法包括以下步骤：双元载体pAg1‑H3酶切去除潮霉素抗性基因片段，与含有来源于米曲霉的吡啶硫胺抗性基因ptrA的目的片段连接，构建成pAg1‑Pt双元载体；双元载体pAg1‑Pt质粒转化农杆菌，获得农杆菌阳性转化子，制备菌液；制备黄曲霉菌丝均质液；将制备所得菌液与制备所得的菌丝均质液混合后共培养，进行黄曲霉的遗传转化；选择性培养，筛选黄曲霉转化子并鉴定阳性克隆。本发明以黄曲霉菌丝体作为转化受体，不受黄曲霉菌株产孢能力的限制，转化效率高且稳定，对不同遗传背景和营养缺陷型的黄曲霉菌株均适用。