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【24h】

Cytoskeleton-Anchoring of Conformational Mutant-Like p53, but Not Shorter Isoforms p53β and p47 (ΔN40p53) in Senescent Human Fibroblasts

机译:构象突变体样P53的细胞骨架锚定,但不缩短同种型P53β 和p47(Δ n40p53)在衰老人体成纤维细胞中

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摘要

机译:<![CDATA [背景:构象突变体样P53的细胞骨架锚固在人衰老细胞中突出。本研究研究了人类P53的平方细胞骨架锚固的结构基础。方法:GFP熔融野生型P53,突变体P53,瓦苏突出同种型的型号,包括P53&#946;和P47在表达泛素的细胞中表达:小鼠成纤维细胞,COS-7细胞,杨和衰老人成纤维细胞和Hela细胞(非挥想蛋白表达)。结果:在小鼠成纤维细胞中表达的癌症特异性突变体P53V143A-GFP,专门锚定在平衡胞骨架上。 I类突变体P53R175C-GFP和II类突变体P53R175S-GFP在COS-7细胞的细胞核中定位。 III类突变体P53R175X-GFP(X:D,F,W或Y),癌症特异性突变体P53V143A-GFP和P53R249S-GFP,专门锚定在COS-7细胞的VimentIngytoskeleton上。在Cterminus(&#916; C63)的P53R249S和P53V143A的缺失专门促进了COS-7和HeLa细胞中缺失的突变P53的核导入,而在N-末端(&#916; N40)或缺失C-末端(&#916; C33)无效。因此,癌症特异性突变体P53R249S和P53V143A采用明显的突变构象,从而采用C-末端区域(AA331-360)与Vimentin细胞骨架和HeLa细胞的细胞骨架相互作用地脱节。野生型P53-GFP专门定位在种植幼细成纤维细胞的细胞核中,与衰老人成纤维细胞的显着细胞质保留相反。在N-末端或C-末端(&#916; N40或#916; C63)删除p53导致较短的同种型的大量核导入,p53&#946;和p47。结论:衰老纤维细胞普通P53采用热点突变体类似符合构象,由于有效的细胞骨架锚定,显着覆盖了核导入。有趣的是,较短的P53同种型可以从细胞骨架锚定逃逸。

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