HERRAMIENTAS SEROLOGICAS Y MOLECULARES PARA LA DISCRIMINACION DE AISLAMIENTOS DEL VIRUS TRISTEZA DE LOS CITRICOS DEL ESTADO DE NUEVO LEON, MEXICO

摘要

El virus de la tristeza (Citrus tristeza virus = CTV) es un problema de importancia para la industria citrícola mexicana. Se han reportado plantas infectadas por el CTV en 20 estados productores de cítricos del país, en forma de infecciones asintomáticas, incluso en plantas injertadas en el patrón hipersensible naranjo agrio. La detección de aislamientos severos de CTV es necesaria para reforzar la operación de la campana de CTV en todo el país. En el presente estudio se caracterizaron 13 aislamientos del CTV del estado de Nuevo León y uno del estado de Tamaulipas por su actividad contra el anticuerpo monoclonal MCA13, PCR bi-direccional (BD) e hibridación con sondas específicas para el gen p25 de la proteína de cápside. Diez de 13 aislamientos del CTV de Nuevo León y el aislamiento de Tamaulipas dieron una reacción positiva al anticuerpo monoclonal MCA 13. Las pruebas BD-PCR dieron un fragmento de ADNc de 300 pares de bases característico de razas tipo decaimiento en ocho de los 13aislamientos de Nuevo León y del aislamiento de Tamaulipas. En la hibridación con sondas ADN específicas, dieron reacción con ocho aislamientos (CTV) con la Sonda II asociada con linajes CTV del tipo decaimiento y tres aislamientos mostraron reactividad con la Sonda VII asociada con linajes de tipo débil. Como conclusión, se mostró la utilidad del anticuerpo monoclonal MCA13, del PCR bi-direccional y de la hibridación con sondas específicas de (SGSP) para la discriminación de aislamientos deCTV, así como el descubrimiento de aislamientos severos de CTV en el estado de Nuevo León. Tanto el PCR-BD y la hibridación con sondas específicas (SGSP) fueron más adecuados para la discriminación de la aislamientos de CTV, que el anticuerpo monoclonal MCA13. El PCR-BD pudo detectar mezclas de aislamientos débiles y del tipo decaimiento del CTV en una misma muestra; la hibridación con SGSP fue adecuada para detectar aislamientos CTV ya sea de tipo débil, tipo decaimiento y picado de tallo.