シキミ酸リン酸化酵素II発現系の構築とシキミ酸3－リン酸の調製

摘要

除草剤グリホサート耐性ダイズの5－enolpyruvylshikimic acid 3－phosphate synthaseの基質であるshikimic acid 3－phosphate（S－3-P）を得るために，Shikimate kinase II（SK-II）遺伝子を，工レクトロボレーション法で大腸菌BL21株に形質導入した．発現されたSK-IIの簡素活性は~(32)Pのシキミ酸への取り込み等で確認した．生成されたS－3－Pはカーボンカラムを用いたLC／MSなどで同定した．カーボンカラムを用いるHPLCは不揮発性溶媒を用いず，S－3-Pを分離できるので，S－3－Pの簡便な調製が可能となった．