人脐带间充质干细胞植入大鼠肝切模型中的分化研究

摘要

目的:探讨携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)植入肝部分切除大鼠体内后,其在大鼠肝脏中的分化能力.方法:首先将人脐带间充质干细胞分离培养并且进行表面标志物检测,以携带EGFP标记的慢病毒载体(lentiviral vector,LV)转染HUC-MSC.将SD大鼠随机分成3组:空白组、模型组及实验组,3组均建立大鼠肝切模型,空白组不注入HUC-MSC,模型组注入未标记的HUC-MSC,实验组注入EGFP标记的HUC-MSC.3个月后分离大鼠肝脏细胞,继而进行相关指标检测.冰冻切片HE染色观察病理结构,流式细胞仪检测间充质干细胞的纯度及CD90在肝细胞中的表达量,荧光显微镜观察EGFP在肝组织的表达.结果:病理切片显示带有EGFP的人脐带间充质干细胞在组织上表达,其中一部分聚集于血管内,形成栓子,附在血管壁上；手术后各组大鼠的肝都有炎症反应,但组织结构良好,各组间未见明显的形态学差异.HUC-MSC高表达CD44、CD29、CDI05和CD90,不表达CD34、CD45、CD106、CD31、CD40和HLA-DR.流式结果显示模型组EGFP的表达率为(0.27±0.21)％,实验组为(11.68±1.46)％,与模型组相比具有统计学意义(P＜0.01).CD90的表达结果显示模型组CD90的表达量较高,为(0.843±0.146)％,实验组低表达CD90,阳性率为(0.026±0.017)％,与模型组相比具有统计学意义(P＜0.01).结论:人间充质干细胞可以分化为肝细胞,LV介导EGFP标记的人间充质干细胞可以稳定分化为肝细胞并且被检测到,但是易于形成栓子,肝细胞低表达CD90,为以后干细胞的分化提供实验依据.