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【24h】

Crescimento micelial e síntese de proteínas de choque térmico em três isolados de fungos ectomicorrízicos sob condi??es de temperaturas supra-ótimas

机译:最佳温度条件下三种外生菌根真菌的菌丝体生长和热休克蛋白合成

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摘要

A síntese de proteínas de choque térmico é uma altera??o fisiológica transiente na célula de organismos expostos a temperaturas supra-ótimas. A resposta fisiológica ao choque térmico é dependente, particularmente, do tipo de célula e da capacidade dos organismos em responder às altera??es do meio. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento micelial e a síntese de proteínas de choque térmico de dois isolados de Pisolithus sp. (RV82 e RS24) e de um isolado de Paxillus involutus em temperaturas supra-ótimas. No trabalho, foram feitas análises de crescimento micelial em placa de Petri com meio apropriado para o crescimento sob condi??es de temperaturas subletais, letais e de choque térmico. As proteínas nos micélios dos isolados foram marcadas com aminoácido radioativo (3H-leucina), e a radioatividade, quantificada em solu??o de cintila??o. A síntese das proteínas de choque térmico (HSPs) foi avaliada em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE e 2D-PAGE). Demonstrou-se, com 3H-leucina, que os fungos ectomicorrízicos apresentaram respostas diferenciadas em rela??o ao crescimento micelial quando expostos a temperaturas supra-ótimas. Os dois isolados de Pisolithus sp., RS24 e RV82, mostraram-se mais tolerantes a altas temperaturas, quando comparado ao isolado de P. involutus. Os isolados de Pisolithus sp. diferem quanto à síntese de proteínas de estresse, com a síntese de HSPs de alta e de baixa massa molecular. Em resposta ao choque térmico, o isolado RV82 sintetizou proteínas putativas dos grupos HSP70, HSP28 e HSP26 e as sHSPs (15-18 kDa), enquanto o isolado RS24 sintetizou as dos grupos HSP86, HSP60, HSP55 e HSP35 e as sHSPs (12-18 kDa). A baixa tolerancia a temperaturas elevadas do isolado de P. involutus foi atribuída à ausência de síntese de proteínas putativas do grupo HSPs em condi??es de choque térmico. Os resultados sugerem que os isolados de fungos ectomicorrízicos diferem quanto ao mecanismo de indu??o de termotolerancia.
机译:热激蛋白的合成是暴露于最佳温度下的生物体细胞中的短暂生理变化。对热休克的生理反应尤其取决于细胞的类型和生物对环境变化做出反应的能力。本研究旨在评估菌丝体生长和热激蛋白合成的两个分离株的Pisolithus sp。 (RV82和RS24)以及超最佳温度下的渐开线Paxillus分离株。在这项工作中,在培养皿中进行了菌丝生长分析,并用适当的培养基在亚致死,致死和热休克条件下进行生长。用放射性氨基酸(3H-亮氨酸)标记分离株菌丝体中的蛋白质,并在闪烁液中定量放射性。在聚丙烯酰胺凝胶上(SDS-PAGE和2D-PAGE)评估了热激蛋白(HSP)的合成。用3H-亮氨酸证明,暴露于最佳温度时,外生菌根真菌对菌丝体生长表现出不同的反应。与渐开线假单胞菌相比,Pisolithus sp。的两个分离株RS24和RV82更耐高温。 Pisolithus sp。的分离株。应激蛋白的合成,高分子量和低分子量HSP的合成都不同。响应热冲击,从HSP70,HSP28和HSP26和sHSPs(15-18 kDa)组中分离出RV82合成的推定蛋白,而从RSP24,HSP60,HSP55,HSP35和sHSPs组中分离出RV82合成的蛋白(12- 18 kDa)。渐近线疟原虫分离株对高温的低耐受性归因于在热激条件下不存在假定的HSPs基团蛋白合成。结果表明,在诱导耐热性的机制方面,外生菌根真菌的分离株是不同的。

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