受容体－Gα融合タンパク質を用いたリガンド検索

摘要

Gタンパク質共役受容体（GPCR）は三景体Gタンパク質と共役して働き，現在使用されている臨床其の約5割以上がGPCRをターゲットにしていると言われている1）．GPCRのリガンド検索は公的研究機関だけでなく，創薬をめざす製薬会社やベンチャー企業などが盛んに行っているが，その活性測定法のほとんどは動物培養細胞で対象とするGPCRを発現させ，リガンド候補となる物質を作用させたときに起こる細胞の変化を観測することを基本にしている．多くの方法が開発された中で，最も成果を上げ，広く用いられている方法は，アゴニスト→GPCR→Gタンパク質（特にG_q系）→PLC（ホスホリパーゼC）→IP_3→細胞内カルシウム濃度上昇という一連の変化で起こる変化を，細胞に導入したFura－2やFluo-3などの蛍光の変化で観測する方法である．今日ではG_iなどに共役したGPCRに対する感度を上げるため，G_(16)タンパク質やG_(q/i)キメラタンパク質をGPCRと共発現させた細胞を用いることが多いが2），この方法の問題点も指摘されている．また受容体発現細胞にもともと存在する内在性受容体の効果が，活性測定の結果を混乱させるもととなる．