Классическим методом оценки функционального состояния лимфоцитов является реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ), в которой in vitro оценивают степень пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови в ответ на стимулы. В качестве контроля в РБТЛ применяют неспецифические митогены: фитогемагглютинин ФГА и конканавалин А (КонА), которые вызывают в основном Т-клеточный ответ. В настоящее время имеются лишь отдельные разрозненные данные о том, как меняется профиль экспрессии ключевых генов, участвующих в реализации ответа лимфоцитов на неспецифические митогены. В нашей работе была поставлена цель получить целостную картину изменения количества мРНК генов интерлейкина (IL)-2 (IL-2) и рецептора IL-2а (IL-2ra) после стимуляции лимфоцитов ФГА и КонА при культивировании клеток в течение длительного времени, поскольку гены IL-2 и IL-2r являются одними из ключевых в ответе мононуклеарных клеток крови на стимуляцию неспецифическими митогенами. Экспрессию мРНК выбранных генов оценивали с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени, который отличается высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет работать в широком диапазоне концентраций мРНК. В ходе работы определены основные закономерности изменения содержания мРНК генов IL-2 и IL-2r при стимуляции митогенами. Полученные результаты позволяют сделать вывод о разном механизме действия ФГА и КонА на лимфоциты, а также о том, что возможны существенные индивидуальные отличия в ответе лимфоцитов на стимуляцию. Уровень мРНК гена IL-2 можно использовать в качестве маркера активации лимфоцитов под действием КонА в первые же часы после стимуляции, а под воздействием ФГА максимум содержания мРНК этого цитокина достигается лишь на 3-4-е сутки культивирования.
展开▼
