КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ СИГНАЛОВ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ IN SITU(FISH) ДЛЯ МОЛЕКУЛЯРНО-ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

摘要

Молекулярно-циюгенегическая диагностика с помощью флюоресцентной гибридизации in situ(FISH) является необходимым методом идентификации хромосомных аномалий в различных тканях организма [2, 5]. Необходимость метода Р18Н как для прикладных целей, гак и для фундаментальных исследований в области генетики человека неоднократно отмечалась в литературе В настоящее время данный метод рассматривается как один из основных при диагностике численных и структурных хромосомных аномалий у человека в пре- и постнатальном периоде развития. Он также применяется при исследованиях низкопроцентного мозаицизма по численным хромосомным аномалиям в различных тканях (спонтанные абортусы, клетки кожи, мозга, мышц и крови), при изучении онкологических заболеваний, анатомии клетки, транскрипционной активности генома и других эпигенетических феноменов [2, 6, 7, 10, 12, 15]. Основным преимуществом Р18Н по сравнению со стандартными цитогенетическими методами является возможность идентификации хромосомных аномалий в некультивированных клетках, что является крайне ценным для пренагальной и пре-имплангационной диагностики, а также онкогенетических исследований [1]. Несмотря на то что история применения метода Р18Н насчитывает более 20 лет, в насгоящее время остается ряд нерешенных методических вопросов, связанных в первую очередь с корректной интерпретацией полученных результатов при проведении молекулярно-цитогенетической диагностики [7] В качестве одного из возможных путей решения данной проблемы можно предложить использование метода количественной оценки Р18Н сигналов Учитывая ранее приобретенный опыт в области создания коллекции ДНК-проб, маркирующих гипервариабельные последовательности ДНК генома человека, а также разработки программного обеспечения для молекуляр-но-цигогенетической диагностики [4, 17], можно предположить, что использование цифрового анализа изображения в значительной степени способствует оптимизации метода Р18Н для диагностики различных форм генетической патологии.