СОВРЕМЕННЫЙ СЕРОДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ИНСТРУМЕНТАРИЙ НА ОСНОВЕ АНТИТЕЛ-ПРОТЕАЗ И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ДИАГНОСТИКЕ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

摘要

Целью работы являлось сравнительное исследование у больных с аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы (ЩЖ) возможной клинико-диагностической и клинико-прогносттеской значимости антител (AT) к тиреоглобулину (анти-ТГ аутоАТ) и тиреоидной пероксидазе (анти-ТРО аутоАТ) с протеолитической активностью (АТ-протеаз) и разработка дополнительных клинико-иммунологических критериев для создания современного протокола лабораторной серодиагностики на основе АТ-протеаз.Исследовали сыворотки крови 240 больных аутоиммунным тиреоидитом (АИТ), 124 - с диффузно-токсическим зобом (ДТЗ), 172 пациентов с другими заболеваниями ЩЖ. Контролем служили сыворотки 40 клинически здоровых доноров. Скрининг сывороток крови на анти-ТГ и анти-ТРО аутоАТ проводили методами иммуноферментного и/или радиоиммунологического анализа. Определение неспецифической протеолитической активности проводили, инкубируя раствор высокоочищенных AT IgG-изотипа с неспецифическим субстратом (например, БСА-ФИТЦ или тиоредоксином - Тгх) с последующим измерением относительных сдвигов флюоресценции при длине волны 470 нм. Для определения АГ-специфиче-ской протеолитической активности образцы крови, полученные от больных АИТ или ДТЗ, а также выделенные из сывороток высокоочищенные анти-ТГ или анти-ТРО аутоАТ IgG-изотипа инкубировали с соответствующими человеческими субстратами. Детекцию продуктов протеолиза проводили с помощью электрофореза в ПААГ. Выявлена зависимость между ростом встречаемости АТ-протеаз, их каталитической активности, тенденцией к группированию аутоАТ между собой и степенью дегенерации ткани ЩЖпри АИТ и ДТЗ; отмечены некоторые особенности серологической картины при разных формах АИТ и ДТЗ. Например, показано, что превалирующими аутоАТ при АИТяв-ляются ТГ-специфические, а при ДТЗ - ТРО-специфические протеазы; также при АИТ выявляемая каталитическая активность обоих типов аутоАТ на порядок выше, чем при ДТЗ. При других формах патологии ШЖ, при которых также часто обнаруживаются антитиреоидные аутоАТ, не было зафиксировано присутствия АТ-протеаз. Процедуру скрининга на АТ-протеазы можно рассматривать в качестве высокочувствительного и специфичного критериального теста при диагностике и прогнозировании АИТ и ДТЗ, который позволяет проводить диагностику не только в границах основных нозологии ЩЖ, но и значительно шире, охватывая целый ряд синдромапъных форм патологии.