过表达小檗碱桥接酶提高博落回中BAIs含量的方法及应用

摘要

本发明提供一种过表达小檗碱桥接酶提高博落回中BAIs含量的方法及应用，本发明的方法是通过PCR技术扩增博落回中参与生物碱代谢的关键基因小檗碱桥接酶(BBE)全长编码序列并结合In‑Fusion同源重组法高效率载体构建技术将博落回中BBE基因成功整合到植物表达载体pCAMBIA2301D，然后利用农杆菌介导的方法将表达载体导入至博落回外植体中，以提高博落回中BAIs(苄基异喹啉类生物碱)的含量。本发明方法获得的过表达博落回阳性植株中的一些BAIs，如(S)‑网状番荔枝碱、(S)‑金黄紫堇碱、(S)‑华紫堇碱、(S)‑四氢非洲防己碱的含量均得到了显著提高，约提高3倍左右，能为深入研究BBE基因功能和提高博落回中苄基异喹啉类生物碱的含量提供前期基础。