УЧАСТИЕ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА В ДИФФЕРЕНЦИРОВКЕ ПОПЕРЕЧНОПОЛОСАТЫХ МЫШЦ МЫШЕЙ mdx

摘要

В предварительных опытах было показано, что мышцы мышей mdx, спасенных после рентгеновского облучения в дозе 7.5 Гр внутривенным введениемклеток костного мозга мышей C57BL/6, через 2—3 мес обнаруживают признаки усиления дифференцировки поперечнополосатых мышечных волокон. Для доказательства участия стволовых клеток в этом явлении были поставлены эксперименты с клетками костного мозга трансгенных мышей C57BL/6, экспрессирующих зеленый люминесцирующий белок GFP. Первая серия экспериментов была выполнена на химерных мышах C57BL/6 и mdx. Химерных мышей получали введением клеток костного мозга трансгенных мышей C57BL/6, экспрессирующих белок GFP, мышам C57BL/6 или mdx после рентгеновского облучения 5 в дозе Гр. Через 2 мес у мышей-химер повреждали М. quadriceps femoris и еще через 4—5 нед изучали присутствие в мышце GFP-положительных мышечных волокон. У мышей-химер C57BL/6 доли GFP-положительных мышечных волокон для опытной и контрлатеральной мышц составили 0.3 = 0.5 и 0.2 = 0.3 % соответственно. У мышей-химер mdx доли GFP-положительных мышечных волокон в опытной и контрольной группах были 1.7 ± 0.4 и 0.5 ± 0.3 % соответственно. Во второй серии экспериментов клетки костного мозга мышей C57BL /6. экспрессируюших белок GFP, после предварительного истощения вводили внутримышечно мышам C57BL/6 и GFP.Предварительно клетки костного мозга выделяли на 63%-ном Перколле и затем эту фракцию истощали от дифференцированных гемопоэтических клеток магнитным способом на системе Dynal смесью антител против антигенов CD4, CDS, CD38, CD45R, Terl 19. Ly-6G и F4/80. После истощения 2.5 - 10~5—4.0 - 10~5 клеток инъецировали в 8—9 точек M. quadriceps femoris мышей C57BL/6 или mdx. Через 2—3 нед у мышей C57BL/6 было обнаружено 0.15 ± 0.40 и 0.1 ± 0.2 % GFP-положительных мышечных волокон вопытной и контрлатеральной мышцах соответственно. У мышей mdx доли GFP-положительных мышечных волокон составили 2.0 = 0.8 и 1.2 ± 0.6 %. Результаты указывают на то, что участие стволовых клеток костного мозга в дифференцировке поперечнополосатых мышц мышей mdx может быть достигнуто после внутримышечной трансплантации клеток костного мозга при помощи инъекций.