КОНТАМИНАЦИЯ КУЛЬТУР ФИБРОБЛАСТОВ СПОНТАННЫХ АБОРТУСОВ КЛЕТКАМИ МАТЕРИ: ЗНАЧЕНИЕ ДЛЯ ОНТОГЕНЕТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ПРИЧИН ЭМБРИОНАЛЬНОЙ

摘要

Проведен ретроспективный анализ результатов стандартного цитогенетического исследования длительно культивированных фибробластов 478 спонтанных абортусов первого триместра беременности. У 16% эмбрионов с цитогенетически установленным кариотипом 46.ХХ с помощью мо-лекулярно-генетических методов обнаружено наличие Y-хромосомы. Продолжительность культивирования клеток этих зародышей до получения препаратов хромосом оказалась более высокой, чем клеток эмбрионов без Y-хромосомы. Таким образом, позднее вступление культуры эмбриональных фибробластов в фазу логарифмического роста является маркером ее контаминации клетками материнского происхождения. Предложена математическая модель оценки частот кариоти-пов спонтанных абортусов. а также показателя "соотношение полов" с учетом риска контаминации культур экстраэмбриональных тканей клетками матери. Показано, что с учетом контаминации частота хромосомных аномалий в исследованной выборке возрастает от54.6% до 60.3%. а ожидаемое соотношение полов у абортусов с нормальным кариотипом - от 0.66 до 1.02. Экспериментальная проверка предложенной модели, выполненная на 60 эмбрионах с кариотипом 46.ХХ и их родителях с помощью молекулярного анализа наследования полиморфных ДНК-маркеров шестиаутосом (2. 11, 16. 19, 20 и 21). выявила числовые аномалии хромосом в некультивированных тканях семи абортусов (11.7%). в том числе у четырех без Y-хромосомы. что хорошо согласуется с ожидаемой частотой нарушений кариотипа (8.3%), предсказанной моделью. В связи с этим учет риска контаминацииэмбриональных культур клетками материнского происхождения представляется необходимым для корректной оценки масштабов действия естественного отбора у человека, понимания механизмов, лежащих в основе формирования соотношения полов, а также для оценки точности процедур пренатальной цитогенетической диагностики хромосомных нарушений.