Isolamento, expans?o e diferencia??o de celulas tronco mesenquimais oriundas da medula óssea de coelhos

摘要

Resumo: A engenharia de tecidos tem sido uma técnica fundamental no campo da medicina regenerativa, uma vez que permite a cria??o de pe?as teciduais tri-dimensionais por meio da associa??o de células mesenquimais indiferenciadas (ou células estromais mesenquimais - CEMs) e moldes de biomateriais in vitro. Assim, muitos estudos têm sido realizados utilizando estas células oriundas de diferentes espécies animais, e os coelhos s?o frequentemente utilizados como um modelo animal para estudos in vivo de repara??o tecidual. No entanto, a maioria das informa??es disponíveis sobre a coleta e caracteriza??o de CEMs referem-se às células humanas e murinas, o que traz algumas dúvidas para pesquisadores que desejam trabalhar com coelhos em estudos de repara??o de tecidos baseados em CEMs. Neste contexto, o presente estudo objetivou contribuir e aprimorar as informa??es disponíveis na literatura científica fornecendo uma técnica completa para o isolamento, expans?o e diferencia??o das MSCs de coelhos. Células mononucleares da medula óssea (CMMOs) do úmero e fêmur de coelhos foram obtidas e, para avaliar sua taxa de prolifera??o, três meios de cultura diferentes foram testadas, aqui referidos como DMEM-P, DMEM'S e α-MEM. As CMMOs também foram cultivadas em meios de indu??o osteogênico, condrogênico, e linhagens adipogênico para provar a sua multipotencialidade. Concluiu-se que as técnicas sugeridas neste estudo podem fornecer um guia para a coleta e isolamento de CEMs da medula óssea de coelhos em quantidade suficiente para permitir a sua expans?o e, com base na experiência de laboratório onde o estudo foi desenvolvido, é também sugerida uma formula??o de meio de cultivo para proporcionar uma melhor taxa de prolifera??o celular com preserva??o da multipotencialidade.