Использование методов поверхностного плазмонного резонанса и биослойной интерферометрии для изучения белок-белковых взаимодействий на примере фермента подтипа гликозилгидролазы (КФ 3.2.1) и специфических антител к нему

摘要

Методами поверхностного плазмонного резонанса и биослойной интерферометрии охарактеризованы два полученных ранее полноразмерных полностью человечес- ких антитела, обратимо связывающих активную форму фермента, принадлежащего к подтипу КФ 3.2.1, которая используется для заместительной ферментативной тера- пии при некоторых болезнях патологических лизосомных накоплений. Показано, что в нормальных физиологических условиях сконструированные антитела специ- фически связываются с антигеном (KD ～10~(-8) М) и быстро диссоциируют при ней- тральных значениях рН в 60%-ном этиленгликоле, оставляя ферментативную актив- ность неизменной. Разработанные антитела благодаря своим свойствам могут быть использованы в промышленности в качестве аффинного лиганда при выделении те- рапевтической субстанции фермента.