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【24h】

Cultura, caracteriza??o e diferencia??o de precursores neurais do sistema nervoso central de porquinho-da-índia (Cavia porcellus Linnaeus, 1758)

机译:豚鼠中枢神经系统中神经前体的培养,鉴定和分化(Cavia porcellus Linnaeus,1758)

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摘要

Resumo: áreas potencialmente neurogênicas foram identificadas por incorpora??o de bromodeoxiuridina (BrdU) na zona subventricular (SVZ) dos ventrículos laterais, hipocampo e bulbos olfatórios de cobaias neonatos. Precursores neurais provenientes da SVZ foram cultivados em suspens?o, resultando na gera??o de neuroesferas (NSFs), que quando dissociadas foram capazes de proliferar e gerar novas NSFs. Quando cultivadas na ausência de fatores de crescimento, as células provenientes de NSFs dissociadas apresentaram evidências de diferencia??o neuronal, dando origem a células da linhagem neural. Citometria de fluxo em células das NSFs após a diferencia??o revelou aproximadamente 13,3% positivas para nestina, 5,5% positivas para Beta-III-tubulina, 9% positivas para GFAP e 7,8% positivas para mGalC. Testes de funcionalidade pela mensura??o de influxo de cálcio após estímulo com ácido gama amino butírico (GABA) e glutamato revelaram a estimula??o de células diferenciadas, um indicador de fun??o neuronal. A capacidade de células da SVZ de fetos de cobaias originarem células neurais funcionais in vitro é promissora para a pesquisa e eventual uso terapêutico de células tronco em disordens do sistema nervoso.
机译:摘要:通过将溴脱氧尿苷(BrdU)掺入新生豚鼠侧脑室,海马和嗅球的脑室下区(SVZ),可以识别潜在的神经源性区域。来自SVZ的神经前体在悬浮液中生长,从而生成神经球(NSF),这些神经球在解离后能够增殖并生成新的NSF。在没有生长因子的情况下培养时,来自离解的NSF的细胞显示出神经元分化的证据,从而产生了神经谱系的细胞。分化后,NSF细胞中的流式细胞仪显示巢蛋白阳性约13.3%,β-III-微管蛋白阳性5.5%,GFAP阳性9%,mGalC阳性7.8%。通过测量γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸刺激后钙的流入的功能测试,揭示了分化细胞的刺激,这是神经元功能的指标。来自豚鼠胎儿的SVZ细胞体外产生功能性神经细胞的能力有望用于研究干细胞并最终在神经系统疾病中进行治疗。

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