МЕТОД КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ мРНК ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ С ПОМОЩЬЮ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ В ГОМОГЕННЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ С МАЛЫМ ЧИСЛОМ КЛЕТОК

摘要

Предложен способ количественной оценки функциональной активности клеток, выделенных методом сортировки на проточном цитометре. Показано, что сразу после выделения и сортировки популяции клеток различались по уровню экспрессии мРНК генов цитокинов, а при культивировании гомогенных популяций без стимуляции наблюдалось увеличение экспрессии мРНК исследованных генов. С помощью разработанной системы можно детектировать количество мРНК генов цитокинов с высокой чувствительностью, от 90 клеток в образце, что позволяет проводить генетический и иммуногенетический анализ экспрессии генов для определения их функции в экспериментах in vitro.