DIAGNOSTIC VALIDATION OF OVINE AND CAPRINE BRUCELLOSIS USING SERUM- AND MILK-ELISA

摘要

Aim: To introduce and validate the new method of diagnosing ovine and caprine brucellosis in a rapid, accurate and inexpensive manner by using i-ELISA (serum/milk) technique. Methods: Serum and milk samples from brucella RB and CFT negative (n = 881) and positive (n = 755) animals were used. Standardization of tests was through the Bommeli ELISA-BESW (Brucella Bang) standard and our Institute's (MKD) working standards (positive serum and milk based on B. melitensis antigen). Results: Validation of serum/ milk ELISA for detecting ovine and caprine brucellosis was completed. The specificity obtained for the serum ELISA was 99.0% for the Bommeli system (at cut-off of 30% of positivity - PP) and 99.4% for the MKD system (at cut-off 15% PP). The sensitivities of serum ELISAs at the same cut-off were 98.5% for the Bommeli and 96.6% for the MKD test. Parallel milk samples from the same animals showed a specificity of 99.5% in the Bommeli system (at cut-of 30% PP) and 99.8% in the MKD system (at cut-off 25% PP). The sensitivity of the milk ELISAs were 94.6% for the Bommeli test and 95.6% for the MKD test. Conclusion: The Bommeli ELISA and MKD ELISA were successfully standardized and validated as confirmatory tests for the diagnosis of B. melitensis in sheep and goat samples (milk/sera). Using our Institute's milk standard, we confirmed successful screening of brucellosis in pooled milk samples from 100 sheep and 100 goats.%Цел: Да се воведе и валидира нова метода за дијагностицирање на бруцелозата кај овците и козите на брз, прецизен и евтин начин со помош на i-ELISA (серум/млеко) техниката. Меwо∂u: Користени се примероци на серум и млеко кои на бруце-лоза со RB и реакција на врзување на комплемента (РВК) се негативни (п = 881) и позитивни (п = 755). Стандардизација не тестовите беше направена преку Bommeli ELISA-BESW (Brucella Bang) стандардот и работайте стан-дарди (МКД) на нашиот институт (позитивен серум и млеко врз основа на В. melitensis антигенот). Резулwаwu: Валидирање на серум/млеко ELISA за откривање на бруцелозата кај овците и козите беше извршено. Специфичноста добиена за серум ELISA беше 99.0% според Bommeli системот (со гранична вредност -cut-off - од 30% на позитивност - ПП) и 99.4% според МКД системот (со гранична вредност - cut-off-од 15% на позитивност - ПП). Чувствителноста на серум ELISA за истата гранична вредност беше 98.5% според Bommeli и 96.6% според МКД тестот. Паралелните примероци на млеко од истите животни покажаа специфичност од 99.5% според Bommeli системот (со гранична вредност од 30% ПП) и 99.8% според МКД системот (со гранична вредност од 25% ПП). Чувствителноста на млеко ELISA беше 94.6% според Bommeli и 95.6% според МКД тестот. Заклучок: Bommeli ELISA и МКД ELISA беа успешно стандардизи-рани и валидирани како тестови за потврдување на дијагнозата на В. melitensis со примероци од овци и кози (млеко/серум). Користејќи го стандардот за млеко од нашиот институт, ние го потврдивме успешниот скрининг на бруцелозата од збирни примероци на млеко од 100 овци и 100 кози.