Рекомбинантный белок ТрО965 Treponema pallidum как перспективный антиген для совершенствования серологической диагностики сифилиса

摘要

Обоснование. Специфические (трепонемные) серологические тесты, основанные на поиске антител к иммунореактивным белковым антигенам Treponema pallidum, являются ключевым методом современной лабораторной диагностики сифилиса. В связи с невозможностью культивирования данного микроорганизма in vitro широкое распространение получило клонирование целевых генов Т. pallidum с последующим выделением и использованием рекомбинантных белков для проведения диагностических исследований. Актуальным является расширение спектра подобных антигенов как инструментов совершенствования диагностики сифилиса и дифференциальной диагностики различных форм этого заболевания. Цель исследования. Оценка аналитических возможностей (чувствительности и специфичности) рекомбинантного белка ТрО965 Т. pallidum как нового антигена для серологической диагностики сифилиса. Методы. Ген tpO965 Т. pallidum клонирован в вектор рЕТ28а; трансформированный полученной экспрессионной системой штамм Escherichia coli BL-21(DE3) использован для выделения и очистки целевого белка. Прямое сравнительное нерандомизированное исследование аналитических возможностей рекомбинантного белка ТрО965 проведено методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием сывороток крови пациентов с различными формами сифилиса (п-84) в сравнении с группой здоровых доноров (п=25). Результаты. Иммуноферментный анализ в отношении рекомбинантного белка ТрО965 показал высокое число положительных результатов с сыворотками крови больных сифилисом в сравнении с группой здоровых доноров. Чувствительность серологического исследования составила 97,5%, специфичность - 87,5%. Наиболее высокие значения чувствительности (100%) зафиксированы в группах пациентов с первичным, вторичным и ранним скрытым сифилисом с некоторым снижением (до 89,5%) в группе пациентов с поздним скрытым сифилисом. Заключение. Результаты исследования характеризуют рекомбинантный белок ТрО965 Т. pallidum как новый перспективный антиген для совершенствования трепонемных тестов серологической диагностики сифилиса, в том числе предназначенный для выявления ранних форм этого заболевания.