Методом комет исследовали пострадиационную гибель лимфоцитов периферической крови человека in vitro. Облучение лимфоцитов индуцирует в них параллельно две формы гибели -некроз и апоптоз, которые могут быть различимы с помощью метода комет. ДНК-кометы, формируемые лимфоцитамипериферической крови, разбиты на три класса: С0/С1 - симметричные или слегка асимметричные нуклеоиды; С2 - асимметричные кометы, содержащие голову и хвост; С3/С4 - кометы с оторвавшимся хвостом и пониженной флуоресценцией. Первый тип комет отвечает жизнеспособным клеткам, ДНК которых не повреждена. Второй тип комет формируют клетки, ДНК которых содержит повреждения. Третий тип - кометы, формируемые погибающими/погибшими клетками, ДНК которых подвержена глубокой деградации. Последний тип комет формируют как некротические, так и апоптотические лимфоциты периферической крови на поздних стадиях гибели.. Внутри каждого типа наблюдается полиморфизм комет. Появление комет С2-класса связано с тем, что продвижение клеток к апоптозу происходит через коммитированное к гибели состояние (предапоптоз), характеризующееся деградацией ДНК на крупные фрагменты. По динамике численности С2-комет можно судить о развитии апоптоза в клеточных популяциях со смешанной формой гибели. Метод ДНК-комет позволяет прослеживать более ранние фазы апоптоза, чем морфологический критерий - фрагментация ядра клетки.
展开▼
