СОПРЯЖЕНИЕ ГИДРОЛИЗА ATP И ПРОТЕОЛИЗА ПРИ ФУНКЦИОНИРОВАНИИ IN VITRO МУТАНТНЫХ ПО АТР-АЗНОМУ ЦЕНТРУ ФОРМ Lon-ПРОТЕИНАЗЫ Е. coli

摘要

С целью идентификации аминокислотных остатков АТР-азного домена Lon-протеиназы Е. coli, уча-фтвующих в гидролизе АТР и входящих в систему передачи сигнала с АТР-азного домена на проте-флитический, проведена модификация потенциально важных остатков АТР-азного домена методом направленного мутагенеза и исследованы свойства полученных мутантных форм фермента. Установлено, что остатки К362, Т363 (мотив А Уолкера) и D423 (мотив В) участвуют в катализе гидролиза АТР. При этом К362 и Т363 участвуют также в системе междоменного сопряжения, a D423, по-видимому, не играет существенной роли в функционировании этой системы. Остаток D387 важен для функционирования АТР-азного центра, однако не является каталитически активным, как постулировано в литературе. Показано также, что определенную роль в системе междоменной передачи сигнала сопряжения играет остаток Y493.