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E.定量的遺伝子検出法1.Real-time PCR法(TaqMan PCR,Lightcycler)による遺伝子定量

机译:E.定量基因检测方法1.通过实时PCR方法(TaqMan PCR,Lightcycler)进行基因定量

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摘要

従来の定量的遺伝子検出法はompetitivePCR法が用いられてきたが,その労力と操作の煩雑さから実際的ではなかった。 1996年に発表されたReal-time PCR法は感度が高く,正確で再現性も良い。 簡便でサンプル処理能力に優れた遺伝子定量システムである。その対象札DNAおよびRNAであるため多岐にわたり臨床応用されている。なかでも各種感染症ウイルス,固形腫瘍,白血病関連遺伝子の定量に利用されておりす各種治療後の遺伝子量をモニタリングすることで治療の効果,予後の判定,再発の指標に役立てられている。一方で正確な定量値を得るための方法論の構築,精度管理には十分留意しなければならない。 本項ではReal-time PCR法のTaqMan PCR,Light cyclerによる定量的遺伝子検出システムについて概説する。
机译:竞争PCR方法已经被用作常规的定量基因检测方法,但是由于其劳动和操作复杂而不实用。 1996年发布的实时PCR方法具有很高的灵敏度,准确性和可重复性。这是一个简单的基因定量系统,具有出色的样品处理能力。由于它是目标标签DNA和RNA,因此已在临床上得到广泛应用。特别是,它可用于量化各种传染病病毒,实体瘤和白血病相关基因,通过监测各种治疗后的基因数量,可作为治疗效果,预后和复发的指标。另一方面,有必要充分注意方法的构建和质量控制以获得准确的定量值。本节概述了实时PCR方法的TaqMan PCR和使用Light Cycler的定量基因检测系统。

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